快速筛选调节肝脂酶活性中药成分方法的研究

《快速筛选调节肝脂酶活性中药成分方法的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、快速筛选调节肝脂酶活性中药成分方法的研究作者：贝伟剑，郭姣，胡因铭，黄利华，胡旭光，曹扬【摘要】目的研究快速筛选调节肝脂酶活性中药成分的方法。方法利用大鼠肝组织匀浆和比色法检测肝脂酶(HL)活性，观察不同实验条件及中药成分对HL活性的影响。结果正常大鼠肝组织匀浆具有明显的HL酶促动力学特性，其HL脂解活性有明显Ca2+依赖性，受钙调蛋白拮抗剂盐酸异丙嗪抑制，符合纯化HL的酶促动力学特性;筛选得到齐墩果酸和人参皂苷Rb2个增强肝脂酶活性成分。结论首次用大鼠肝组织匀浆和脂酶比色测定法建立了一种简便易行、快捷的调节肝脂酶活性中药有效成分筛选方法，可用于影响肝

2、脂酶活性的中药调脂活性成分的筛选，并从有效方药组分中筛选得到有增强HL活性的组分。【关键词】肝脂酶;快速筛选;大鼠肝匀浆;复方贞术调脂方;肝脂酶激活剂Abstract:ObjectiveTostudythenewapproachforrapidscreeningofactiveingredientsfromChinesemedicineregulatinghepaticlipaseRatliverhomogenateandcolorimetricassayofhepaticlipase(HL)activitieswereusedtoinvestigat

3、etheeffectsofdifferentcomponentsofChinesemedicineonhepaticlipaseItwasfoundthatliverhomogenateofSDratsdemonstratedsignificantenzymekineticpropertiesofHL.ItslipolyticactivitieswassignificantlyCa2+dependent,andinhibitedbycalmodulinantagonistpromethazinehydrochloride,consistentwith

4、theenzymatickineticpropertiesofpurifiedHLreportedintheliterature.OleanolicacidandginsenosidesRbwasscreenedoutastheactivatorsofThemethodforrapidscreeningoftheactiveingredientofChinesemedicineregulatingHLactivitiesbyusingratliverhomogenateincombinationwithcolorimetricassayofHLacti

5、vitieswasdeveloped,whichwassimpleandreliable,andcouldbeusedin.rapidscreeningoflipidloweringingredientsintraditionalChinesemedicinehavingeffectsonHLactivities,andscreeningofactiveingredientsthatmightincreaseHLactivitiesfromeffectiverecipesoftraditionalChinesemedicine.Keywords:he

6、paticlipase(HL);rapidscreening;ratliverhomogenate;FufangZhenzhuTiaozhiFang(FTZ)recipe;hepaticlipasactivator肝脂酶(hepaticlipase,HL)是重要的脂代谢酶，其合成、分布、活性的变化和高脂血症、脂肪肝、动脉粥样硬化等密切相关。肝组织和血浆中HL酶活性的降低，可引起高脂血症[1-3]，并在脂肪肝发病中起重要作用[4，5]。复方贞术调脂方(简称FTZ)由女贞子、丹参、三七、黄连等中药组成，含有齐墩果酸、三七皂苷、黄连素、丹参素等活性成分，在临

7、床应用和实验研究中发现该方不仅具有明显的降低总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)及升高高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)的作用,并能升高血浆HL活性、抑制动脉粥样硬化(AS)形成、抑制脂肪肝形成等作用[6，7]，还能使饮食性高脂血症模型大鼠降低的肝组织和血浆中HL的活性恢复至正常水平[7]。为了研究中药降血脂的物质基础和筛选新药，本研究以HL为靶点，以FTZ组分为调节HL活性成分的筛选对象，研究建立一种采用大鼠肝匀浆比色法测定肝脂酶活性，快速筛选调节HL活性中药有效成分的方法，现报道如下。1材料与仪器材料与试剂FTZ提取物

8、称取FTZ处方药材(由女贞子、丹参、三七、黄连等按2∶1∶∶质量比组成)，置圆底烧瓶中，加70