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1、我国菲牛蛭的研究概况【摘要】综述了我国菲牛蛭的地理分布、野生资源情况、生态习性和采收季节、化学成分、生物活性成分、药理学作用、分离纯化以及菲水蛭素基因的克隆和序列测定。认为菲牛蛭可作为一种新的药用资源加以研究。【关键词】菲牛蛭化学成分药理学作用菲牛蛭Poecilobdellamanillensis，俗名金边蚂蟥，别名为马尼拉医蛭，隶属于环节动物门Annelida，蛭纲Hirudinea，无吻蛭目ArhynchobdellidaBlanchard，医蛭科HirudindaeWhitman，牛蛭属PoecilobdellaBlanchard。牛蛭属已知种有菲
2、牛蛭PoecilobdellamanillensisLesson颗粒牛蛭Poecilobdellagranulosa，湖北牛蛭Pecilobdella1hubEiensis和Poecilobdellaviridis。1968年国外Keegan［1］对东南亚的菲牛蛭生活习惯进行观察。1992年StEIner［2］从产自马尼拉的菲牛蛭中分离纯化新的水蛭素,测定其原始结构和功能表明有抗凝活性。199年Scacheri［3］从菲牛蛭中分离出种水蛭素变异体,测定其氨基酸序列，cDNA克隆和表达,表达产物有抗凝活性。200年谭恩光等［4］从广东产的菲牛蛭基因组中PC
3、R扩增出水蛭素基因,并克隆和测序。在此，本文仅对我国菲牛蛭的一些研究进行综述，为开发菲牛蛭资源提供参考。1菲牛蛭地理分布、野生资源情况、生态习性和采收季节菲牛蛭主要分布在菲律宾、泰国、越南等东南亚地区及中国的东南、中部和西南部地区。由于有关我国菲牛蛭地理分布、野生资源情况以及生态习性和采收季节相关报道很少，因此，我们对广西区内具有代表性的灵川、象州、岑溪、博白、防城、隆安、田东等15个县的菲牛蛭品种生物学特征、资源数量分布、生态习性和采收季节进行调查，共收集到水蛭样品15份。经外貌与形态特征的初步鉴定，与我国水蛭分类学专家杨潼所描述的菲牛蛭相同，说明区内
4、分布的水蛭以菲牛蛭品种为主。分布在区内各地的菲牛蛭，经体重测定差异不显著，但在数量上桂东南地区明显多于桂西北，钦州、防城野生资源比较丰富，罗城、巴马等地野生资源稀少。数量分布的多寡与温度、雨量、湿度等气候因素有关，符合水蛭喜温、湿、热的特性。通过样品的收集为优化种苗选择提供了丰富的物质基础。菲牛蛭生态环境要求和生态习性：根据野外的考察表明，菲牛蛭喜欢在土壤含铁量较高、水体呈弱酸性的环境中繁衍。在野外多发现于荒芜的山塘和山冲田块或湿草地，尤其是土层深厚、土质疏松潮湿,各种水草生长旺盛,并且经常有耕牛、人活动，呈土畦式水体相对固定的环境中多见，常年耕作的田块
5、和已开发养殖的山塘或大面积连体的水体中很少发现。菲牛蛭的采收季节：经调查发现，菲牛蛭对温度反应敏感。水温在25～30℃时，活动最活跃，生长最快，也是繁殖的季节。在野外当水温低于15℃时便停止活动，因此，每年的11月前后到次年的4月前后很少发现有菲牛蛭在水中活动，这时它们都进入泥土里越冬，这与其为冷血变温动物，冬季具有冬眠习性相一致。这样菲牛蛭的采收时间宜选择在9～10月份，此时，气温下降，菲牛蛭生长速度减慢，但仍在水中，易于捕捉。菲牛蛭的化学成分.1菲牛蛭中脂肪酸分析苗艳丽等［5］对广西产菲牛蛭脂肪酸提取液进行气相色谱/质谱(GC/MS)分析,共分离出1
6、个峰。与标准谱库对照分析,鉴定了16个组分,脂肪酸的相对含量采用总离子流各色谱峰面积归一化法定量,结果见表1。实验共鉴定了菲牛蛭中脂肪酸的16个组分,占脂肪酸总量的97.%,其中饱和脂肪酸占%，不饱和脂肪酸占%。饱和脂肪酸主要有硬脂酸、棕榈酸、肉豆蔻酸等;不饱和脂肪酸主要包括油酸、11-二十碳烯酸等。其中含量最多的是十六烷酸，达到%，其次是-十八碳烯酸,含量为%；11-二十碳烯酸含量为%。菲牛蛭中所含的单不饱和脂肪酸,如-十八碳烯酸和11-二十碳烯酸的含量高于中药蚂蟥中的含量［6］。表1菲牛蛭中脂肪酸的组成及含量序号脂肪酸分子式(甲脂)相对含量(%)1-
7、甲基十三酸C15H30O21.022十四酸(肉豆蔻酸),,1-三甲十三酸十四酸(异构体)十五酸甲基十五酸十六烯酸十六酸(棕榈酸)甲基-十六酸甲基-十六酸十七酸，7，11，1-四甲基十六酸十八烯酸十八烯酸十八酸(硬脂酸)-二十烯酸.2菲牛蛭中氨基酸的分析苗艳丽等［5］采用HPLC法，测定广西产菲牛蛭提取液中的氨基酸。并采用内标法进行含量测定,结果见表2。测定结果表明菲牛蛭中含有18种氨基酸，甘氨酸的含量最高为μg/g，其次是亮氨酸含量为μg/g。其中含有人体必需的7种氨基酸,这7种必需氨基酸含量为μg/g，占氨基酸总量的%；高于其他水蛭［7］中必需氨基酸的
8、含量。表2菲牛蛭中氨基酸的组成及含量μg·g-1氨基酸含量氨基酸含量△天门冬氨酸
