茶皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究

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1、茶皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究【摘要】目的观察茶皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，以茶皂素灌胃给药，观测其对脑缺血大鼠的神经行为、脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮合酶(NOS)活性及一氧化氮(NO)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量的影响。结果茶皂素能明显改善脑缺血大鼠的神经行为，拮抗脑缺血再灌注引起的SOD活力的下降及ROS、MDA含量的升高，并使脑缺血大鼠的脑组织中NO及NOS水平明显下降。结论茶皂素对大鼠局灶性脑缺血再

2、灌注损伤具有很好的保护作用。【关键词】茶皂素局灶性脑缺血自由基一氧化氮【Abstract】Objective:ToobservetheprotectiveeffectofteasaponinonFocalcerebralischemia-reperfusion:Makefocalcerebralischemia-reperfusionmodelofratbysuture,deliveryteasaponinbyobservetheinfluenceofteasaponintoneurobehavioraland

3、brainsuperoxidedismutase(SOD),nitricoxidesynthase(NOS)activityandnitricoxide(NO),reactiveoxygenspecies(ROS),malondialdehyde(MDA)contentincerebralischemiarats.Results:Teasaponincanimproveneurobehavioralincerebralischemiaratsobvious-lyandantagonistcerebralisch

4、emia-reperfusion-induceddeclineinSODvitalityandROS,MDAcontentincreasedandmakethelevelsofNOandNOSdecreasedobviouslyinbraintissueofcerebralischemia:Teasaponincanprotecttheratswithfocalcerebralischemia-reperfusioninjuryverywell.【Keywords】TeasaponinFocalcerebral

5、ischemiaFreeradicalsNitricoxide茶皂素(Teasaponin：TS)是从茶树中提取的一种五环三萜类植物皂甙，由配基、糖体和有机酸三部分组成，存在于茶籽、茶叶、茶根等各个部分，具有多种生物活性。据报道[1]，茶皂素有明显抗炎、抗渗透、抗菌、化痰、止咳、镇痛等作用，而且有防止高血压、高血糖及化痰止咳的作用。目前，对茶皂素关于脑缺血再灌注损伤的研究报道较少。本实验旨在建立动物脑缺血再灌注模型，观察茶皂素对实验性大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。1材料茶皂素的制备[2～3]挖取5年以上树龄的

6、茶树根，洗净，切片，烘干，粉碎成粗粉，按料液比l：4加80%乙醇进行超声波法提取。工艺参数：超声波频率为20kHz，提取时间为20min，提取溶液温度为50℃。所得提取液经大孔吸附树脂层析、乙醇洗脱、脱色剂处理后，浓缩烘干，得到茶皂素。产品接近白色，纯度达%-%。在空气中放置不吸潮、不变色。试剂与仪器R0S、SOD、MDA、NO、NOS及考马斯亮蓝试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品：SC-302超声波清洗仪，TGL-16型高速台式离心机(上海医用分析仪器厂生产)，722-型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司

7、生产)。动物SD大鼠60只，雌雄各半，重250~300g，由湖北省实验动物中心提供。方法.1大鼠局灶性脑缺血模型的制备(MCAO法)[4]SD大鼠共60只，分2批，第1批用于观察神经行为；第2批用于观察脑组织SOD、NOS活力及ROS、MDA和NO含量的变化。每批分为3组，即假手术组、模型组和茶皂素组，每组10只。各组动物均于手术前灌胃给药3d，每天1次，其中茶皂素组给予茶皂素(/)，假手术组及模型组均灌胃给予等体积的生理盐水。第3天给药后20min，采用颈内动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。将

8、大鼠用20%的乌拉坦(1g/kg)腹腔注射麻醉，仰卧固定在手术台上，颈部正中切口，分离右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，暂时夹闭颈总动脉、颈外动脉，在颈总动脉分叉下方剪一切口，将一预先用酒精灯烧成圆头的尼龙线(直径为)插入颈内动脉至大脑中动脉起始端，进线深度距颈内、颈外动脉分叉处18～20rnm左右可感到阻力，阻断右侧大脑中动脉血流。2h后抽出尼龙线，扎紧动脉残端，缝合皮肤，予以再灌注