茶皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究论文

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1、茶皂素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤保护作用的研究论文.freelia-reperfusioninjury.Methods:Makefocalcerebralischemia-reperfusionmodelofratbysuture,deliveryteasaponinbyIg.Toobservetheinfluenceofteasaponintoneurobehavioralandbrainsuperoxidedismutase(SOD),nitricoxidesynthase(NOS)activityandnitricoxide(NO)

2、,reactiveoxygenspecies(ROS),malondialdehyde(MDA)contentincerebralischemiarats.Results:Teasaponincanimproveneurobehavioralincerebralischemiaratsobvious-lyandantagonistcerebralischemia-reperfusion-induceddeclineinSODvitalityandROS,MDAcontentincreasedandmakethelevelsofNOandNO

3、Sdecreasedobviouslyinbraintissueofcerebralischemiarat.Conclusion:Teasaponincanprotecttheratsia-reperfusioninjuryveryiaFreeradicalsNitricoxide茶皂素(Teasaponin：TS)是从茶树中提取的一种五环三萜类植物皂甙，由配基、糖体和有机酸三部分组成，存在于茶籽、茶叶、茶根等各个部分，具有多种生物活性。据报道1.freelin，提取溶液温度为50℃。所得提取液经大孔吸附树脂层析、乙醇洗脱、脱色剂处理后，浓

4、缩烘干，得到茶皂素。产品接近白色，纯度达92.8%-93.1%。在空气中放置不吸潮、不变色。1.2试剂与仪器R0S、SOD、MDA、NO、NOS及考马斯亮蓝试剂盒均为南京建成生物工程研究所产品：SC-302超声波清洗仪（上海波龙设备有限公司），TGL-16型高速台式离心机(上海医用分析仪器厂生产)，722-型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司生产)。1.3动物SD大鼠60只，雌雄各半，重250~300g，由湖北省实验动物中心提供。2方法2.1大鼠局灶性脑缺血模型的制备(MCAO法)4SD大鼠共60只，分2批，第1批用于观察神经行为；第2批

5、用于观察脑组织SOD、NOS活力及ROS、MDA和NO含量的变化。每批分为3组，即假手术组、模型组和茶皂素组，每组10只。各组动物均于手术前灌胃给药3d，每天1次，其中茶皂素组给予茶皂素(0.5g/kg.bin，采用颈内动脉线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型。将大鼠用20%的乌拉坦(1g/kg)腹腔注射麻醉，仰卧固定在手术台上，颈部正中切口，分离右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉，暂时夹闭颈总动脉、颈外动脉，在颈总动脉分叉下方剪一切口，将一预先用酒精灯烧成圆头的尼龙线(直径为0.26mm)插入颈内动脉至大脑中动脉起始端，进线深度距颈

6、内、颈外动脉分叉处18～20rnm左右可感到阻力，阻断右侧大脑中动脉血流。2h后抽出尼龙线，扎紧动脉残端，缝合皮肤，予以再灌注24h。假手术组大鼠麻醉后，仅暴露颈内外动脉分叉，不闭塞MCA。2.2神经病学评分第1批大鼠采用5分制评分标准5，分别于缺血再灌注后3h、6h、12h、24h进行评分。0分=无神经损伤症状；１分=不能完全伸展对侧前肢；2分=向外侧转圈；3分=向对侧倾倒；4分=不能独自行走，意识丧失。2.3生化指标的测定第2批大鼠再灌注24h后，处死大鼠，迅速取脑称重。用生理盐水制成10％脑组织匀浆液，低温离心，取上清液，按试剂盒说明

7、书分别测定大脑组织中SOD、ROS、MDA及NO、NOS含量。按考马斯亮蓝法标定蛋白含量。2.4统计学处理实验数据采用SPSSFORDA、SOD的影响MCAO大鼠脑组织中SOD活性较假手术组明显减少，ROS、MDA含量明显增加(P0.05)；与模型组比较，茶皂素组能不同程度的改善脑损伤，抑制脑组织ROS、MDA的产生，提高SOD活性，差异显著(P0.05)。3.3茶皂素对局灶性脑缺血大鼠脑组织NO、NOS的影响MCAO大鼠脑组织中NO含量及NOS活性较假手术组明显增加；与模型组比较，茶皂素组能不同程度的改善脑损伤，抑制脑组织NOS的活性，减

8、少NO的含量。4讨论缺血性脑血管疾病是临床的常见病和多发病。近年来研究发现，脑缺血再灌注损伤与NO、氧自由基等有关。脑内NO的作用是双重性的，其既有脑保护作用，又有神经毒性作用6