冰七片对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

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1、冰七片对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用研宄【摘要】目的：研究冰七片对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用，并初步探讨其作用机制。方法：Wistar雄性大鼠随机分为4组，即假手术组、脑缺血再灌注模型组(模型组)、尼莫地平对照组、冰七片治疗组。冰七片连续灌胃7d，末次给药lh后，采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型，缺血2h再灌注24h后对大鼠神经功能进行评分，测定脑梗死体积，检测脑组织SOD和MDA含量。结果：与模型组比较，冰七片能够改善大鼠的神经功能障碍，缩小脑梗死体积，提高脑组织细胞SOD活性水平，降低脑组织细胞MD

2、A含量。结论：冰七片对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用，其初步机制可能与提高脑组织SOD活性水平、降低脑组织MDA含量有关。【关键词】冰七片；局灶性脑缺血再灌注；SOD；MDA中图分类号R743.31文献标识码B文章编号1674-6805(2016)1-0148-02doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2016.1.083缺血性脑血管疾病作为临床常见疾病，具有发病率高、致残率高、致死率高的特点，严重危害中老年人群的健康。在欧美发达国家，它与恶性肿瘤、心脏病并称为人类健康的“三大杀手”。随着我国人口老龄化程度的不

3、断加深，缺血性脑血管疾病发病率呈逐年升高的趋势。据世界卫生组织（WHO）调查，中国每年新增缺血性脑血管疾病患者约200万，其中能存活下来者仅50万，约75%的存活患者遗留运动、失语、认知等功能障碍，其中重度残疾者约占40%，给家庭及社会带来沉重负担［1-2］。冰七片是我国中药保护品种，采用天山名贵药材天山龙盘七（三七）、天山龙脑香（冰片）配伍制成，临床用于治疗气滞血瘀的胸痹、胸痛、胸闷、憋气等冠心病多年。本实验观察冰七片对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用，并初步探讨其作用机制，现报告如下。1材料与方法1.1实验动物清洁级Wista

4、r大鼠64只，雄性，体重（220±30）g，由广西医科大学实验动物中心提供（合格证号：2006005）。1.2药品与试剂冰七片（国药集团新疆制药公司，批号:20131112），尼莫地平片（广东华南药业，批号：20140311），氯化三苯四氮哇（TTC，上海励瑞生物公司），SOD检测试剂盒、MDA检测试剂盒（南京建成工程研宄所）。1.3仪器设备精密电子秤（上海第二仪器厂），酶联免疫检测仪（美国Bio-Rad公司），冷冻多用途离心机（德国Eppendorf）。1.4动物模型制备大鼠随机分成4组：假手术组、脑缺血再灌注模型组（模型组）

5、、冰七片治疗组和尼莫地平对照组，每组16只。冰七片以32mg/（kg?d）、尼莫地平片以16mg/（kg?d）与生理盐水溶解灌胃给药，连续7d。模型组和假手术组灌胃等体积生理盐水。于末次给药后lh,采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型［3］。大鼠清醒后，出现以下体征表明建模成功:左侧Homer氏征；右侧前肢瘫痪。将藏尾提起，大鼠不能充分伸展右前肢，当大鼠右旋时其右前肢拖在腹下，与左前肢交叉成剪刀状。1.5指标检测（1）神经功能学评分：大鼠脑缺血2h再灌注24h后，每组随机取8只，米用Bederson方法，对大藏的神

6、经缺损进行评分，满分为4分，评分越高，表明神经功能障碍越严重。（2）脑梗死体积测定：将神经功能学评分后的大鼠，断头取脑，将大脑作连续2mm冠状切片，共4片，然后将脑片放入2%的TTC磷酸盐缓冲液中，37°0值温孵育30门^，正常脑组织染色呈红色，梗死灶染色呈白色，将白色和红色脑组织进行分离，滤纸吸取表面液体，分别称重，计算脑切片中脑梗死部分质量百分比（以质量百分比反应梗死体积比）。（3）各组剩余大鼠，快速断头取脑。取损伤侧脑组织称重并在冷磷酸盐缓冲液中制成10%脑匀浆，离心，取上清，低温冰箱保存。严格按照试剂盒操作，检测脑组织上

7、清液中SOD、MDA水平。1.6统计学处理采用SPSS19.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用均数土标准差（X土s）表示，比较采用t检验，P超氧化物岐化酶（SOD）是组织内最为重要的抗氧化力量，对氧化作用与抗氧化作用的平衡起着关键作用，SOD通过清除超氧阴离子自由基保护组织细胞免受损害；MDA是机体内一种脂质过氧化产物，通过检测组织MDA含量，可间接反映组织细胞的损伤程度。本次实验结果显示，大鼠在给予冰七片32mg/（kg?d），持续7d后，与模型组比较，冰七片可改善局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠的神经功能障碍，明显缩小梗

8、死体积，说明冰七片对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用；进一步检测脑组织SOD活性水平和MDA含量显示，模型组大鼠脑组织SOD活性明显低于假手术组，MDA含量高于假手术组（P