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时间:2018-09-13
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1、杭白芷多糖体外抗氧化活性的研究作者:王德才高丽君高艳霞【摘要】 目的观察杭白芷多糖体外抗氧化作用。方法羟自由基由Fenton反应体系产生,超氧阴离子自由基由邻苯三酚自氧化法产生,硫代巴比妥酸法测定肝匀浆丙二醛相对含量来反映PAD对脂质过氧化的影响。结果PAD能清除·OH和O2-·,并抑制LPO,达到50%清除率或抑制率所需药物浓度分别为,和mg/ml;维生素C清除·OH和O2-·以及抑制LPO的EC50分别为,和/ml。结论PAD具有体外抗氧化作用,但其活性较维生素C弱。【关键词】杭白芷;多糖;羟自由基;超氧阴离子自由基;脂质过氧化Abstrac
2、t:ObjectiveToinvestigatetheantioxidativeeffectsofpolysaccharidefromRadixAngelicaeDahurica(PAD)invitro.MethodsHydroxylfreeradical(·OH)wasproducedbyFentonreactionandsuperoxideanionfreeradical(O2-·)wasproducedbytheoxidationofpyrogallol.Theinhibitiononlipidperoxidationwasdetermine
3、dbycolorimetryfortestingtherelativecontentofMDAinlivertissue.ResultsPADcouldscavenge·OHandO2-·,andinhibitlipidperoxidationinlivertissue.Theconcentrationofscavengingorinhibiting0%(EC50)·OH,O2-·andlipidperoxidationofPAD,/mlrespectively;EC50ofvitaminCwere,/mlfor·OH,O2-·andlipidpe
4、roxidationrespectively.ConclusionPADhasantioxidativeeffectsinvitro,andtheeffectsarenotsoobviousasthoseofvitaminC.Keywords:RadixAngelicaeDahurica;Polysaccharide;Hydoxylfreeradical;Superoxideanionfreeradical;Lipidperoxidation 杭白芷是常用中药白芷的品种之一,气芳香,味辛苦,具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓之功效。对杭白芷的现代研
5、究多集中在其所含有的香豆素类和挥发油上,具有解热镇痛、抗菌消炎、解痉平喘、降低血压等药理作用[1,2],而对其中含量丰富的多糖却研究甚少。本实验提取分离杭白芷多糖并对其体外抗氧化活性进行了研究。 1器材药材杭白芷购自安徽亳州药材市场,经本院生药学教研室周红英教授鉴定为伞形科植物杭白芷Angelicadahurica(Fisch.exHoffm.)Benth.etHook.f.var.formosana(Boiss.)ShanetYuan.的干燥根,粉碎成粗粉备用。试剂与仪器维生素C,天津市凯通化学试剂有限公司,批号060108;硫酸亚铁,天津市巴斯
6、夫化工有限公司,批号040814;水杨酸,天津市凯通化学试剂有限公司,批号061108;30%过氧化氢溶液,天津市巴斯夫化工有限公司,批号061222;Tris碱,夏斯生物有限公司,批号060517;邻苯三酚,天津市巴斯夫化工有限公司,批号050816;三氯乙酸,天津市永大化学试剂开发中心,批号051024;2-硫代巴比妥酸,国药集团化学试剂有限公司,批号041216。所用试剂均为分析纯。 752型紫外可见分光光度计,上海光谱仪器有限公司;LD-6型离心机,上海安亨科学仪器厂;DK-8D型电热恒温水槽,上海精密实验设备有限公司;DY89-1电动匀
7、浆机,宁波新芝生物科技股份有限公司。动物昆明种小鼠,雄性,体重18~2g。山东省生物制品研究所提供,实验动物质量合格证:鲁动质字XX0011。 2方法与结果.1杭白芷多糖的提取与精制参考文献方法[3]称取杭白芷粗粉150g,加4倍量石油醚回流脱脂2次,h/次;滤渣加4倍量80%乙醇回流提取2次,h/次。经脱脂、醇提后的滤渣在60℃烘干,分别加6倍量、5倍量、4倍量蒸馏水在95℃水浴中浸提3次,h/次,合并滤液,减压浓缩至200ml左右。以每100ml浓缩液加20ml氯仿正丁醇液,剧烈振荡30min,以000r·min-1离心1min,去除下层氯仿及
8、中层变性蛋白,取上部水层再重复去蛋白操作,至无明显中层为止。收集去蛋白后的上部水层,加无水乙醇至溶液含醇量达80%,静置过
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