口腔咽拭子基因组dna快速提取试剂盒操作方法及步骤说明书

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1、杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外◆TRIpureReagent抽提指南◆目录号RP02◆使用手册◆实验室使用，仅用于体外口腔/咽拭子基因组DNA快速提取试剂盒目录号：DN30目录编号包装单位DN300150次v适用范围：适合于从口腔/咽拭子中分离纯化基因组DNA。v试剂盒组成、储存、稳定性：试剂盒

2、组成保存50次裂解液ML室温20ml结合液CB室温20ml抑制物去除液IR室温25ml漂洗液WB室温15ml第一次使用前按说明加指定量乙醇PolyCarrier-20℃200μl洗脱缓冲液EB室温15ml蛋白酶K粉（可选）20mg/ml-20℃20mg吸附柱AC和收集管室温50套本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果储存事项：-5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com1.结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀，可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解，恢复澄清透

3、明后冷却到室温即可使用。2.为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入1毫升灭菌水溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后立即按照每次使用量分装冻存，－20℃保存。3.避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。v产品介绍：本试剂盒采用特制的进口DNA吸附柱和独特的缓冲液系统，特别适合于从口腔/咽拭子中分离纯化基因组DNA。各种来源样品裂解消化处理后DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜（特别配备了PolyCarrier

4、可以从体系中轻松捕获微量核酸），再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除，最后低盐的洗脱缓冲液将纯净的基因组DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的DNA无杂质和PCR抑制剂，可直接适用于PCR分析。典型产量0.5μg-3.5μg/拭子。v产品特点：1.不需要使用有毒的苯酚等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。2.节省时间，简捷，单个样品操作一般可在20分钟内完成。3.配备了PolyCarrier用于充分收集特别微量DNA。4.多次柱漂洗确保高纯度，提取的DNA纯度高，质量稳定可靠，可适用于各种

5、常规操作，包括PCR、酶切、测序、Southern杂交等。v注意事项：1.所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000rpm的传统台式离心机，如Eppendorf5415C或者类似离心机。-5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com1.开始实验前将需要的水浴先预热到特定温度备用。2.结合液CB和抑制物去除液IR中含有刺激性化合物，操作时戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。3.PolyCarrier：PolyCar

6、rier使用方法：如果起始处理量很少（口腔咽拭子上收集到的细胞很少），我们推荐使用PolyCarrier，如果预期有较大量DNA产量，用户可以根据需要选择是否加入PolyCarrier。使用时在每个样品提取所需400μl结合液CB中加入4μlPolyCarrier，将结合液CB与PolyCarrier溶液充分颠倒混匀即可(结合液CB容易起泡沫,请勿使用涡旋振荡混匀)。也可根据样品数量，在总共需要的结合液CB中加入总共需要的PolyCarrier混匀备用。混合液在室温24小时内稳定。v操作步骤：（实验前请先阅读

7、注意事项）提示：第一次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇，充分混匀，加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇，以免多次加入!取样：取一根医用消毒棉签（手不要碰触脱脂棉部位），伸进口腔，紧靠脸颊内侧来回刮拭20次（不时旋转棉棒），需充分接触口腔粘膜。注意事项：避免用手触及棉签，采集前可先用清水轻轻漱口。为防止样本被食物或者饮料污染，取样前30分钟内应该避免进食或者饮水。1.用剪刀将棉签部分从其杆上剪下，放入2ml离心管中，加入400μl裂解液ML。2.再加入20μl的蛋白酶K(20mg/ml)溶液

8、，立刻涡旋振荡充分混匀，3.可选步骤（一般不需要做）：56℃放置1小时，期间每10分钟涡旋混匀10秒。一般情况下该步骤可以省略，除非效果不好，再尝试加做此步骤。4.加入400μl结合液CB，立刻涡旋振荡充分混匀，70℃放置10分钟。-5-杭州昊鑫生物科技股份有限公司htpp://www.hzhxbio.com此时溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的液滴，然后挤压去除拭子，将尽可能多的裂解液转移至新