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时间:2018-08-26
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1、胚胎工程学习目标3.2体外受精和早期胚胎培养1.哺乳动物体外受精技术卵母细胞的采集和培养,精子的采集和获能,受精2.哺乳动物胚胎的早期培养方法第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生,她的名字叫路易丝.布朗。路易丝.布朗的母亲梅.布朗因输卵管阻塞而不能生育。首例试管婴儿医生从梅.布朗(时年31岁)体内提取卵子,再取她丈夫(时年38岁)的精液,经处理在体外使卵子受精,受精卵分裂形成16细胞胚后重新植入梅.布朗的子宫内。9个多月后就生下了路易丝.布朗。世界上第一位试管婴儿,如今自己也已经当上了妈妈。图为她抱着自己的两个双胞胎孩子。和她的妈妈一样,这对双胞胎也是试管婴儿。1
2、988年3月10日我国首例试管婴儿诞生著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿1992年我国首例三胞胎试管婴儿根据资料回答下列问题:1.试管婴儿是在试管里发育长大的吗?2.试管婴儿用到了什么生物技术?3.试管婴儿和母亲正常怀孕的过程有何异同?不是包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术相同之处:都通过有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处:体外受精,并在体外发育成早期胚胎,然后胚胎移植。通过使卵子和精子在下成熟和受精,并通过培养发育成后,再经移植产生后代的技术。体外条件人工操作早期胚胎概念:---试管动物技术有性生殖核移植技术、胚胎移植遵循不遵循比较试管动物和克隆动物来自2个个
3、体无性生殖主要来自核供体体外受精早期胚胎培养胚胎移植试管动物技术在生物学上所依据的原理是:有性生殖存在困难:1.引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元。2.牛的生育率低,一头牛一胎只一个,一生只能生育四五次。(牛的妊娠期约280天)讨论1:是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖?为什么?牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。公牛产生的精子数目就更多了(精子数:50亿/mL)理论基础:讨论2:如何让引进的良种牛快速大量的繁殖?试管牛的三个基本操作环节:第一步:体外受精第二步:早期胚胎培养第三步:胚胎移植精子卵子受精卵早期胚胎本地牛
4、(黄牛)①②③新个体借腹怀胎1982年世界首例试管牛犊问世实现良种牛快速大量繁殖首先要做的是和的培养。体外受精早期胚胎主要包括、和等几个主要步骤。概念:采取雌性动物的和雄性动物的,使其在中受精。一、体外受精卵细胞精子试管卵母细胞的采集精子的获取受精(一)卵母细胞的采集和培养对不同动物,采集卵母细胞的方法不同。1.小型实验动物如小鼠、兔,以及家畜猪、羊等卵细胞的采集:最常用的方法是卵巢经过处理,具体做法是给供体注射,使一头母畜一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子,之后从中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。超数排卵促性腺激素输卵管思考:促性腺激素能口服吗?促性腺激素是糖蛋白激素,不可以
5、口服2.大家畜或大型动物,如牛,采集法:(1)从屠宰场已屠宰母畜的中采集卵母细胞;卵巢从屠宰场得到的牛卵巢中采集卵母细胞思考:从屠宰后的母畜卵巢中采集卵母细胞成功的关键是?从屠宰场得到的牛卵巢中采集卵母细胞从屠宰后的母畜卵巢中采集卵母细胞成功的关键是:注意卵巢的保湿和防止细菌污染。2.大家畜或大型动物,如牛,采集法:(1)从屠宰场已屠宰母畜的中采集卵母细胞;(2)可以借助、或、等工具确定卵泡位置,直接从活体动物的中吸取卵母细胞,在体外进行人工培养,使其成熟后,才能与获能的精子受精。卵巢超声波探测仪内窥镜腹腔镜卵巢活体采卵:发挥优良母畜的繁殖潜力超声波探测仪(B超活采仪)活体采集的牛卵母细胞
6、卵母细胞的成熟培养:CO2培养箱(小型)用促性腺激素处理,使其超数排卵,然后,从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。小结:卵母细胞的采集和培养思考:对于小型动物,从输卵管冲取的卵子能否直接与获能的精子在体外受精?对于大型动物,从卵巢中采集的卵母细胞能否直接与获能的精子在体外受精?为什么?能(卵子已成熟)不能不成熟,需在体外进行人工培养,至减数第二次分裂中期使其成熟(二)精子的采集和获能1.收集精子的方法有:假阴道法手握法电刺激法满足压力、温度、润滑度的要求,配有活台畜或假台畜收集精子的几种方法适用范围比较假阴道法:手握法:电刺激法:适用于大家畜和大型动物(牛)适用于体型较小、易于
7、控制的家畜(猪、犬等)适用于野生或经济动物在体外受精前,要对精子进行获能处理。(1)培养法2.精子的获能处理例1:对于啮齿动物、家兔和猪等动物的精子。(2)化学诱导法精子放入人工配制的获能液中培养例2:对于牛、羊等家畜的精子。精子放入一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中,用化学药物诱导1)收集的方法:2)获能处理:假阴道法手握法电刺激等培养法:(人工配制的获能液中培养)啮齿动物、家兔和猪化学诱导法:(一定浓度的肝
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