2018届-体外受精和早期胚胎培养ppt课件

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1、体外受精和早期胚胎培养第二节体外受精和早期胚胎培养1988年3月10日我国首例试管婴儿“神州试管婴儿之母”张丽珠教授和我国大陆首例试管婴儿郑萌珠试管婴儿1978年7月26日,世界首例试管婴儿“路易斯.布朗”在英国诞生,现已成为母亲。根据资料回答下列问题:1.资料上用到了什么生物技术?试管婴儿技术(包括体外受精、胚胎体外培养)和胚胎移植技术。2.试管婴儿和母亲正常怀孕,生产的过程有何异同?相同之处:都通过有性生殖产生,在母体子宫内发育形成胎儿。不同之处:受精作用在体外,并在体外发育成早期胚胎进行胚胎移植。存在困难:1、引进一头良种成年奶牛需要3万-5万元。2、牛的生育率低,

2、一头牛一胎只一个,一生只能生育四五次。(牛的妊娠期约280天)讨论1:是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖?为什么?牛的生育率虽然很低,但是牛的卵母细胞却相当的多,其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。公牛产生的精子数目就更多了(精子数:50亿/mL)理论基础:讨论2:如何让引进的良种牛快速大量的繁殖?试管动物技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育成早期胚胎后,再经移植产生后代的技术。快速繁殖动物优良品种目的:技术手段:体外受精和早期胚胎培养试管动物技术的三个基本操作环节:第一步:体外受精第二步:胚胎的早期培养第三步:胚胎

3、移植精子卵子受精卵早期胚胎幼体①②③新个体哺乳动物个体发育过程试管动物a.如何使雌性动物排出更多的卵子?b.对实验动物小鼠、兔和小家畜猪、羊如何采集卵子?c.对于大家畜或大型动物如何采集卵子?d.采集的卵子是否马上可以受精?阅读P69、70思考以下问题:1.卵母细胞的采集和培养思考:子代数目的多少取决于精子数还是卵子数?方法1:给供体注射促性腺激素,使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几倍到十几倍的卵子(超数排卵),之后从输卵管中冲取卵子,直接与获能的精子在体外受精。方法2-1:从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜等的引导,从活母畜卵巢

4、采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫,同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置,利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。方法2-2:从活体卵巢中采集卵母细胞阅读P70、71思考以下问题:a.精子的采集有哪些方法?b.体外受精需要哪些前处理?2、精子细胞的采集和获能2、精子细胞的采集和获能(1)采集方法:假阴道法手握法电刺激法a.精子的采集有哪些方法?大家畜或大型动物猪、犬等体型较小,易于控制的动物野生或经济动物此外,啮齿类实验动物可在处死后从附睾尾收集精液。2、精子细胞的采集和获能(2)体外精子获能的方法:培养法:化学诱导法:如

5、:啮齿动物、家兔和猪等如:牛、羊等放入人工配制的获能液中放在一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中b.体外受精需要哪些前处理?3.受精在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程离心的目的是什么?卵母细胞的培养的目的是什么?CO2培养箱三、胚胎的早期培养复习:动物细胞培养的条件是什么?糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清等动物细胞培养液成分?精子和卵子在体外受精后,应将受精卵移入发育培养液中继续培养,以检查受精状况和受精卵的发育能力。培养液成分:有机盐、无机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎的早期培养动物胚胎培养液成分与动物细胞培养液成分比较项目

6、动物胚胎培养液动物细胞培养液盐类营养物质调节物质特有物质无机盐和有机盐氨基酸、核苷酸维生素、激素血清无机盐、微量元素促生长因子糖、氨基酸血清、血浆胚胎的早期培养培养发育到适宜阶段时,可将其取出向受体移植或冷动保存胚胎的早期培养不同动物胚胎移植时间不同牛、羊:小鼠、家兔:试管婴儿:桑椹胚或囊胚阶段可在更早的阶段移植8~16个细胞阶段注:胚胎发育的主要场所是母体保存剩余的卵子和精子的方法是什么?为充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母细胞,不妨将屠宰场和“胚胎工厂”合建。这样屠宰场的产品就不仅是鲜肉,还会生产出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料,你看这个想法可行吗?奇思妙想采集良种母牛的

7、卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精良种牛体外受精胚胎胚胎移植受体牛良种犊牛成熟期牛屠宰加工厂市场采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产的技术流程图思考:试管牛的产生属于克隆吗?早期胚胎胚胎移植C代孕母体D新个体(与B遗传物质相同)克隆动物的培育过程A雌性动物卵子去核细胞质取核B动物体细胞核移植显微注射重组细胞有性生殖无性生殖核移植技术、胚胎移植遵循不遵循体外受精胚胎移植试管动物克隆动物发育起点生殖方式技术手段遗传物质遗传规律比较试管动物和克隆动物来自2个个体主要来自核供体受精卵重组细胞1、关于牛体

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