体外受精和早期胚胎培养课件.

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1、3.2体外受精和早期胚胎培养教学目标简述哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。简述哺乳动物胚胎的早期培养方法。认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。教学重点（1）体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义。（2）哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤。教学难点（1）卵母细胞的采集和培养。（2）精子的采集和获能。存在困难：1、引进一头良种成年奶牛需要3万－5万元。2、牛的生育率低，一头牛一胎只一个，一生只能生育四五次。（牛的妊娠期约280天）讨论1：是否有可能让引进的良种牛快速大量的繁殖？为什么？牛的生育率虽然很低，但是牛的卵母细胞却相当的多，

2、其卵巢中卵母细胞数目要比一生中排卵数多1000倍左右。公牛产生的精子数目就更多了（精子数:50亿/mL)理论基础：讨论2：如何让引进的良种牛快速大量的繁殖？试管动物技术：通过使卵子和精子在下成熟和受精，并通过培养发育成后，再经产生后代的技术。体外条件人工操作早期胚胎移植试管动物技术的三个基本操作环节：第一步：体外受精第二步：胚胎的早期培养第三步：胚胎移植精子卵子受精卵早期胚胎幼体①②③新个体哺乳动物个体发育过程试管动物思考：子代数目的多少取决于精子数还是卵子数？方法1：给供体注射促性腺激素，使一头母畜的卵巢一次排出比自然情况下多几

3、倍到十几倍的卵子（超数排卵），之后从输卵管中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。方法2：从屠宰场得到的废弃牛卵巢中采集卵母细胞借助超声波探测仪和内窥镜的引导，从活母畜卵巢采集卵母细胞。操作员先将带有超声波探头和吸卵针的采卵器通过生殖道插入子宫，同时将探头贴在卵巢上。根据B超屏幕所显示的卵泡位置，利用采卵针穿刺卵泡并同时抽吸卵母细胞。方法2：从活体卵巢中采集卵母细胞活体采集的牛卵母细胞比较两种方法采集的卵母细胞在体外受精前的处理有所不同，为什么？（1）收集的方法:假阴道法、手握法、电刺激法（2）获能处理:培养法：(人工配制的获能液

4、中培养）用于啮齿动物、家兔和猪化学法：（一定浓度的肝素或钙离子载体A23187溶液中，化学药物诱导）用于牛、羊等大型哺乳动物2、精子的采集和获能在获能溶液或专用的受精溶液中完成受精过程3、体外受精CO2培养箱二、胚胎的早期培养复习：动物细胞培养的条件是什么？二、胚胎的早期培养发育培养液成分:水、无机盐、有机盐、维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及动物血清等.牛、羊：桑椹胚或囊胚小鼠、家兔：卵裂期或囊胚试管婴儿：8个或16个细胞阶段胚胎培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植。注意：不同动物胚胎移植的时间不同胚胎冷冻保存就是将动物的早

5、期胚胎,采用特殊的保护剂和降温措施进行冷冻,使其在-196℃的液氮中代谢停止或减弱到足够小的程度,但又不失去升温后恢复代谢的能力,从而能长期保存胚胎的一种生物技术。采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的体外培养采集良种公牛精子精子体外获能体外受精早期胚胎培养胚胎移植受体牛（子宫内孕育）良种犊牛成熟期牛采集卵巢中的卵母细胞“试管牛”工厂化生产流程图屠宰加工厂市场试管动物克隆动物生殖方式技术手段后代遗传物质的来源有性生殖无性生殖体外受精早期胚胎培养胚胎移植体细胞核移植技术胚胎移植双亲几乎全部来自供核亲本回答下列问题1）进行小鼠胚胎工程时，首

6、先在光控周期下饲养成年雌鼠，并注射促性腺激素，目的是。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是。再在37℃，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天可以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这时胚胎已经进入_____期。促进超数排卵使精子获能囊胚2）如果体外受精后，在精原核与卵原核融合之前，用微型吸管除雄原核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法

7、在动物新品种选育中的显著优点是。3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源有。容易获得纯合子并缩短育种时间小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因第一个试管婴儿于1978年7月25日在英国的奥尔德姆市医院诞生，她的名字叫路易丝.布朗。路易丝.布朗的母亲梅.布朗因输卵管阻塞而不能生育。首例试管婴儿医生从梅.布朗（时年31岁）体内提取卵子，再取她丈夫（时年38岁）的精液，经处理在体外使卵子受精，受精卵分裂形成16细胞胚后重新植入梅.布朗的子宫内。9个多月后就生下了路易丝

8、.布朗。世界上第一位试管婴儿，如今自己也已经当上了妈妈。图为她抱着自己的两个双胞胎孩子。和她的妈妈一样，这对双胞胎也是试管婴儿。1988年3月10日我国首例试管婴儿诞生著名妇产科专家张丽珠教授与中国首例试管婴儿1、控制性超排卵2、监测卵泡3、取卵4