旋光法检测蜂蜜中糖类掺假

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1、旋光法检测蜂蜜中糖类掺假葛昱君傅璟一、实验背景蜂蜜是由蜜蜂采集植物的花蜜或分泌物，经充分酿造而成的一种营养价值较高的天然滋补品。它含糖类、蛋白质、色素、有机酸、维生素及微量元素等成分，具有一定的保健作用。但目前国内外市场上常出现掺杂、掺假的蜂蜜，最常见的是掺入蔗糖或淀粉类。传统的测定糖的方法很多，测定总糖含量的方法有硫酸－酚法，蒽酮比色法等，测定还原糖含量的有斐林氏法或铁氰化钾法等。同时测定葡萄糖、果糖和蔗糖等主要成分则需要繁多的步骤，且操作复杂。由于不同种类的蜂蜜都有相对稳定的旋光度，一般为左旋，当掺入不同糖类后，蜂蜜的旋亮度会

2、发生变化，由此可判断蜂蜜中是否掺有糖类。一般掺入蔗糖的蜂蜜，随着掺糖量的增加，其旋光度向右旋变化，掺入果糖或转化糖后，其变化趋势相反。因此通过测定其旋亮度，可判定蜂蜜的真伪及掺假的浓度。为此，本试验采用旋光法测量蔗糖含量判断对蜂蜜品质进行初步的测定。二、实验原理由于纯正蜂蜜含有65%—80%的还原糖，主要是果糖（[α]D20=-91.9°）和葡萄糖（[α]D20=52.5°）和不超过5%的蔗糖（[α]D20=66.65°）。因此，非水解旋亮度α1应为负值。当α1为正值（>0）时，可怀疑蜂蜜掺入葡萄糖（>5%）或蔗糖（>5%）或淀粉

3、类物质。进一步鉴别是碘—碘化钾试液检验阳性，为掺入淀粉类物质；α1为正值，旋亮度差值（R=α1-α2）较小，则可能掺有葡萄糖或者其他右旋物质；R值可计算蜂蜜中蔗糖的含量。考虑到天气情況，选择25℃为测试温度，通过标准曲线法测定蔗糖含量。C12H22O11+H2O→C6H12O6+C6H12O6蔗糖葡萄糖果糖[α]D20=66.65°[α]D20=52.5°[α]D20=-91.9°三、实验仪器与试剂仪器：旋光仪、电子天平、恒温装置、温度计、烧杯、磨口锥形瓶、玻璃棒，移液管；试剂：市售蜂蜜若干种，浓盐酸均为分析纯，蔗糖，去离子水；四

4、、实验步骤1、溶液配制：2mol/LHCl溶液：取质量分数37%的浓盐酸，它的物质的量浓度大约为12mol/L，根据溶液公式，取5ml浓盐酸加至25ml去离子水中，即得2mol/LHCl溶液。2、样品前处理：称取蜂蜜样8.000g，用去离子水少量多次移入并定容至100mL容量瓶中,并利用超声波清洗机超声确保溶液溶解均匀。3、旋光度测定：取上述100mL容量瓶中的溶液用移液管移取20ml至两支50mL容量瓶中，一支用去离子水定容直接测定其旋光度α1，另一支加入5.0mL2mol/LHCl溶液后定容，置于60℃恒温水浴条件下水解15分

5、钟，取出冷却至室温后，测定其旋光度α2。4、标准曲线制作：称取蔗糖2.000g，定容100ml(0.0200g/ml)。用50ml容量瓶配制含蔗糖溶液：1.0,2.0,5.0,10.0,15.0,20.0,30.0ml蔗糖标准溶液两组。非水解组直接定容即可；水解组加入5.0mL2mol/LHCl溶液，用去离子水定容后，置于60℃恒温水浴条件下水解15分钟，取出冷却到25℃分别测定非水解组和水解组的旋光度α1、α2。以浓度对应的旋光度差值为纵坐标,蔗糖标准浓度为横坐标,绘制如图l蔗糖标准曲线。(曲线范围根据实际测量情况调整)五、测试

6、结果与数据处理浓度g/ml0.00040.00080.0020.0040.0060.0080.012α10.0530.1050.2700.5350.7851.0701.6000.0530.110.2650.5250.7951.0651.595α2-0.006-0.015-0.045-0.105-0.170-0.225-0.320-0.008-0.02-0.050-0.105-0.170-0.225-0.320α1-α20.060.1250.3150.6350.9601.29251.9175表一、蔗糖的旋光度数据(25℃)图l蔗糖标

7、准曲线从图1可见,旋光度差值与蔗糖含量呈良好的线性关系，y=160.644x-0.00406；Adj.R-Squar=0.99992。序号蜂蜜样品α1α2α1-α21土蜂蜜5.9405.9305.6205.6200.3152洋槐蜂蜜(任家)-1.550-1.550-1.600-1.6000.0503洋槐蜂蜜(秦岭)-1.515-1.515-1.705-1.6950.1854百花蜂蜜(凤凰山)-2.950-2.950-3.100-3.1050.153表l不同蜂蜜蔗糖含量测定结果序号蜂蜜样品蔗糖浓度(mg/ml)蔗糖质量(mg)实验取

8、样(mg)蔗糖的百分含量1土蜂蜜1.986*10-30.49658.06106.159%2洋槐蜂蜜(任家)3.365*10-40.08418.09981.038%3洋槐蜂蜜(秦岭)1.177*10-30.29438.29323.548%4百花蜂蜜(