实验三蜂蜜中掺假的检验.doc

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1、实验四、食物中不溶性膳食纤维的测定方法　　　　本方法适用于各类植物性食物和含有植物性食物的混合食物中不溶性膳食纤维的测定。其最小检出限为0.1mg。一、实验目的掌握不溶性膳食纤维的测定方法和原理二、实验原理　　在中性洗涤剂的消化作用下，样品中的糖、淀粉、蛋白质、果胶等物质被溶解除去，不能消化的残渣为不溶性膳食纤维，主要包括纤维素、半纤维素、木质素、角质和二氧化硅等，并包括不溶性灰分。三、试剂和材料　　1.无水亚硫酸钠。　　2.石油醚：沸程30～60℃。　　3.丙酮。　　4.甲苯。　　5.中性洗涤剂溶液：将18.61gEDTA二钠盐和

2、6.81g四硼酸钠(含10H2O)置于烧杯中，加水约150mL，加热使之溶解，将30g月桂基硫酸钠(化学纯)和10mL乙二醇独乙醚(化学纯)溶于约700mL热水中，合并上述二种溶液，再将4.56g无水磷酸氢二钠溶于150mL热水中，再并入上述溶液中，用磷酸调节上述混合液至pH6.9～7.1，最后加水至1000mL。（配制2000ml）　　6.磷酸盐缓冲液：由38.7mL0.1mol/L磷酸氢二钠和61.3mL0.1mol/L磷酸二氢钠混合而成，pH为7。（配制2000ml）　　7.2.5%α－淀粉酶溶液：称取2.5gα－淀粉酶(美国

3、Sigma公司，VI－A型，产品号6880)溶于100mL，pH7的磷酸盐缓冲溶液中，离心，过滤，滤过的酶液备用。　　8.耐热玻璃棉(耐热130℃，美国Corning玻璃厂出品，PYREX牌。其他牌号也可，只需耐热并不易折断的玻璃棉)。四、仪器和设备　1.实验室常用设备。　　2.烘箱：110～130℃。　　3.恒温箱：37±2℃。　　4.纤维测定仪。　　5.如没有纤维测定仪，可由下列部件组成：　（1）电热板：带控温装置。　（2）高型无嘴烧杯：600mL。　（3）坩埚式耐酸玻璃滤器：容量60mL，孔径40～60μm。　（4）回流冷凝装

4、置。　（5）抽滤装置：由抽滤瓶、抽滤垫及水泵组成。五、实验操作　1.样品的采集和处理　（1）.粮食：样品用水洗3次，置60℃烘箱中烘干，磨粉，过20～30目筛(1mm)，储于塑料瓶内，放一小包樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。　（2）.蔬菜及其他植物性食物：取其可食部，用水冲洗3次后，用纱布吸去水滴，切碎，取混合均匀的样品于60℃烘干，称重，磨粉；过20～30目筛，备用。2.测定步骤　　（1）.取样1.00g，置高型无嘴烧杯中，如样品脂肪含量超过10%，需先去除脂肪，即样品1.00g，用石油醚(30～60℃)提取3次，每次10mL。　　（

5、2）.加100mL中性洗涤剂溶液，再加0.5g无水亚硫酸钠。　　（3）.电炉加热，5～10min内使其煮沸，移至电热板上，保持微沸1h。　　（4）.于耐酸玻璃滤器中，铺1～3g玻璃棉，移至烘箱内，110℃4h，取出置干燥器中，冷至室温，称量，得m1(准确至小数点后4位)。　　（5）.将煮沸后样品趁热倒入滤器，用水泵抽滤。用500mL热水(90～100℃)，分数次洗烧杯及滤器，抽滤至干。洗净滤器下部的液体和泡沫，塞上橡皮塞。　　（6）.于滤器中加酶液，液面需覆盖纤维，用细针挤压掉其中汽泡，加数滴甲苯，上盖表玻皿，37℃恒温箱中过夜。　

6、　（7）.取出滤器，除去底部塞子，抽去酶液，并用300mL热水分数次洗去残留酶液，用碘液检查是否有淀粉残留，如有残留，继续加酶水解，如淀粉已除尽，抽干，再以丙酮洗2次。　　（8）.将滤器置烘箱中，110℃4h，取出，置干燥器中，冷至室温，称量，得m2(准确至小数点后4位)。3.计算m2-m1　　　X=×100　　　　m　　　　式中：X——样品中不溶性膳食纤维的含量，%；　　m1——滤器加玻璃棉的质量，g；　　m2——滤器加玻璃棉及样品中纤维的质量，g；　　m——样品质量，g。　4.结果的重复性　　同一实验室平行测定或重复测定结果相对

7、偏差绝对值≤5%。　　六、结果与分析考题食物中不溶性膳食纤维的作用？实验三蜂蜜中掺蔗糖的检验在食品的各类掺假活动中，蜂蜜及其产品的掺假是较为严重的现象之一。蜂蜜中常见的掺假物有饴糖、蔗糖、转化糖、糊精、食盐等。人为将蔗糖熬成浆状掺入蜂蜜中出售是常见的掺假现象，其特点是色泽鲜艳明亮，多为浅黄色，味淡，回味短，有一种糖浆味。蒽酮比色法1、实验步骤：（1）于烧杯中取蜜样1g，加水50mL、混匀。于100mL容量瓶中吸取此稀释蜜样5mL，加水3mL，再加4mL浓度为2mol/L的KOH溶液，混匀后于沸水中加热5min，冷却后用水定容。于试管

8、中取此稀释液1mL，加水1mL、蒽酮试剂6mL、混匀，置沸水浴中3.5min后，迅速冷却。用1cm比色皿于635nm下测吸光度，用正常蜂蜜做对照试验（参比液）。（2）标准曲线制备取蔗糖标准使用液（100mg/mL）0.0,0.2mL，