尿蛋白检测的临床应用

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时间:2018-08-02

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1、尿蛋白检测的临床应用【关键词】尿蛋白【关键词】白蛋白;免疫球蛋白;β2-微球蛋白;尿液检验尿液蛋白质检测是肾脏疾病诊断和治疗的重要指标之一。正常情况下,健康成人尿中排出蛋白质总量为(0.08±0.024)g/24 h,可含有少量来自肾小球的血浆蛋白,如白蛋白、免疫球蛋白、β2-微球蛋白和肾小管细胞分泌的蛋白质,如Tamm-Horsfall蛋白及其他肾脏衍生蛋白等,常规方法检测为阴性,在某些生理情况下可出现暂时性升高。当肾脏出现肾小球、肾小管疾病时,尿蛋白常呈现异常增高[1]。故通过尿蛋白的有无、蛋白含量的多少以及蛋白组分的分类检测,对肾脏疾病的诊断、鉴别诊断以及疾病的严重程度、治疗效果评

2、价与预后判断具有重要意义。1尿蛋白定性检测尿蛋白定性的方法较多,目前临床上常用的主要有磺基水杨酸法、加热醋酸法和干化学试纸带法[2]。1.1磺基水杨酸法又称磺硫酸法原理为生物碱试剂在酸性条件下,酸根阴离子与蛋白质结合成不溶性的蛋白盐。本法操作简便,灵敏度较高,为0.05~0.1 g/L,尿中的白蛋白、球蛋白、糖蛋白、本周蛋白均可呈阳性。缺点是多种因素可致反应呈现假阳性。51.2加热醋酸法原理在酸性条件下(pH=5左右)加热煮沸使蛋白质变性沉淀。本方法干扰因素少,结果可靠,为目前尿蛋白定性检测最可信的方法。缺点是灵敏度稍低,为0.15 g/L以上,操作较繁琐,不易标准化。1.3干化学试纸带

3、法随着尿液自动分析仪的广泛应用,尿蛋白干化学试纸带法目前临床上应用最为普遍的检测方法。其原理是根据试带膜块中指示剂溴酚兰的羟基与尿液蛋白质氨基酸的氨基置换,使指示剂由黄色变为黄绿色及蓝绿色,颜色变化的程度与蛋白质(主要为白蛋白)含量成比例。本方法简便、快速且适宜大批量标本检测,缺点是灵敏度较低,为0.15~0.25 g/L,对尿液中的球蛋白、粘蛋白和本周蛋白等不敏感,且易受尿液pH、盐类物质、药物及细胞含量等因素影响而呈现假阳性或假阴性。2尿蛋白定量检测目前常用的尿蛋白定量检测方法主要有双缩脲比色法、比浊法和染料结合法三大类。24 h尿蛋白定量是目前实验室最常用的蛋白定量方法,本方法不受

4、尿比重的影响,但留取尿液量是否准确影响蛋白量计算结果。24 h尿蛋白定量对区分正常与轻度异常的蛋白尿灵敏度较差,当患者尿中含多量蛋白时结果较可靠。24 h尿蛋白大于3.5 g是肾病综合征诊断的主要标准之一。3尿蛋白电泳检测蛋白电泳的主要目的是根据蛋白质分子量大小区分尿蛋白组成成分,以鉴别蛋白质的来源是生理性的还是病理性的。尿蛋白质盘状电泳是目前常用方法。对一些特殊蛋白,如本周蛋白,常采用乙酸纤维素膜蛋白电泳、免疫固定电泳等方法。尿蛋白电泳对肾小球或肾小管损伤的部位及病变程度判断具有重要意义。54尿微量蛋白检测尿微量蛋白是尿中某些蛋白质的排泄呈亚临床升高,常规定性或定量方法难以检测的一种病

5、理现象。当尿中出现微量蛋白,可反映肾脏结构与功能的轻度或早期受损[3]。临床上尿微量蛋白检测对糖尿病和高血压引起的早期肾功能改变具有重要的诊断价值。常用测定方法包括速率散射比浊、放射免疫、免疫电泳、固相荧光免疫及酶联免疫吸附试验等。4.1白蛋白(Alb)Alb是可通过肾小球滤过膜的最小的一种蛋白质,在肾小管中几乎完全被重吸收。由于肾小球滤过膜的电荷选择屏障作用,正常情况下尿中含量极微,当肾小球滤过屏障受损,Alb的滤出量大于肾小管重吸收时,尿中Alb明显升高。因此,Alb可作为临床上肾小球滤过膜受损的重要标志。4.2β2-微球蛋白(β2-M)β2-M为细胞膜上(红细胞、滋养层细胞外)组织

6、相容抗原(HLA)的一部分。易通过肾小球滤过膜,但几乎全部由近曲小管重呼吸。当肾小管病变时,尿液β2-M升高明显。临床上,β2-M的检测,对急、慢性肾小球肾炎,活动性肾盂肾炎,肾脏药物及重金属性损害,肾移植排斥等极具诊断价值。4.3α1-微球蛋白(α1-M)α1-M较易通过肾小球滤过膜,但绝大部分被近端小管重吸收和分解。当近端肾小管上皮细胞受损时,α1-M重呼收障碍,尿中含量明显升高。临床上,α1-M是较早反映近端肾小管损伤的标志蛋白。54.4转铁蛋白(TF)TF易通过肾小球基底膜,当肾小球滤过膜的电荷或机械屏障受损时,均会导致尿中TF升高。TF是一种比Alb更早、更敏感反映肾小球滤过膜

7、损伤的标志性蛋白。4.5视黄醇结合蛋白(RBP)RBP易通过肾小球滤过膜,在近曲小管被重吸收和分解。当肾小管受损时,尿中含量明显升高。RBP比β2-M反映肾近曲小管的损伤更为敏感。4.6TH糖蛋白(THP)THP由肾小管髓袢升支粗段及远曲小管细胞合成和分泌。正常尿中含量稳定。当肾小管受损时,尿THP含量可发生显著变化。各种慢性肾病如:慢性肾小球肾炎、狼疮性肾炎、糖尿病肾病、多囊肾及慢性肾功能衰竭时,尿液THP含量明显下降;而在肾病综

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