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时间:2018-08-02
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1、塞曼石墨炉原子吸收法直接测定微量血清中铝作者:梁峰,徐群清,陆贤杰,梁丽艳【摘要】目的研究测定人体血清中微量铝含量的新方法。方法血样经HNO3浸出离心去蛋白处理,采用塞曼石墨炉原子吸收光谱法测定铝元素含量。结果方法的检测限为0~1μg/L;线性范围为0~5μg/L,相对标准偏差(RSD)为2.54%,回收率为96.5%~103%。结论方法可靠,操作简便快速,适用于临床医学检验中的诊断分析。【关键词】原子吸收;血清;铝 【Abstract】ObjectiveTostudyanewmethodforthedetermi
2、nationofmicro-aluminuminthehumanserumsample.MethodsThebloodsamplesweretreatedwithHNO3andthebloodalluminwasremovedcentrifugally.ThecontentofaluminumwasdeterminedbyZeemanGraphiteFurnaceAtomicAbsorptionSpectrometry(GFAAS).ResultsThedetectionlimitofthismethodwas0~1
3、μg/L,thelinearrangewas0~5μg/L,relatvestandarddeviation(RSD)was2.54%,andtherecoveryratewas96.5%~103%.ConclusionThismethodiscredible,simpleandfast,andsuitableforthediagnosisandanalysisofclinicalmedical5examination. 【Keywords】GFAAS;serum;aluminum 近年来国内有关铝与人类疾病的研
4、究结果表明,铝与肾病、高血压、糖尿病、早老性痴呆、肿瘤等疾病的发生、发展有密切的关系。因此,准确、快速地检测生物样品中微量铝,提高临床诊断水平仍然是实验室技术探讨的热门课题。为此,笔者于2008年在开展相关的课题项目研究过程中,参考国内有关文献[1~5]用原子吸收光谱法测定生物样品中金属元素含量的经验,采用塞曼石墨炉原子吸收法,以适当的基本改进剂稀释样品,对正常人体血清铝水平进行了分析测试,取得了较好的结果。 1实验部分 1.1原理注入石墨炉的样品经原子化后,其中待测元素铝的基态原子吸收来自铝空心阴极灯发出的特征
5、谱线,在一定范围内,吸光度与其浓度成正比,可通过标准曲线定量求得铝的含量。 1.2主要仪器及试剂标准溶液试剂为北京国家钢铁研究总院1000μg/ml(GSBG62006-09)。铝标准贮备液1μg/mlAI,0.08mol/L优级纯硝酸镁介质,用时逐级稀释至0.1μg/mlAI。5 1.3仪器工作条件日立-7000型偏振塞曼原子吸收分光光度计,日立石墨炉原子化器,日立A1空心阴极灯,日立自动进样器,日立数据处理机,日立涂层石墨管,法国制Eppendorf20μl微量取样器。波长:309.3nm;灯电流:10mA;
6、狭缝:1.3nm;高纯氩气流量150ml/min,原子化时氩气流量:30ml/min;测量方式:峰高积分吸收;进样方式:自动进样;进样体积:20μl;校正模式:标准曲线;背景校正塞曼效应;计算方式:浓度直读。 石墨炉升温程序:干燥60~100℃,30s;灰化500~500℃,30s;原子化2600~2600℃,5s;清洗2800~2800℃,3s。 1.4实验方法标准曲线的绘制,本实验结果表明铝浓度在≤5μg/L时与吸光度呈线性关系。分别取0.1μg/mlAI标准溶液0.0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5
7、ml于10ml试管中,以0.08mol/L硝酸镁稀释至刻度,混匀后按仪器设定的工作程序测定吸光度,绘制标准曲线。 1.5样品分析血样来自受检者于清晨空腹取肘静脉血2ml,不加抗凝剂,3000r/min离心10min。取0.5ml血清放入洁净的小试管中,加入适量0.08mol/L硝酸镁介质经振摇后以3000r/min离心5min,取上层清液直接进样20μ5l,同时做试剂空白。样品的吸光度经试样空白校正后,在标准曲线上直读浓度,结果乘上稀释倍数即得血清铝的含量。 2结果 2.1回归方程及检出限本实验标准曲线的回归方
8、程式为Y=1.343X+3.646,相关系数r=0.9996,线性范围:0~5μg/L。 2.2精密度试验为了验证本方法的准确性,对经处理后含铝量为5μg/L的正常血清按测定步骤进行重复测定,取同一份血样0.5ml连续重复测定10次,结果见表1。从表1可见,各次测定的变异幅度不大(RSD=2.54%),相对标准偏差小于3%,表明本方法的重现性
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