六月青皂苷对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响

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1、六月青皂苷对四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化的影响作者：陈兆霓，张士军，唐爱存，李勇文，黄仁彬【摘要】目的研究六月青皂苷(LYQS)对四氯化碳(carbontetrachloride，CCl4)所致大鼠肝纤维化的治疗作用，并探讨其作用机制。方法Wistar大鼠随机分成两组，模型组大鼠采用50%CCl4花生油溶液灌胃造模，共7周，空白对照组用生理盐水代替。将病理检查确认肝纤维化形成的Wistar大鼠50只，随机分成5组，分别给予相应药物进行干预，1次/d，连续4周。末次给药24h后处死大鼠，采集血清及肝组

2、织，检测大鼠血清中ALT、AST，肝组织中Hyp、SOD、MDA和GSH-Px的水平。结果各剂量的六月青皂苷及阳性药能显著降低大鼠血清中CCl4所致异常升高的ALT(P<0.01);高、中剂量六月青皂苷及阳性药可降低大鼠血清中CCl4所致异常升高的AST(P<0.01);同时，各剂量的六月青皂苷能显著提高肝组织中异常降低的SOD、GSH-Px水平(P<0.05或P<0.01)，并显著降低异常升高的Hyp、MDA含量(P<0.05或P<0.01)。随着药物浓度的增

3、加，其作用逐渐增强，呈现明显的量效反应关系。结论六月青皂苷对大鼠化学性肝损伤具有一定程度的治疗作用，其机制可能与其清除自由基，抑制脂质过氧化有一定的关系。【关键词】六月青;皂苷;肝纤维化7　六月青是广西民间草药，系爵床科(Acanthaceae)植物肖鸡笼(顶头马兰)Taraphochlamysaffinis(Griff)Bremekhu[Strobilanthesaffinis(griff)Y.C.Tang]的干燥地上部分[1]。《本草拾遗》记载，该药能活血，凉血，疏肝泻湿，消肿止痛，主要用于急

4、慢性肝炎，黄疸等[2]。本课题组经过多年研究发现，以六月青为君药的复方六月青对四氯化碳、对乙酰氨基酚、D-半乳糖胺等所致小鼠急性化学性肝损伤均有明显的保护作用[3];在体外对血清中HBsAg和HBeAg均有明显的抑制作用[4]。此外，研究者在对六月青的初步研究中发现，六月青的石油醚部位和60%乙醇部位对小鼠的免疫功能有明显的增强作用[5]。本实验就该药对CCl4造成大鼠的肝纤维化的影响进行初步研究。　　1材料　　1.1动物健康雄性Wistar大鼠90只，SPF级，体质量150～200g，由广西医科

5、大学实验动物中心提供。实验动物生产许可证：SCXKG桂2003-0003，实验动物使用许可证：SYKG桂2003-0005。常规鼠饲料喂养，自由饮水。　　1.27药物及试剂六月青皂苷(LYQS)：由本实验室自行提取完成;花生油：市售;四氯化碳(分析纯)：成都市科龙化工试剂厂，批号：20070910;秋水仙碱片：西双版纳药业有限责任公司，批号：080706。AST、ALT、Hyp、SOD、MDA、GSH-Px试剂盒：南京建成生物工程研究所产品，批号均为：081230。　　2方法　　2.1动物造模Wi

6、star大鼠随机分成两组：空白对照组及肝纤维化模型组。肝纤维化模型组75只，采用花生油配成体积分数为50%的CCl4溶液，按CCl41ml/kg体质量每周灌胃2次，称质量1次/周，按实际体重调整给药剂量[6]。正常对照组15只，采用生理盐水灌胃，剂量同50%CC14花生油溶液，2次/周。分别于造模后第5周、第6周及第7周抽取肝纤维化模型组大鼠2只及正常对照组大鼠1只，进行病理学检查，监测肝纤维化形成的情况。　　2.2动物分组及用药将病理检查确认形成肝纤维化的Wistar大鼠50只，随机分为5组，加

7、上空白对照组10只，共计6组，分别为：空白对照组，给予生理盐水10ml/kg;模型对照组，给予生理盐水10ml/kg;阳性组，给予秋水仙碱0.2mg/kg;LYQS高、中、低剂量组，分别给予16.67，8.33，4.16g生药/kg。各组动物在同样条件下饲养，均以1次/d，空腹灌胃，连续给药4周。以上各组除空白对照组外，其余各组均继续给予50%CCl4花生油溶液，2次/周。每周称重，并相应调整CCl4造模剂量及用药剂量。7　　2.3样本制备末次给药24h后，戊巴比妥钠麻醉，打开腹腔，腹主动脉取血，

8、分离血清于-20℃保存，用于测定ALT、AST;取肝组织做相应浓度匀浆后于-70℃冰箱保存，用于SOD、MDA、GSH-Px及考马斯亮蓝的测定;另取部分肝组织于-70℃冰箱保存，用于Hyp的测定。　　2.4指标测定血清中ALT，AST和肝组织Hyp，GSH-Px，SOD，MDA的检测，严格按照试剂盒说明书进行操作。　　2.5统计学处理应用SPSS13.0软件进行统计分析。数据均以±s表示，各组间比较采用单因素方差分析，经方差齐性检验，方差齐者组间两两比较采用LSD法，方差不齐者组间