p27在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及与临床生物学行为的关系

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1、p27在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及与临床生物学行为的关系作者：施更生，林海升，朱敏，童永青，王沙彬，杨卫江【摘要】目的:研究涎腺腺样囊性癌(salivaryadenoidcysticcarcinoma,SACC)中p27的表达及其与临床生物学行为的关系。方法：采用免疫组化Envision法对46例SACC组织中p27蛋白表达进行检测，探索p27蛋白的表达与肿瘤组织学分级、临床分期以及转移之间的关系。结果：癌旁正常组织中p27蛋白阳性率达100%，SACC组织中p27蛋白表达较低，阳性率为65.22%，两者之间表达差异有显

2、著性（P<0.01）；p27蛋白表达与肿瘤组织学分级、肿瘤临床分期和肿瘤转移有关（P<0.01）。结论：p27蛋白表达异常可直接影响细胞周期转化，促进SACC的发生；其表达水平可能是预测SACC转移和预后以及指导临床治疗的一项生物学指标。【关键词】涎腺腺样囊性癌；p27蛋白；免疫组化7以往，预测恶性肿瘤的生物学行为和预后主要根据其病理分级和临床分期等指标，它在一定程度上反映了肿瘤的生物学特性。随着分子生物学技术的快速发展和应用，对细胞周期及其调控因子进行研究后发现，肿瘤细胞不同于正常细胞的根本特征是细胞生长失控

3、和分化受阻。目前，已发现p27基因是细胞周期的负性调节因子，与肿瘤的发生有关，我们采用免疫组化方法检测46例涎腺腺样囊性癌(salivaryadenoidcysticcarcinoma,以下简称SACC)中的p27蛋白的表达，探讨SACC的临床生物学行为与p27表达的关系，从而为SACC的有效诊断、治疗和预后提供分子生物学依据。1材料和方法1.1一般资料在1994年2月至2004年12月间本院收治经病理证实SACC患者中，随机选取46例，包括发生在腮腺、颌下腺、舌下腺和各种小涎腺部位SACC。其中男30例，女16例，年龄（

4、56.6±9.1）岁。按1987年UICC标准TNM分期：Ⅱ期12例，Ⅲ期14例，Ⅳ期20例。病理分级：高分化16例，中分化17例，低分化13例。经病理和影像学检查证实未发现转移者30例，淋巴结转移者11例，肺转移者5例。1.2标本从1994－2004年间浙江省台州医院口腔科手术患者标本，置于10%福尔马林溶液中固定，常规石蜡包埋，4μm厚连续切片。1.3免疫组织化学检测方法采用Envision法。所用抗体鼠抗人p27，克隆号为SX53G8，为即用型试剂，购自上海DAKO基因有限公司。操作按试剂盒说明进行，7DAB显色。用

5、公司提供的已知阳性切片作阳性对照，0.01mol/L的PBS代替一抗做空白对照，每例均设HE切片作对照观察。阳性信号为棕褐色或棕黄色颗粒，定位于细胞浆或细胞核，阳性细胞在组织中分布不一。1.4诊断标准随机选择10个高倍视野（×400），每个视野计数100个细胞，共计数1000个细胞，计算阳性细胞百分率。阳性细胞数“<5%”为“-”，“<25%”为“+”，“<50%”为“++”，“≥50%”为“+++”。高表达为阳性细胞比率≥25%；低表达为阳性细胞比率<25%。1.5统计学处理方法单向有序资料采用秩

6、和检验。2结果2.1SACC中p27表达情况在SACC病例中，p27蛋白阳性率为65.22%（30/46），且低表达的占46.67%，高表达占53.34%。癌旁正常组织p27蛋白阳性率为100%（20/20）。两者之间的差异有显著性(P<0.01)。SACC组织中p27蛋白阳性表达，阳性物质均匀分布于整个细胞核，见图1。2.2p27蛋白的表达与组织学分级的关系随着肿瘤分化程度的降低，p27蛋白阳性率呈减低趋势，但两组的差异无显著性(P＞0.05)。在高中分化腺癌细胞中高表达占45.45%，低分化腺癌阳性表达细胞中高表

7、达仅占12.5%，两者之间的差异有显著性(P<0.01)。见表1。72.3p27蛋白的表达与临床分期的关系SACC病例中，Ⅰ、Ⅱ期病例p27蛋白的表达明显高于Ⅲ、Ⅳ期病例，差异有显著性(P<0.01)。见表2。2.4p27蛋白的表达与淋巴结转移的关系46例SACC病例中颈部无淋巴结转移30例,区域和远处转移16例,其p27蛋白的表达分别为25例(占83.33%)和5例(占31.25%),差异有显著性(P<0.01)。见表3。3讨论p27基因是在1994年被发现并克隆出来的一个新的细胞周期依赖性激酶抑制剂(

8、CDKⅠ)[1]，是细胞的负性调节因子，是广谱CDK抑制剂，也具有阻止细胞通过G1/S期转化的“关卡”作用，在细胞周期增殖和肿瘤发生发展中起非常重要的作用。目前认为，p27与肿瘤的关系可能主要表现在蛋白水平上，其表达水平的下降或缺失可能和肿瘤的发生、发展和预后相关[2]。目前大量研究发现，前列腺癌、乳腺