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1、内科学硕士论文：大鼠骨髓EPCs的中电导I_(kca)与容积敏感性氯离子通道【中文摘要】冠心病是世界第一死亡原因,造成了巨大的疾病负担。目前对于冠心病的治疗,并没有解决最根本的问题。细胞心肌成形术是近年发展起来的一项新技术,将从根本上提高冠心病患者生活质量。内皮祖细胞(endothelialprogenitorcells,EPCs)为细胞移植疗法良好的源细胞,近年的研究显示EPCs治疗冠心病是安全,可行,有效的。由于EPCs的基础性生物学问题不清楚,科研人员还没有解决EPCs治疗冠心病遇到的瓶颈:量少、移植EPCs死亡率高、心律失常机制不明、分化可疑性。近些年来,全球各地的科研人员陆
2、续开始研究各种干细胞表面离子通道特性,发现了许多功能性离子通道,它们与干细胞的增殖,细胞周期,分化,电特性以及凋亡关系密切。干细胞表面离子通道的研究,将有助解释细胞移植治疗冠心病致心律失常的真正原因。(1)研究大鼠内皮祖细胞表面存在哪些离子通道;(2)探讨这些离子通道的电生理特性和mRNA表达情况,为进一步研究其生理功能奠定基础方法(1)大鼠骨髓内皮祖细胞的分离、培养与鉴定用密度梯度离心的方法分离骨髓单个核细胞用内皮祖细胞条件培养基培养。贴壁的EPCs用Dil-acLDL和UEAlectin...【英文摘要】Coronaryarterydisease(CAD)continuestob
3、etheleadingcauseofmortalityintheworld.TheeconomiccostofCADintheworldistremendousperyear.Despitegreatadvancesobtainedininterventionalcardiologyandpharmacologicaltreatments,thetherapeuticsthemselvescann’tstimulatethegrowthofnewbloodvesselsinmyocardialinfarction,thusdonothavethepotentialtoreversea
4、ndcurecoronaryarterydiseasethoroughly.Cellularcardiomyoplastydevelopedinrecentyears,isapromisingtechnolog...【关键词】内皮祖细胞钙离子激活钾通道氯离子通道【英文关键词】Ca(2)-activatedKcurrentCl-channelcurrentEPC【目录】大鼠骨髓EPCs的中电导I_(kca)与容积敏感性氯离子通道摘要4-6Abstract6-7引言11-121立题依据12-161.1EPCs治疗冠心病遇到的瓶颈12-131.1.1外周血内皮祖细胞稀缺121.1.2移植E
5、PCs死亡率高121.1.3心律失常机制不明12-131.1.4分化可疑性131.2干细胞表面离子通道特性研究现状13-151.2.1各类干细胞离子通道先后被检出141.2.2离子通道在干细胞增殖、细胞周期中的作用141.2.3离子通道在干细胞凋亡中的作用141.2.4离子通道在细胞分化中的作用14-151.3开展EPCs表面离子通道特性的研究将可能极大地提高EPCs治疗冠心病的疗效和安全性15-162材料与方法16-242.1实验仪器162.2实验材料及试剂16-172.3主要溶液的配制17-182.3.1内皮细胞条件培养培养基172.3.2多聚甲醛172.3.3全细胞膜片钳实验溶
6、液17-182.4骨髓内皮祖细胞的分离、纯化与鉴定18-192.4.1实验动物182.4.2股骨的分离18-192.4.3单个核细胞分离192.4.4内皮祖细胞的鉴定192.5电生理实验方法19-202.5.1玻璃电极的准备192.5.2玻璃微电极的拉制192.5.3pipettesolution的充灌19-202.5.4全细胞膜片钳记录电流202.5.5数据统计及图形制作202.6PCR实验20-242.6.1总RNA的提取20-212.6.2逆转录（reversetranscription，RT）212.6.3聚合酶链反应（PolymeraseChainReaction，PCR）
7、21-222.6.4结果检测22-243结果24-313.1骨髓源性内皮祖细胞的鉴定24-253.2骨髓源性内皮祖细胞细胞膜离子电流的记录25-303.2.1电压依赖性钾通道253.2.2内向整流钾通道253.2.3钙离子激活的钾通道25-263.2.4氯离子通道26-303.2.5内向电流通道303.3功能性离子通道的RNA表达30-314讨论31-355结论与不足35-36参考文献36-41附录A综述41-46参考文献44-46在学研究成果46-47致
