白头翁汤有效成分提取工艺的研究

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1、白头翁汤有效成分提取工艺的研究白头翁汤有效成分提取工艺的研究白头翁汤有效成分提取工艺的研究白头翁汤有效成分提取工艺的研究白头翁汤有效成分提取工艺的研究白头翁汤有效成分提取工艺的研究白头翁汤有效成分提取工艺的研究白头翁汤有效成分提取工艺的研究?60-中国民族民间医药Chinesejouma]ofethnomedicineandethnopharmacy经验交流Experiencecommunicate白头翁汤有效成分提取工艺的研究刘文冯果刘梦莹林昶宋信莉贵阳中医学院,贵州贵阳550001摘要:目的:优选白头翁汤有效成分提取的最佳提取方法和提取工艺.方法:以白头翁汤中的

2、有效成分白头翁皂苷B和盐酸小檗碱的含量为测评指标,采用单因素方差分析法与正交试验设计法优选白头翁汤有效成分的最佳提取方法和提取工艺.结果:最佳提取方法为渗漉法;最佳提取工艺条件为用80%的乙醇,以7ml/min/kg的流速,渗漉8倍量,回收乙醇.结论:优选后的提取工艺所获得的白头翁汤中的有效成分白头翁皂苷B和盐酸小檗碱的含量高,经验证试验表明该提取工艺稳定,可行,能提高白头翁汤的有效成分的含量.关键词:白头翁汤有效成分提取工艺白头翁汤来源于《伤寒论》,是临床常用的经典方,由白头翁,黄连,黄柏和秦皮4味药组成,具有清热解毒,凉血止痢之功效【l】.白头翁汤药效的物质基础

3、是其汤剂中的化学有效成分,但由于该汤剂的化学有效成分用传统的煎煮法提取时,易受到温度和提取溶剂,提取方法等方面的影响而不稳定,方中有效成分生成大量的沉淀物质【2】,降低了白头翁汤的药效作用.故本文以方中的有效成分为评价指标,运用单因素方差分析与正交试验设计法相结合来优选提取白头翁汤有效化学成分的提取方法和提取工艺条件,为白头翁汤的深入研究打下了坚实的基础,也为汤剂复方化学成分的提取研究提供基本的研究方法.1仪器与材料Waters高效液相色谱仪(515HPLCPump,Waters2478Dualh紫外检测器,威马龙色谱数据工作站);KED型高速中药粉碎机;RE一52

4、B旋转蒸发器;BT25S电子分析天平(德国);实验用乙腈为色谱纯,水为重蒸馏水;白头翁皂苷B对照品购于长沙拓康生物制品有限公司(HPLC归一法测定纯度大于98%),盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所,数量(30mg/支),编号:l10713;药材均购于贵州同济堂药材公司,经鉴定均为正品,质量符合2005版《中华人民共和国药典》一部【3】的相关规定.2方法与结果2.1提取方法的建立根据白头翁汤处方中药材性质,以及相关的文献研究发现不同的提取溶剂,单煎与合煎及温度对白头翁汤复方中的有效成分白头翁皂苷,盐酸小檗碱等有效成分有很大的影响,故建立以下提取方法进行研究.A

5、法:药材单煎白头翁药材单煎取白头翁药材粗粉15g,加水煎煮三次,第一次加l0倍量水,煮沸lh,过滤,药渣再分别加6倍量水再提二次,每次30分钟,过滤,合并滤液,浓缩,放冷,并定容至500ml,备用.黄连和黄柏药材单煎取黄连和黄柏药材粗粉分别6g,12g,加水煎煮三次,第一次加l0倍量水,煮沸lh,过滤,药渣再分别加6倍量水再提二次,每次30分钟,过滤,合并滤液,浓缩,放冷,并定容至500ml,备用.B法:水煎煮法(复方)称取白头翁汤处方量(白头翁15g,黄柏12g,黄连6g秦皮12g)药材粗粉,加水煎煮三次,第一次加10倍量水,煮沸1h,过滤,药渣再分别加6倍量水再

6、提二次,每次30分钟,过滤,合并滤液,浓缩滤液,并定容至500ml,备用.C法:回流提取法(复方)称取白头翁汤处方量(白头翁15g,黄柏12g,黄连6g,秦皮12g)药材粗粉,加60%乙醇回流提取三次,第一次加8倍量60%乙醇,回流提取1h,过滤,药渣再分别加6倍量60%乙醇再提二次,每次30分钟,过滤,合并滤液,回收乙醇,浓缩,并定容至500ml,备用.D法:渗漉法(复方)称取白头翁汤处方量(白头翁15g,黄柏12g,黄连6g,秦皮12g)药材粗粉,用60%的乙醇100ml拌匀,润湿后装入渗漉筒内,再加60%的乙醇浸泡24h,用12倍量的60%的乙醇渗漉,控制流速

7、在3ml/kg/min,低温(60℃以下)回收乙醇并浓缩至适量,放冷,加水经验交流Experiencecommunicate中国民族民间医药Chinesejournalofethnomedieineandethnopharmacy?61?定容至500ml,备用.2.2白头翁皂苷B含量测定方法的建立2.2.1色谱条件色谱柱为InertsilODS一3C18(51.zm250~4.6ram);流动相为乙腈一0.1%磷酸溶液(29:71);流速0.8ml?min;检测波长203nm;柱温为常温.2.2.2对照品溶液制备取白头翁皂苷B4对照品加流动相溶解成每lml含白头