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1、正交试验法优选金樱叶总黄酮提取工艺【摘要】目的优选金樱叶总黄酮的提取工艺,为金樱叶进一步的研究打下一定的基础。方法采用L�9(3�4)正交试验,以金樱叶总黄酮的含量为综合指标考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间和超声功率4个因素对提取效果的影响。结果最佳提取工艺为40倍量50%的乙醇,28KHz、90W超声60min,总黄酮得率为11.64%,RSD%为1.97%。结论该工艺合理,稳定可行,可为金樱叶总黄酮提取工艺的确定提供实验依据。�【关键词】正交试验;金樱叶;总黄酮;提取工艺��OptimumExtractingTcchnologyforTotalFlavonoidsfromChe
2、rokeeRose’sLeavesbyOrthogonalTestCHENYing-wen,CHENMu-shui.FirsthospitalaffilatedtoGuangzhoumedicaluniversity.Guangzhou510000,China�【Abstract】ObjectiveTooptimizetheextractiontechnologyfortotalflavonoidsfromCherokeeRose’sLeaves,andgivereferencefordevelopmentandutilizationoftotalftavonoids.Method
3、sTheprocesswasstudiedbyorthogonaldesignL�9(3�4)with8theextractionrateoftotalflavonoidsandpaste-formingrateascomprehensiveindexandresearchedtheeffectofalcoholamountalcoholdcnsity,extractiondurationandtheextractionfrequencyonextractionrate.ResultsTheoptimumprocessasfollowsthecrudedrugwasextracte
4、dbythe50%alcoholdensity40timesalcoholand28KHzfor60min.ConclusionThistechnologyisrcasonableandfeasible,whichcanbeusedasexperimentalbasisforextractiontechnologyfortotalftavonoids.�【Keywords】orthogonaltest,CherokeeRose’sLeaves,totalflavonoids,extractiontechnology金樱叶为蔷薇科植物金樱子RosalaevigataMichx的嫩叶,
5、味辣,性平。清热解毒、活血止血、止带、主痈肿疔疮、烫伤、痢疾、闭经、崩漏、带下、创伤出血[1]。金樱叶中含有多种有效成分,黄酮类如原矢车菊素(procyanidin)B-3、芹菜素等;鞣质类如蛇含鞣质(potentillin)、金樱子鞣质(laevigatin)C等。其中黄酮类成分具有体外抗肿瘤作用[2,3],因此本实验采用4因素3水平等正交试验L�9(3�4),选择总黄酮含量为综合考查指标,优化金樱叶的提取工艺,为开发新的抗癌药物提供理论参考。�
81仪器与试药�1.1仪器超声仪:KQ-3200VDB型双频数控超声波清洗器(昆山市舒美),紫外分光光度计:UV-1102紫外/可见分
6、光光度计(上海天美);分析天平:SH200E型电子天平,粉碎机:DFY-400,400g摇摆式高速中药粉碎机(温岭市林大机械)。�1.2试药材料:金樱叶来源于蔷薇科植物金樱子RosalaevigataMichx的嫩叶,本实验采摘自中山市。试剂:芦丁对照品(中国药品生物制品检定所);硝酸铝、亚硝酸钠、氢氧化钠、乙醇为分析纯。�2方法与结果�2.1因素及水平考察为系统考察乙醇超声提取金樱叶总黄酮的工艺参数,根据文献资料及实际情况选择乙醇浓度、超声时间、固液比和超声功率作为考察因素,以测得样品中总黄酮含量为考察指标,选用L�9(3�4)正交表实验,选出因素水平(见表1)。�2.2金樱叶的
7、预处理将采摘的金樱叶去除大部分枝梗,取叶片,晾干后用粉碎机粉碎成细粉,备用。称取一定量的金樱叶粉末,以1:8~1:10的固液比加入60℃~90℃的石油醚,超声40min后取出,弃去石油醚液,继续加入新的石油醚溶剂,再超声408min,重复以上操作3~4次后,过滤,弃去石油醚液,挥干溶剂,烘干后成脱脂金樱叶粉末,备用。�2.3供试品溶液的制备精密称取约0.5g的脱脂金樱叶粉末,置100ml的锥形瓶中,以一定的固液比加入一定浓度的乙醇溶液,在一定的超声功率下超声一定时间,