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《番荔枝内酯对人淋巴瘤raji细胞体外增殖和凋亡的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、番荔枝内酯对人淋巴瘤Raji细胞体外增殖和凋亡的影响论文.freelL分级作用于细胞。采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡率,免疫组化染色检测各组细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)的表达情况。结果番荔枝内酯组细胞增殖率均低于未干预组,25、50μg/mL药物浓度组细胞增殖率低于阿霉素组,增殖率与浓度及培育时间负相关；番荔枝内酯组细胞凋亡率高于未干预组,25、50μg/mL药物浓度组凋亡率高于阿霉素组,和浓度、时间正相关；与未干预组相比,番荔枝内酯组caspas
2、e-9表达量逐步增加,与阿霉素组比较,6.25μg/mL组caspase-9表达低于阿霉素组(P＜0.05),50μg/mL浓度组表达高于阿霉素组(P＜0.05)。结论番荔枝内酯对体外人淋巴瘤Raji细胞的增殖有抑制作用,并可能通过线粒体途径促进其凋亡。【关键词】番荔枝内酯；抗肿瘤；凋亡；增殖；caspase-9；Raji细胞Abstract：ObjectiveToinvestigatetheeffectsofannonaceousacetogeninonproliferationandapoptos
3、isinRajicellsanditsmechanism.MethodsRajicellsculturedinvitroycingroup.RajicellsLannonaceousacetogenin.ProliferationofRajicellsetry.Caspase-9proteinmunohistochemistry.ResultsTheRajicellproliferationrateofannonaceousacetogenindecreasedparedLgroupycingroup
4、,andite.TheapoptosisrateLgroupycingroup,andite.Theexpressionofcaspase-9proteinofannonaceousacetogeningroupe.ConclusionsAnnonaceousacetogenincouldinhibitcellproliferationinadose-dependentandtime-dependentmannerinRajicells,anditmayinduceRajicellsapoptosis
5、byup-regulatingcaspase-9expression.Keyor；apoptosis；proliferation；caspase-9；Rajicell番荔枝(AnnonasquamosaLinn.)为番荔枝科番荔枝属植物,我国广东、广西、海南、福建、云南等省及台湾地区均有栽培,东南亚、南美国家及地区也有广泛分布。番荔枝内酯(annonaceousacetogenins)分布在番荔枝科多种植物的根、树皮、种子、叶以及果实中。研究表明番荔枝内酯是一类很有希望的新抗癌药物。笔者研究番荔枝内酯
6、在淋巴瘤治疗中的应用,现将体外实验结果报道如下。1实验材料1.1药物番荔枝内酯类化合物：为本研究组参照DosSantos等1方法从番荔枝种子中提取分离所得,为白色蜡状粉末。使用前以少许无水乙醇溶解,加生理盐水配制成所需浓度,乙醇终浓度不超过1%；盐酸阿霉素为意大利法玛西亚公司产品。1.2主要试剂四甲基偶氮唑蓝(MTT,美国Sigma公司),AnnexinV-FITC凋亡检测试剂盒(南京凯基生物公司),半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9(caspase-9)免疫组化试剂盒(深圳晶美生物工程有限公司)。1.3瘤株
7、人Burkitt’s淋巴瘤细胞系Raji细胞购自华中科技大学同济医学院免疫教研室,并由本院实验室传代保存。2实验方法2.1分组番荔枝内酯组：细胞培养基中加入生理盐水溶解的番荔枝内酯,实验终浓度分别为6.25、12.5、25、50μg/mL；未干预组：细胞培养基中加入与实验组等体积的生理盐水；阿霉素组：细胞培养基中加入生理盐水溶解的阿霉素,终浓度为0.1μg/mL。2.2MTT比色试验取处于对数生长期的Raji细胞1×105/mL,接种于96孔培养板,分别加入不同浓度番荔枝内酯以及阿霉素各10μL,孵育
8、24、48、72h。孵育结束前4h,各培养孔加入MTT(5mg/mL)10μL,离心,弃上清,加入10%二甲基亚砜震荡溶解结晶,上酶标仪于波长λ＝492nm处测吸光度(OD)值。通过OD值计算细胞增殖抑制率。流式细胞仪测定细胞凋亡率。细胞增殖抑制率(%)＝(未干预组OD均值－实验组OD均值)/未干预组OD均值×100%。2.3实验步骤严格按照AnnexinV-FITC凋亡检测试剂盒说明进行。每份样品检测105个细胞,双参数结果以二维散点图显示,数据由FC
