地锦草提取物体外抗真菌作用研究论文

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1、地锦草提取物体外抗真菌作用研究论文李治建，古力娜·达吾提，斯拉甫·艾白【摘要】目的对地锦草提取物进行体外抗真菌实验，测定其最小抑菌浓度(MIC)值。方法采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的《产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》(M38-A)，测定地锦草提取物对60株临床常见皮肤癣菌的MIC。参考MIC结果，选取地锦草提取物敏感的6株皮肤癣菌按文献方法进行杀菌试验。结果地锦草提取物对红色毛癣菌的MIC范围为128～1024μg·ml-1，平均MIC为446μg·ml-1

2、；对石膏样毛癣菌的MIC范围为128～1024μg·ml-1，平均MIC为539μg·ml-1。杀菌结果显示.freelinetheantifungaleffectofDijincaoextractinvitroandtomeasuretheminimuminhibitoryconcentration(MIC).MethodsAccordingtothestandardapprovedbytheNationalmitteeforClinicalLaboratoryStandards(NCCLS)

3、:ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofFilamentousFungi(M38-A),theMICsofDijincaoextractagainst60strainsofmonclinicaldermatophytesined.AccordingtothoseMICs,6strainsofdermatophytesbeingsensitivetoDijincaoextracticidaltestethod

4、indocuments.ResultsTheMICrangeofDijincaoextractagainstTrichophytonrubruml-1，meanMICl-1；theMICrangeofDijincaoextractagainstTrichophytonmentagrophytesl-1，meanMICl-1.Theresultofgermicidaltestshoatophytesgreatophytesinvitro.Keyankulake），为大戟科植物地锦Euphorbia

5、humifusa38-A)［2］，探讨地锦草提取物的体外抗真菌活性。1材料1.1药物地锦草提取物(DJC)，由自治区维吾尔医药研究所药剂室提供。提取方法及质量控制，参照《中华人民共和国药品标准-维吾尔药分册》中百癣夏塔热片之地锦草提取方法及质量控制［3］。阳性对照药特比萘酚(Terbinafine，TBF，商品名：Lamisil)，由诺华公司提供，批号010482，纯度99.9%。1.2菌种红色毛癣菌(Trichophytonrubrum，T.r)20株；石膏样毛癣菌(Trichophytonm

6、entagrophytes，T.m)40株；质量控制菌株为近平滑念珠菌(Candidaparapsilosis，C.p)1株。本实验所采用的菌株，均来自新疆医科大学真菌与真菌病研究中心菌种保藏库(XYZ)。1.3培养基RPMI-1640培养基，美国sigma公司产品；三氮吗啡琳丙磺酸（MOPS），美国sigma公司产品；马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，批号20070825，北京奥博星生物科技有限公司产品。RPMI-1640培养基的配制：将10.4gRPMI-1640和34.53gMOPS粉末溶

7、于900ml蒸馏水中，用1mol·L-1NaOH溶液调整其pH至7.0(25℃)，加蒸馏水定容至1L，G-6漏斗滤过灭菌，存于4℃冰箱备用。PDA培养基的配制：称取PDA粉末38g，加入1000ml蒸馏水中，摇匀加热煮沸溶解，121℃高压灭菌20min，分装，4℃保存，备用。2方法2.1MIC的测定根据NCCLS推荐的《产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》(M38-A)［2］，测定DJC提取物对T.r、T.m的最低抑菌浓度值(MIC)。2.1.1抗真菌药物储备液、稀释液的制备称取D

8、JC粉末204.8mg，用1ml二甲基亚砜(DMSO)溶解，制成浓度为204800μg·ml-1的储备液，存于-20℃冰箱备用；称取TBF8mg，用1mlDMSO溶解，制成浓度为8000μg·ml-1的储备液。从中吸取1μl加RPMI-1640培养基499μl，使之稀释500倍，此时TBF储存液浓度为16μg·ml-1，存于-20℃冰箱备用。将DJC储备液、TBF储备液分别用RPMI-1640培养基倍比稀释成2倍终浓度。DJC的2倍终浓度由高向低依次为：2048，1024，512，256，128