地锦草提取物体外抗真菌作用研究

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1、地锦草提取物体外抗真菌作用研究李治建，古力娜·达吾提，斯拉甫·艾白【摘要】目的对地锦草提取物进行体外抗真菌实验，测定其最小抑菌浓度(MIC)值。方法采用美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的《产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》(M38-A)，测定地锦草提取物对60株临床常见皮肤癣菌的MIC。参考MIC结果，选取地锦草提取物敏感的6株皮肤癣菌按文献方法进行杀菌试验。结果地锦草提取物对红色毛癣菌的MIC范围为128～1024μg·ml-1，平均MIC为446μg·ml-1；对石膏样毛癣菌的MIC范围为128

2、～1024μg·ml-1，平均MIC为539μg·ml-1。杀菌结果显示，6株皮肤癣菌均生长，表明地锦草具有抑菌作用，其抗真菌作用是通过抑制真菌生长而发挥作用的，而不具有杀菌作用。结论地锦草提取物体外实验对真菌的生长具有抑制作用。【关键词】地锦草提取物；M38-A方案；体外抗真菌；最低抑菌浓度　　Abstract：ObjectiveToexaminetheantifungaleffectofDijincaoextractinvitroandtomeasuretheminimuminhibitoryconcentration(M

3、IC).MethodsAccordingtothestandardapprovedbytheNationalmitteeforClinicalLaboratoryStandards(NCCLS):ReferenceMethodforBrothDilutionAntifungalSusceptibilityTestingofFilamentousFungi(M38-A),theMICsofDijincaoextractagainst60strainsofmonclinicaldermatophytesined.According

4、tothoseMICs,6strainsofdermatophytesbeingsensitivetoDijincaoextracticidaltestethodindocuments.ResultsTheMICrangeofDijincaoextractagainstTrichophytonrubruml-1，meanMICl-1；theMICrangeofDijincaoextractagainstTrichophytonmentagrophytesl-1，meanMICl-1.Theresultofgermicidalt

5、estshoatophytesgreatophytesinvitro.　　Keyankulake），为大戟科植物地锦Euphorbiahumifusa38-A)〔2〕，探讨地锦草提取物的体外抗真菌活性。　　1材料　　1.1药物地锦草提取物(DJC)，由自治区维吾尔医药研究所药剂室提供。提取方法及质量控制，参照《中华人民共和国药品标准-维吾尔药分册》中百癣夏塔热片之地锦草提取方法及质量控制〔3〕。阳性对照药特比萘酚(Terbinafine，TBF，商品名：Lamisil)，由诺华公司提供，批号010482，纯度99.9%。　　1

6、.2菌种红色毛癣菌(Trichophytonrubrum，T.r)20株；石膏样毛癣菌(Trichophytonmentagrophytes，T.m)40株；质量控制菌株为近平滑念珠菌(Candidaparapsilosis，C.p)1株。本实验所采用的菌株，均来自新疆医科大学真菌与真菌病研究中心菌种保藏库(XYZ)。　　1.3培养基RPMI-1640培养基，美国sigma公司产品；三氮吗啡琳丙磺酸（MOPS），美国sigma公司产品；马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)，批号20070825，北京奥博星生物科技有限公司产品。　　

7、RPMI-1640培养基的配制：将10.4gRPMI-1640和34.53gMOPS粉末溶于900ml蒸馏水中，用1mol·L-1NaOH溶液调整其pH至7.0(25℃)，加蒸馏水定容至1L，G-6漏斗滤过灭菌，存于4℃冰箱备用。　　PDA培养基的配制：称取PDA粉末38g，加入1000ml蒸馏水中，摇匀加热煮沸溶解，121℃高压灭菌20min，分装，4℃保存，备用。　　2方法　　2.1MIC的测定根据NCCLS推荐的《产孢丝状真菌的液基稀释法抗真菌药物敏感性试验方案》(M38-A)〔2〕，测定DJC提取物对T.r、T.m的最

8、低抑菌浓度值(MIC)。　　2.1.1抗真菌药物储备液、稀释液的制备称取DJC粉末204.8mg，用1ml二甲基亚砜(DMSO)溶解，制成浓度为204800μg·ml-1的储备液，存于-20℃冰箱备用；称取TBF8mg，用1mlDMSO溶解，制成浓度为8000μg·ml-1的