旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原保护性免疫的比较研究

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1、旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原保护性免疫的比较研究：毛立群,唐洁,杨静,李覃,牛秀珑,叶路,孙奕【摘要】　　目的:比较旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原诱导小鼠产生保护性免疫效果的异同。方法:制备旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原,分组免疫小鼠,并于末次免疫后10d用旋毛虫感染性幼虫对各组小鼠实施攻击感染,检测攻击感染后各组小鼠肠道成虫和肌肉幼虫数并计算减虫率,同时采用ELISA法检测各组小鼠血清IgG抗体水平。结果:成虫抗原免疫组小鼠和肌幼虫抗原免疫组小鼠检获的肠道成虫数和肌幼虫数均显著少于对照组（P＜0.05),其中

2、以成虫抗原免疫组小鼠减虫率最高（P＜0.01）。成虫抗原免疫组和肌幼虫抗原免疫组小鼠于实施旋毛虫感染性幼虫进行攻击感染的当日所检测的血清IgG抗体水平与其免疫前相比均升高（P＜0.01,P＜0.05),与对照组相比亦升高（P＜0.01,P＜0.05),其中也以成虫抗原免疫组小鼠血清IgG抗体升高最为显著（P＜0.01）。结论:旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原均能激发小鼠产生保护性免疫,其中成虫抗原免疫组小鼠显示出更好的抗感染保护性。【关键词】旋毛虫;成虫抗原;肌幼虫抗原;保护性免疫　　［Abstract］A

3、IM:ToparetheimmuneprotectiveeffectsofthemiceimmunizedbyantigensderivedfromadultsandmusclelarvaeofTrichinellaspiralis.METHODS:TheadultandmusclelarvaeantigensofTrichinellaspiralisice(adultantigengroupandmusclelarvaeantigengroup)munized,respectively.After1

4、0daysofthefinalvaccination,themiceineachgroupberofintestinaladultsandmusclelarvaeinedandtheirreductionrateIgGineachgroupberofintestinaladultsandmusclelarvaeinadultgroupandmusclelarvaeantigengroupberofintestinaladultsandmusclelarvaeinadultantigengroupice

5、inthetIgGdetectedonthesamedayIgGofthemicedetectedonthedayiceantigengroup（P＜0.01）.CONCLUSION:BoththeadultandmusclelarvaeantigensofTrichinellaspiraliscanstimulatemicetoproduceprotectiveimmunityandthemiceimmunizedantigenshavestrongerresistancetothesubseque

6、ntchallengeinfection.　　［Keyantigen;musclelarvaeantigen;protectiveimmunity　　旋毛虫病是一种人畜共患病,对人类及畜牧业危害严重。旋毛虫抗原成分复杂,各种抗原诱导产生的保护性免疫效果也各有不同［1］,给旋毛虫病的预防工作带来很大困难。我们应用旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原分别免疫小鼠,再采用相同数量的感染性幼虫对其进行攻击感染,通过检测减虫率及小鼠血清IgG水平来评价旋毛虫成虫抗原和肌幼虫抗原免疫后小鼠所获得的抗感染能力,以研究旋毛虫不

7、同发育时期的抗原所诱导产生的保护性免疫效果,为进一步研究旋毛虫的人工预防提供实验数据。　　1材料和方法　　1.1材料　　昆明种小鼠购自武警医学院动物饲养场。旋毛虫虫种由武警医学院寄生虫学教研室提供,为小鼠保种传代的猪源旋毛虫。　　1.2方法　　1.2.1旋毛虫抗原的制备　　①旋毛虫成虫可溶性抗原的制备:小鼠灌胃感染300条/只旋毛虫感染期幼虫,7d后处死,取小肠纵行剪开并剪成2～3cm长小段,无菌生理盐水漂洗,加入37℃预温的无菌生理盐水,置37℃恒温培养箱孵育4～5h,使成虫从肠壁钻出,反复无菌生理

8、盐水沉淀、漂洗后收集纯净的成虫。将成虫研磨成匀浆,超声粉碎仪间歇粉碎,4℃冰箱过夜,以10000r/min4℃离心30min,取上清即为成虫可溶性抗原。紫外分光光度计测定蛋白含量,-20℃冻存,备用。②旋毛虫肌幼虫抗原的制备:小鼠罐胃感染300条/只旋毛虫感染期幼虫,40d后处死,取全部肌肉剪碎,加入胃蛋白酶消化液,置37℃温箱8～12h,待肌肉被完全消化后,铜网过滤,自然沉淀,再用生理盐水漂洗3次,收集脱囊肌幼虫。将肌幼虫中加入无菌生理盐水,用人工玻璃