趋化因子ccl5在类风湿关节炎患者滑液炎性细胞中的表达论文

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1、趋化因子CCL5在类风湿关节炎患者滑液炎性细胞中的表达论文.freelokineCCL5insynovialfluidinflammatorycellsfrompatientsatoidarthritis【Abstract】ObjectiveTodeterminetheCCchemokineCCL5(RANTES)levelinserumandsynovialfluid(SF)frompatientsatoidarthritis(RA)，andtheexpressionofCCL5insynovialfluidinflammatorycells.Meth

2、odsCCL5inserumandSFmatorycellsinvitroined.freelCCL5levelinRAoreovertheconcentrationofCCL5inSFinRA.SerumCCL5levelcorrelatedsignificantlymatorycellsfromRAasparedmatorycellsfromOA，andperipheralRA.ConclusionTheincreasedlevelofCCL5inRA，asCCL5etersofRA，indicatethatCCL5playanimportantro

3、leinRA.TheincreasedproductionCCL5bySFinflammatorycellssuggeststhatthosecellsaremainsourceofCCL5secretioninRA.【KeyatoidchemokineCCL5类风湿关节炎（RA）是一种常见的慢性炎性关节炎，其病理特点为大量炎性细胞在滑膜的浸润和在滑液的渗出，及由此导致滑膜增生、血管翳形成，最终造成关节软骨破坏。近期的研究显示，趋化因子（chemokine）在RA的炎性细胞关节浸润中起着极为重要的作用［1］。现已发现CC亚族趋化因子受体5（CCR5）在R

4、A关节浸润的炎性细胞中表达增高［2］，提示RA患者病变关节内CCR5的配体产生增多，选择性地趋化CCR5阳性白细胞亚群进入炎性关节部位。本文通过采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定RA患者血液和滑液中CCR5配体CCL5（又称调节活化的正常T细胞表达和分泌的因子(RegulatedonActivationNormalTCellExpressedandSecreted，RANTES)）水平，并对RA患者外周血白细胞、滑液炎性细胞产生CCL5进行体外研究，以探讨CCL5与RA的相关性，及其在RA患者的产生来源。1资料与方法1.1一般资料在本院就诊RA患者28

5、例，男5例，女23例，年龄21～67岁，平均年龄38岁，病程6个月～19年，平均7.8年。所有病人均符合美国风湿病学会1987年的RA诊断标准［3］，且病情处于活动期。病人取空腹外周血，分离血清后置-20℃冰箱保存备用。对28例患者中11例有膝关节积液的患者，在无菌条件下行膝关节穿刺，抽取关节液后，1000r/min，离心10min，取上清液置-20℃冰箱保存备用，沉淀用无菌PBS洗3次后，收集滑液中炎性细胞，同时收集并记录RA的临床资料，包括晨僵时间、握力、关节肿胀指数、关节压痛指数、关节X线病变程度、血沉、C反应蛋白（CRP）和类风湿因子（RF）等实

6、验室检查结果。另选骨关节炎（OA）患者21例作为对照，其中男7例，女14例，年龄36～78岁，平均年龄45.2岁，病程1.2～15年，平均9.6年。对并发膝关节积液的6例OA患者，同时行膝关节穿刺，抽取关节液分离上清和细胞。1.2CCL5测定CCL5测定采用ELISA方法，CCL5定量测定试剂盒（美国R＆D公司生产）测定敏感度为3.1pg/ml，操作按试剂盒说明书进行。1.3外周血白细胞和滑液炎性细胞体外产生CCL5的研究对抽取关节液的11例RA和6例OA患者，另取外周抗凝血10ml，离心去血浆后加2倍体积冷无菌0.2%氯化钠溶液，振荡混匀10s后迅速加

7、入等体积无菌1.6%氯化钠溶液，在4℃，1000r/min，离心5min，去上清，重复裂解红细胞1～2次，用无菌冷PBS洗2次后，加2mlRPMI1640培养液（含10%小牛血清，100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素）悬浮沉淀细胞，混匀后取10μl行台盼兰染色，活细胞计数。收集到的外周血白细胞和滑液炎性细胞用上述培养液稀释成105/ml，按每孔0.5ml接种于24孔培养板，置含5%CO2孵育箱中，于37℃培养48h，收集上清，按上述ELISA测定CCL5。1.4统计学处理两组间计数资料用t检验，血清CCL5水平与临床及实验室指标的相关性分析采用直

8、线相关回归分析。2结果2.1血清和关节液CCL5测定结果RA和OA患者血清和关节