大鼠脑缺血模型及缺血再灌注模型

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1、大鼠全脑缺血模型制备方法评价二血管阻断法阻断双侧颈总动脉（commoncarotidartery，CCA）加动脉放血造成低血压而形成前脑缺血。若单纯结扎双侧CCA而不降低血压，则难以使脑血流量（cerebralbloodflow，CBF）降低至缺血和能量代谢紊乱的程度。该法手术简便易于操作，成功率高。缺点：仅形成不完全脑缺血，造成的低血压严重干扰其他器官的血供及实验结果；不能在动物清醒状态下进行，无法进行神经行为学的观察。因此，该模型对探讨缺血性脑损伤的发病机制、评价抗脑缺血药物的疗效更有价值。颅内加压法小脑延池内注入人工脑脊液，使颅内压升

2、高超过动脉血压2.7~9.3kPa（1kPa≈0.133mmHg），同时给予神经节阻滞剂三甲噻方，防止颅内高压反射性引起高血压。颈部加压法麻醉动物，颈部套一止血带，加压至80~93kPa，减少脑血流量，造成脑缺血。断头法断头造成全脑不可逆缺血，取下脑组织冰冻贮存，常用于生化和代谢分析。低氧法结扎单侧CCA合并全脑缺氧，PaO2维持在2.8kPa。由于脑部不是真正的缺血，采用这一模型得到的结论不适用于脑缺血，但可比较缺氧与脑血流量减少引起效应的不同。胸内血管夹闭法开胸，夹闭左侧CCA、头臂干、左侧锁骨下动脉，造成全脑缺血。大鼠局灶性脑缺血模型

3、制备方法评价栓塞法颈动脉注射血凝块栓复制栓塞性脑卒中模型的方法过去只用在中型体积动物，现已在大鼠中应用。Kudo等［12］采用<100μm的同源血凝块栓悬液，注入CCA，在颈外动脉（externalcarotidartery，ECA）的颈内动脉（internalcarotidartery，ICA）开口处置一可逆性插管，栓子则由ICA进入MCA，导致同侧大脑皮层、海马、深层灰质结构的梗塞。也有人用碳素颗粒、花生四烯酸钠作为栓塞剂制成脑梗塞模型。适于血栓形成过程的研究和溶栓治疗的观察，尤其是用人血凝块栓塞法更具有应有价值。缺点：①由于栓子的随机

4、性，无法预测梗塞部位及大小；②侧支循环的影响使组织缺血程度不一，不利于组织定量分析。开颅法Tamura等［13］采用颞下部开颅，分离近端MCA，电凝或用手术丝线结扎MCA，造成脑梗塞，是目前公认的标准MCA闭塞模型，以大脑皮层、尾状核缺血最明显。进一步改进此方法，可通过降低动脉血压以减少伴行血管远近端分支对梗塞区的血供，增大梗塞面积。其中，Kader改进电凝方法，闭塞MCA所有可见分支，梗塞效果好；Chen［14］等采取鼻缝旁入路，制作了远端MCA合并同侧CCA永久性闭塞，对侧CCA暂时性闭塞模型。开颅法闭塞MCA，实验条件较恒定，缺血效果

5、可靠，是迄今应用最广泛的经典性局灶脑缺血模型。缺点：需要开颅，创伤性大，闭塞血管后无法进行再灌性损伤研究。光化学法曾报道，Watson等首次建立了光化学法诱导脑皮层梗塞的动物模型。立体定位仪固定大鼠头部，暴露颅骨，尾静脉注射光敏材料荧光素，用560nm波长的特定光源照射局部头颅，光线透过颅骨与血管内的染料接触，激发光化学反应，引起照射部位皮层血管内皮细此法适于研究抗血小板、抗血栓形成药物和血管内皮细胞保护剂的疗效；此种模型无须开颅，动物存活时间长，适于慢性脑缺血研究；皮层梗塞部位可任意选择，为皮层功能定位研究提供了条件。缺点：与人类常见的脑

6、栓塞存在差异，而且是终末动脉永胞毒性脑水肿而导致脑梗塞。久性闭塞，妨碍扩血管药的治疗观察。大鼠全脑缺血再灌注损伤模型制备方法评价四血管阻断法1979年，Pulsinelli等［26］通过阻断双侧CCA及椎动脉血流成功建立了四血管闭塞法大鼠全脑缺血模型。手术分两个阶段：麻醉动物，颈前正中切口，分离CCA，将无损动脉夹轻放于双侧CCA周；同时枕部切口暴露第一颈椎翼小孔，电凝双侧椎动脉，造成永久性闭塞。24h后夹闭双侧CCA，造成明显的脑缺血。以大脑皮层、纹状体、海马缺血最为明显。解除动脉夹可进行脑缺血再灌注研究。1983年，作者［27］又改进这

7、一模型，即在气管、食管、颈总动脉、颈外静脉后，颈部肌肉前置一手术丝线，夹闭CCA同时，在气管后扎紧这根丝线，以减少颈部皮下组织、肌肉血液对脑部的供应。此方法检验缺血是否成功的指标明确［4］；可进行再灌注损伤的研究；海马损伤明显，可显示记忆功能的减退。缺点：手术较复杂，实验操作的熟练程度直接影响实验效果。三血管阻断法Kamegama等［28］通过电灼断基底动脉、同时夹闭两侧颈总动脉的方法复制全脑缺血模型，由于该方法不仅阻断了脑供血主干血管，而且也阻断了从脊前动脉来的侧支血管，与前述四血管阻断模型比较，脑缺血成功率高且无需再筛选是其主要优点。田

8、鹤邨［29］等在此基础上又加以改进不用显微镜而在直视下进行手术，用特制的动脉夹夹闭基底动脉而不用电灼断的方法。缺血一定时间后可去除夹闭进行彻底再灌注，也避免了灼断基底动脉导致的动