作物根系活力诊断法

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时间:2018-05-17

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1、作物根系活力诊断法    diagnosismethodofcroprootvigour字体[大]  [中]  [小]调查观察作物根系形态和生理生化变化以判断其生活力的强弱。根是作物吸收水分、养分的主要器官,是作物营生的根本。作物产量与根系休戚相关。作物“早衰”,常与根系活力过早下降或衰竭有关。对于生育于淹水环境中的水稻更是如此。根系脱氢酶活性诊断法——TTC法作物根系有氧呼吸过程中,在脱氢酶作用下,释放氢并产生能量供作物代谢和吸收养料需要。作物长势与根系脱氢酶有密切关系,脱氢酶活性大小可以大致判断根系活力的强弱。TTC(三苯基氯化四氮唑)可被根系有氧

2、呼吸中由脱氢酶作用产生的氢还原成红色的TPF(三苯基甲䐶),红色深浅反映脱氢酶活力强弱。测定方法是:取代表性植株,尽量不伤其根并仔细洗净,称根样1~2克放入试管,加10毫升0.4%的TTC和0.1摩尔/升磷酸盐缓冲液(Na2HPO414.196克、KH2PO413.609克,分别加蒸馏水1升,分取620毫升和380毫升混合),37℃恒温作用3小时,TTC被脱氢酶还原成红色TPF,加1摩尔/升硫酸2毫升,停止酶作用。取出根移入研钵与3~5毫升乙酸乙酯和少量石英砂共研,使红色TPF溶出,转入50毫升量瓶,继续多次洗涤残渣至无色。滤液转入量瓶,用乙酸乙酯定容

3、,分光光度计上485微米比色,制备标准曲线用TPF浓度系列为0,2.5,5.0,7.5,10.0,12.5,20.0微克/毫升,比色。读取光密度,绘成曲线。试样比色读得光密度,查曲线得TPF浓度,乘以样品稀释倍数(比色液总体积毫升/克鲜根重)即为脱氢酶活性(TPF微克/克鲜根3小时)。伤流量诊断法作物伤流液多寡与根系活力密切相关。测定一定时间内的伤流液量可以作为根系活力的指标。伤流量大,根的活性强。测定时选用直径适中(根据作物不同使刚能套紧切口为度),长2~3厘米一端封闭的薄塑料套管,内装少量脱脂棉以吸收伤流液。称重后,把套管套在植株切断伤口上,使脱脂

4、棉紧密接触切口,经一定时间(根据伤流量多少决定时间长短),取下套管再次称重。两次重量的差数代表一定时间的伤流量:
水稻根系氧化力诊断法——α-萘胺法水稻生育于淹水环境下,其根系具有一特殊的乙醇酸氧化途径,能向根外泌氧使根系周围形成氧化圈,以抵抗土壤中还原物质如H2S、Fe2+、Mn2+、有机酸的侵害,水稻根系氧化力是水稻根系活力的指标。α-萘胺为一还原剂,能被水稻根氧化成红色的羟基萘胺,颜色深浅反映根系氧化力的强弱。约测法:取水稻鲜根,尽量避免损伤,吸干附着水,剪下根尖2厘米根段,称1克,放在三角瓶中,并加25毫升40毫克/千克的α-萘胺和25毫

5、升0.1摩尔/升的磷酸缓冲液,作用数小时后,从根表染色深浅作大致判断,红色由浅而深。氧化力由弱到强。标准色阶比色测定法:由于直接测定被根氧化的α-萘胺困难,实际测定中是测定氧化后的剩余α-萘胺量,以对氨基苯磺酸和亚硝酸钠与α-萘胺一起作用生成偶氮染料显紫红色,进行比色定量。制作标准曲线的α-萘胺系列浓度可用0,10,20,30,40,50,60微克/毫升,比色,读取光密度,绘成工作曲线。水稻根系氧化力——二价铁氧化力测定法水稻根系分泌的氧能使二价铁氧化成三价铁,使溶液Eh值提高,测定溶液Eh值变化大小可以粗略判断根系氧化力的强弱。方法是取水稻根系,仔细

6、洗净,吸干表面水分,沿根基切下,剪下1厘米左右根段。用烧杯盛75毫升15毫克/千克的硫酸亚铁液(FeSO4·7H2O74.7毫克,加水1升,调pH值为6.2),以pH值计(可测Eh值)先测定硫酸亚铁液Eh值并记录,再称取样根3克,放入亚铁溶液中,在不断摇动搅拌下每隔1或2分钟一次连续测计Eh值,至30分钟止。测定结果以Eh值为纵坐标,时间为横坐标,绘出Eh值曲线,该曲线可能有两种形式(见图)。曲线2的初始Eh值下降是因根表存在的氧化铁膜所致,故其氧化力的起始值(Eh值)应从最低值算起,曲线上升速度指示根系氧化力大小,同一时间内,Eh值差异越大,曲线上升

7、越快,即陡度越大时氧化力越强。

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