西地那非对荷s180小鼠抗肿瘤作用的实验的论文

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1、西地那非对荷S180小鼠抗肿瘤作用的实验的论文【摘要】目的观察西地那非抗肿瘤及化疗增效的作用，探讨可能的机制。方法建立s180小鼠模型。西地那非分低、中、高剂量单独给药或联合化疗。比较抑瘤率；给药第6天流式细胞仪检测中剂量西地那非组、对照组肿瘤细胞凋亡及细胞周期分布，elisa法检测肿瘤细胞内血管内皮生长因子（vegf）、p53、环磷酸腺苷（camp）、环磷酸鸟苷（cgmp）的水平。结果联合化疗组抑瘤率高于西地那非组，西地那非组又高于对照组；中剂量西地那非组p53、vegf、细胞周期分布与对照组相比无差异，cgmp、细胞凋亡率高于对照组，camp低于

2、对照组。结论西地那非有一定的抗肿瘤和化疗增效作用；这种作用与诱导肿瘤细胞的凋亡相关，与细胞周期阻滞、vegf、p53的变化无关。【关键词】西地那非凋亡细胞周期化疗0引言　　磷酸二酯酶(pde)通过调节细胞内环磷酸腺苷（camp）、环磷酸鸟苷（cgmp）的浓度在许多生理过程中发挥作用，而camp和cgmp被称为第二信使，对细胞的生长、增殖、分化起重要的调节作用，因此pde常被作为药物的作用靶点[1]。西地那非作为一种选择性的pde抑制剂，目前对它们的研究集中在治疗性功能障碍上，我们以荷s180小鼠为动物模型来研究西地那非的抗肿瘤作用。初步结果显示它有一

3、定的抗肿瘤和化疗增效作用，这种作用与诱导肿瘤细胞的凋亡有关，现报告如下。.　　1材料和方法　　1.1小鼠及分组昆明鼠，体重（20±2）克，雄、雌并用。按常规方法建立s180小鼠模型。接种瘤细胞24小时后灌胃给药，连续给药10天。随机分组：（1）空白对照组：给予0.2ml生理盐水；（2）环磷酰胺(ctx)组：ctx10mg/（kg·d）。（3）低剂量西地那非组：西地那非30mg/（kg·d）；（4）中剂量西地那非组：西地那非60mg/（kg·d）；（5）高剂量西地那非组：西地那非100mg/（kg·d）；（6）低剂量西地那非联合化疗组：西地那非30mg

4、/（kg·d）＋ctx10mg/（kg·d）；（7）中剂量西地那非联合化疗组：西地那非60mg/（kg·d）＋ctx10mg/（kg·d）；（8）高剂量西地那非联合化疗组：西地那非100mg/（kg·d）＋ctx10mg/（kg·d）。　　1.2试剂annexinv试剂盒、elisa试剂盒购自晶美生物工程有限公司。annexinv试剂盒批号：20070216；vegf试剂盒批号：20070105；camp、cgmp试剂盒批号分别为：fhk0152a、fhk0842f；p53试剂盒批号：mca1452。　　1.3标本检测武汉大学医学生物学结构实验中心完

5、成。　　1.3.1抑瘤率给药10天，停药24小时后，断椎处死小鼠，称瘤重，计算抑瘤率，抑瘤率＝(对照组平均瘤重-实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重；　　1.3.2肿瘤细胞凋亡及细胞周期的检测在给药第6天，取中剂量西地那非组、空白对照组小鼠的肿瘤标本，通过碾磨、离心、过滤等步骤制得单个细胞悬液，按凋亡试剂盒说明进行流式细胞仪（美国beckman公司）检测。　　1.3.3细胞因子浓度的检测在给药第6天，取中剂量西地那非组、空白对照组小鼠的肿瘤标本，按elisa试剂盒说明进行检测。　　1.3.4电镜检测在给药第6天，快速取中剂量西地那非组、空白对照组的肿瘤标

6、本少许，常规固定，透射电镜下观察。　　1.4统计学方法使用spss10.0软件进行统计分析，组间比较用t检验，多组间比较用方差分析，以p＜0.05判定为差异有统计学意义。　　2结果　　2.1西地那非对肿瘤的抑制作用及化疗增效作用表1中低、中、高剂量西地那非组与相应的联合治疗组平均瘤重经t检验，p值分别为0.029、0.003、0.045；ctx组与联合治疗组经t检验，p分别为0.153、0.008、0.011，显示西地那非很好的化疗增效作用。不同剂量西地那非组内、西地那非组与ctx组经方差分析，p均＞0.05，说明西地那非本身有一定的抑瘤作用。表2显

7、示西地那非对小鼠肿瘤的抑制作用无性别差异。　　2.2西地那非对细胞因子浓度及细胞凋亡、周期的影响结果显示西地那非抗肿瘤作用与改变肿瘤细胞的camp、cgmp水平，诱导细胞凋亡有关，而与vegf、p53、细胞周期阻滞无关，见表3、4。　　表1西地那非的抑瘤率、化疗增效作用（略）　　　tab1effectofsildenafilonanti²tumorand　thechemotherapyenhancement　　表2西地那非对雄、雌性小鼠抑瘤作用的比较（略）　　　tab2tumorinhibitoryeffectofsildenafilonm

8、aleorfemalemice　　2.3电镜检测结果空白对照组细胞完整，细胞核居中或偏向一侧，可见核仁；未见