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时间:2018-05-07
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1、柔肝消癥饮对肝硬化大鼠肝细胞转化生长因子β1表达的影响【关键词】柔肝消癥饮;肝硬化;转化生长因子β1 【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofRouganxiaozhengliquidonexpressionofTGFβ1inhepaticcellsofcirrhosisrats.MethodsFufangbiejiaruangantabletalgroup,thenormalhepaticlobulesinmodelgrouped.Theexpression
2、ofTGFβ1inhepaticcellsodelgroup,thechangeofpathologicalhistologyofeachtreatmentgroupproved,theexpressionofTGFβ1ofeachtreatmentgroupatrixandhepatocirrhosisandcanobviouslydecreasetheexpressionofTGFβ1inhepaticcellsofcirrhosisrats. 【Keyl/100g体重,以后每周2次皮下注射0
3、.3ml/100g体重,共9l/100g计算,共4l/kg)将大鼠麻醉,腹部正中切口,迅速剖取肝脏,用滤纸吸去表面液体,在肝脏最大叶距边缘约0.5cm处取1cm3大小组织块,置于4%多聚甲醛溶液固定24h,逐级酒精脱水、透明、浸蜡、包埋、切片,采用HE和免疫组化SP法染色。 1.2.4检测指标免疫组化光镜下TGFβ1阳性表达为棕黄色颗粒。采用HPIAS1000型高清晰度彩色病理图文报告分析系统9.0版对染色阳性部位进行光密度值测定。定量分析TGFβ1阳性表达的面数密度(Na)(测量窗口中阳性细胞
4、数目/参考面积,表示参照系单位体积中阳性细胞的数目),比表面(Sv)(阳性表达总周长/参考面积,反映参照体积中阳性细胞面积所占的相对比例),体积百分数(Vv)、面积百分数(Aa)(阳性表达总面积/参考面积,反映单位面积内阳性表达面积所占的比值),平均灰度(反映肝细胞中阳性细胞表达强度)。 1.3统计学处理计量数据采用x±s表示,运用SPSS11.5统计软件,采用方差分析、StudentNeanKeul检验。 2结果 2.1各组大鼠肝细胞TGFβ1的定量表达模型组大鼠肝细胞TGFβ1Na、S
5、v、Vv和平均灰度均较正常组明显升高(P<0.01);用药治疗后,各用药组TGFβ1阳性表达参数均较模型组明显下降(P<0.01)。其中,高剂量组TGFβ1Na较对照组明显下降(P<0.05)。见表1。表1各组大鼠肝细胞TGFβ1的定量表达与模型组比较:1)P<0.01;与对照组比较:2)P<0.05 2.2光镜观察见图1。正常组大鼠肝组织结构完整、清晰,肝小叶结构正常,肝细胞排列规则成索状,在中央静脉周围呈放射状分布。肝血窦结构清晰,无异常改变。肝细胞呈多边形,胞浆
6、均匀,细胞核形态正常。模型组大鼠肝小叶正常结构消失,间质内弥漫性淋巴细胞浸润。肝细胞体积明显增大,局部肝细胞出现严重的脂肪变性,可见到再生的肝细胞(双核)。肝间质广泛纤维组织增生,将正常肝小叶分割成大小不等的肝细胞团(即假小叶形成)。高剂量组肝小叶结构亦受损,少数肝细胞气泡样变性但仅偶见坏死细胞,较少炎性细胞浸润,少量纤维组织增生,但未见形成间隔。低剂量组肝小叶结构被破坏,部分肝细胞气泡样变性并伴有细胞坏死,较多淋巴、单核细胞浸润,纤维组织增生,但较少形成间隔。对照组与低剂量组基本相似。 2.3各
7、组大鼠TGFβ1的定性表达TGFβ1在正常肝细胞中有少量表达,有少量胞核和胞浆染色阳性。造模以后大鼠肝细胞TGFβ1表达量明显增强、阳性染色细胞数目增多,呈棕黄色胞浆型分布,主要见于星状细胞、类间质细胞和炎细胞胞浆中。见图2。各治疗组阳性染色程度较模型组明显减轻,在纤维隔内间质细胞和炎细胞胞浆阳性染色程度减轻、数目减少。 图1模型组大鼠肝脏病理变化(HE,×200)图2模型组大鼠肝细胞TGFβ1表达(免疫组化,×400) 3讨论 肝硬化属于中医学“胁痛”、“积聚”、“臌胀”等病证范畴。中医学
8、认为本病多由酒食不节,损伤脾胃,脾失健运,壅阻气机,肝失条达,气血郁滞,或情志抑郁,肝失疏泄,气郁日久,血流不畅,瘀血停积,胁络痹阻所致。其病位在肝脾两脏,主要病机为肝郁脾虚、气滞血瘀。故当以疏肝健脾,行气活血,逐瘀消癥为主要治法。本课题组经多年临床观察,反复筛选香附、青皮、炙黄芪、炒白术、白芍、三棱、莪术、地鳖虫、郁金、姜黄、丹参等药物组成“柔肝消癥饮”。方中香附、青皮疏肝理气,炙黄芪、炒白术健脾益气,四药相合,共达抑肝扶脾之效。现代药理学研究表明,香附和青皮可减轻
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