缺氧诱导因子1α在实验性大鼠肾间质纤维化过程中的作用

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1、缺氧诱导因子1α在实验性大鼠肾间质纤维化过程中的作用：罗燕萍,李晶,芮金兵,何建强,王晓明【摘要】目的：观察单侧输尿管梗阻(ulilateralureteralobstruction，UUO)大鼠模型肾组织中缺氧诱导因子1α(HIF1α)的表达，探讨HIF1α表达水平与肾小管间质纤维化的关系。方法：40只雌性SD大鼠随机分为2组，假手术组，UUO组(每组20只)。制备UUO大鼠模型，术后第7天、第14天处死大鼠，肾组织行HE和Masson染色，免疫组织化学和实时荧光定量PCR(RTPCR)检测HIF1α，Ⅰ型胶原(colla

2、genⅠ,ColⅠ)及α平滑肌肌动蛋白(αsmoothmuscleactin,αSMA)在肾组织中的表达。结果：假手术组与UUO组各时间点肾小管间质纤维化评分比较，差异有统计学意义(P<0.01)。术后HIF1αmRNA水平随梗阻时间延长而递增。UUO组HIF1α蛋白表达量随着肾间质损害加重而增加，HIF1α蛋白主要分布在肾小管，其中以近曲小管表达最明显。HIF1α表达水平与肾小管间质纤维化评分，αSMA和ColⅠ的表达水平均存在正相关(R值分别为0.71，0.68，0.82，P均<0.05)。结论：HIF

3、1α在肾小管上皮细胞内高表达可能参与了肾间质纤维化发生和发展的过程。【关键词】缺氧诱导因子1α;肾间质纤维化;单侧输尿管梗阻　　[Abstract]Objective:Toinvestigatetheroleofhypoxiainduciblefactor1alpha(HIF1α)inrenaltubulointerstitiallesionsinducedbyunilateralureteralobstruction(UUO).Methods：Randomly,40femaleSDratsoperationgroupandUUO

4、group,eofthekidneystheexpressionsofrenaltubularinterstitialfibrosis,theexpressionsofmRNAsofHIF1α,αsmoothmuscleactin(αSMA)andcollagenⅠ(ColⅠ)munohistochemically.Results：paredgroup,thescoresofrenalinterstitialfibrosisinUUOratsRNAsincreasedeafteroperationinthekidneysinthe

5、UUOrats.AndtheproteinexpressionofHIF1αincreasedinthekidneysobtainedonthe14thdayafteroperation.ImmunohistochemicallyHIF1αmainlyexpressedinrenaltubularepithelialcells,especiallyinproximaltubularcells.TherenaltubulointerstitialexpressionofHIF1αayplayanimportantroleinmedi

6、atingtherenaltubulointerstitialfibrosis.　　[Keyyofibroblasttransition,EMT)在RIF的发生、发展中起着重要作用[1]。慢性缺氧是导致RIF主要因素之一，而缺氧对肾脏损害的作用主要是通过缺氧诱导因子1α(HIF1α)介导的[2]。HIF1α能够调节多种与RIF有关的细胞因子的表达，增加EMT。所以，HIF1α可能是促进RIF的关键因子[3,4]。　　已知HIF1α在IgA肾病、大部肾切除、慢性马兜铃酸肾病动物模型肾组织中异常表达，但在肾间质纤维化模型单侧输尿管

7、梗阻(ulilateralureteralobstruction,UUO)大鼠模型肾组织中的表达尚未见报道。本研究通过建立大鼠UUO模型，观察HIF1α在肾组织中的表达，探讨HIF1α与肾小管间质纤维化的关系。　　1材料与方法　　1.1药品与试剂　　小鼠抗大鼠HIF1α单克隆抗体，购自Novus公司(美国)，山羊抗大鼠Ⅰ型胶原(ColⅠ)多克隆抗体及小鼠抗大鼠α平滑肌肌动蛋白(αsmoothmuscleactin,αSMA)单克隆抗体购自SantaCruz公司(美国)，大鼠HIF1α，αSMA，ColⅠ，GAPDH引物由

8、上海生工合成。　　1.2动物分组　　选择清洁级SD雌性大鼠40只，8周龄，体质量190～210g(江苏大学实验动物中心提供)，按随机数字法分为2组，假手术组，UUO组，每组20只。①UUO组：制作大鼠UUO