慢性粒细胞白血病ph染色体和bcrabl mrna定量检测的临床意义

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1、慢性粒细胞白血病Ph染色体和bcrablmRNA定量检测的临床意义：吕晓东，范瑞华，胡杰英，徐本玲，张旭华，郭金东，宋云峰，宋永平【摘要】目的探讨Ph染色体和bcrablmRNA在慢性粒细胞白血病诊断、分期、治疗及微小残留病变监测中的意义。方法同时检测437份慢粒标本的Ph染色体和bcrablmRNA的表达情况。结果慢性期、加速期和急变期的bcrablmRNA定量结果逐渐增高(P<0.05);异基因造血干细胞移植后的bcrablmRNA定量结果随时间逐渐降低，一般在移植6月后转阴，服用格列卫与异基因造血干细胞移植病程相似，但融合基因转阴所用时间较长。结论实时定量PC

2、R技术检测bcrablmRNA较Ph染色体的检测更为敏感，对于疾病分期、评价疗效、监测微小残留病变以及预测疾病进展具有重要的临床应用价值。【关键词】慢性粒细胞白血病;实时定量PCR;Ph染色体;bcrabl　　ABSTRACT:ObjectiveToevaluatethesignificanceofPhchromosomeandbcrablmRNAexpressionsindiagnosis,stagingandtreatmentofchronicmyeloidleukemia(CML)asonitoringminimalresidualdisease.MethodsExpr

3、essionsofPhchromosomeandbcrablmRNAof437CMLpatientsetime.ResultsExpressionofbcrablmRNAgraduallyincreasedinblasticphase(BP),acceleratedphase(AP)andchronicphase(CP)(P<0.05).QuantificationofbcrablmRNAdecreasedgraduallyafterallotransplantationinthepatients,anditbecamenormalafter6monthstreatm

4、ent.HoRNAinimatinibmesylatetreatedpatientsdidnotbeenormaluntillongertimelater.ConclusionRTPCRquantitativedetectionofbcrablmRNAismoresensitivethandetectionofPhchromosome,andhasanimportantclinicalvalueinstagingCML,monitoringtreatmentoute,detectingtheminimalresidualdiseaseandpredictingdiseased

5、evelopment.　　KEYL)是一种起源于造血干细胞的血液系统恶性疾病，细胞遗传学特征是具有Ph染色体，即t(9;22)(q34;q11)，其分子水平上形成bcrablmRNA。染色体和融合基因的检测对CML的诊断、治疗及疗效评价有重要作用。我们对2006年12月～2009年8月门诊及住院437份慢粒患者标本的Ph染色体及bcrablmRNA结果进行分析，明确融合基因定量检测在慢粒诊治及微小残留病变监测过程中的作用。　　1材料与方法　　1.1研究对象2006年12月～2009年8月来自河南省肿瘤医院门诊及住院的291例CML患者的437份标本，同时进行Ph染色体和bcr

6、ablmRNA定量检测，其中男175例，女116例，中位年龄36(9～82)岁。其中223例仅做了1次，68例分别作了2～9次检测，19例异基因造血干细胞移植患者共检测78份标本，24例服用格列卫患者共检测94份标本。根据患者的临床表现、血象、骨髓象、Ph染色体、bcrablmRNA等结果参照文献[1]，确定慢性期CML198例，加速期69例，急变期24例。　　1.2方法　　1.2.1细胞遗传学分析全部病例均采用骨髓细胞直接法或外周血不加植物凝集素的短期培养法(24h)制备染色体标本，然后采用热处理姬姆萨R显带技术进行核型分析。核型异常的描述参照《人类细胞遗传学国际命名体制(IS

7、SN1995)》的有关规定。　　1.2.2bcrablmRNA定量检测RNA提取采取新鲜骨髓或血液标本经肝素或EDTA抗凝，用相对密度为1.077的淋巴细胞分层液分离单个核细胞。经TRIzol试剂(美国Invitrogen公司)提取总RNA。　　1.2.3仪器与试剂采用实时定量PCR方法检测bcrablmRNA。仪器为ABI7300荧光检测仪。试剂于上海申友生物技术有限责任公司生产的白血病融合基因bcrabl检测试剂盒(核酸扩增荧光定量法)，严格按试剂盒说明书操