乳腺癌组织中brms1mrna表达及意义

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1、乳腺癌组织中BRMS1mRNA表达及意义：张英兰，魏让，刘秀英，阎建文，王丽霞，石红梅【摘要】　　［目的］探讨BRMS1mRNA在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌临床病理特征的关系。［方法］采用Trizol提取组织总RNA，将mRNA转录成cDNA，用实时荧光定量聚合酶链反应（RFQ-PCR）技术检测乳腺组织BRMS1mRNA表达，以BRMS1mRNA和GAPDHmRNA含量的比值表示BRMS1表达水平。［结果］乳腺癌组织中BRMS1mRNA的表达水平明显低于癌旁组织（P＜0.01），也明显低于正常乳腺组织（P＜0.01），BRMR1mRNA低表达与临床病理分期和淋巴结转移有关（P＜0.05，

2、P＜0.01），而与患者年龄、癌肿大小、病理类型无关（P＞0.05）。［结论］乳腺癌组织中BRMS1mRNA的低表达与乳腺癌的发展与转移有关，可能成为判断乳腺癌转移的一个标志物。【关键词】乳腺肿瘤　BRMS1mRNA　实时荧光定量PCR　　ExpressionofBRMS1mRNAinBreastCarcinomaandItsClinicalSignificanceAbstract:［Purpose］ToinvestigateBRMS1geneexpressioninbreastcanceranditsclinicalsignificance.［Methods］TotalRNARNARN

3、AtoGAPDHmRNA.［Results］BRMS1expressionincancertissuealtissue（P＜0.01).BRMS1lophnodemetastases(P＜0.05,P＜0.01,respectively),butnotrelatedtoage,tumorsizeandpathologictype(P＞0.05).［Conclusion］BRMS1loetastasisofbreastcancer,itmightbeservedasamarkerforbreastcancermetastasis.Keys;BRMS1mRNA;RFQ-PCR乳腺癌是常见的恶

4、性肿瘤之一，容易发生转移，判断有无转移对临床治疗、判断预后有重要意义。乳腺癌转移抑制基因(breastcancermetastasissuppressor1，BRMS1）是新近发现的一个乳腺癌肿瘤转移抑制基因，定位于人染色体11q13.1~13.2[1]。将其转染到乳腺癌细胞株MDA?鄄MB?鄄435和MDA?鄄MB?鄄231中，可降低其转移潜能[2]。目前有关BRMS1基因的研究仍停留在体外研究水平上。我们采用实时荧光定量PCR技术对乳腺癌组织进行BRMS1mRNA检测，探讨乳腺癌转移的细胞特征及转移检测指标的应用价值。1材料与方法1.1一般资料2003年3月~2005年4月，我院收治

5、的乳腺癌患者51例，年龄31岁~62岁，平均年龄43.5岁，其中浸润性导管癌23例，单纯癌14例，腺癌4例，黏液腺癌2例，乳腺癌有淋巴结转移的35例，未转移16例；乳腺良性疾病25例，年龄26岁~55岁，平均39.2岁，其中纤维瘤18例，小叶增生病4例，导管内乳头状瘤3例。患者术前均未进行放疗及化疗。1.2标本收集对每例乳腺癌手术患者均取癌组织及癌旁组织，并取25例乳腺良性疾病病变组织周围的正常组织作为对照，取材后立即用锡纸包裹并标记好，放入液氮中保存备用。1.3定量测定BRMS1mRNA表达1.3.1主要仪器ABIPRISM7000荧光定量PCR分析仪（美国应用生物系统公司），核酸测定

6、仪：Biophotometer(Eppendorf公司)。1.3.2主要试剂TrizolRNA提取试剂盒，M?鄄MLVcDNA合成试剂盒，PCR反应试剂，RNase?鄄free试剂，以上试剂由上海生工提供，BRMS1及3?鄄磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）RT引物，荧光定量PCR引物，荧光探针及用来制作标准曲线的人工合成BRMS1及GAPDHcDNA均购自上海基康生物技术有限公司。1.3.3引物序列BRMS1上游引物：5＇?鄄GACCGCCAGAGCCTGGA?鄄3＇，下游引物：5＇?鄄CTGCCTCTGGCGTGCAGT?鄄3＇，荧光探针：5＇?鄄FAM?鄄CAGCTCTGAATGGTG

7、G?鄄MGB?鄄3＇。GAPDH上游引物：5＇?鄄CCATCAATGACCCCTTCATTG?鄄3＇，下游引物：5＇?鄄CATGGGTGGAATCATATTGGAAC?鄄3＇，荧光探针：5＇?鄄VIC?鄄CCTCAACTACATGGTTTAC?鄄MGB?鄄3＇。1.3.4实验步骤（1）RNA提取:Trizol法提取组织总RNA，核酸蛋白紫外分析仪检测RNA质量和浓度。（2）RT反应:用M?鄄MLVcDNA试剂盒进行RT反应，取总RN