急性脑梗死患者外周血单个核细胞toll样受体4的表达与临床的相关性

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1、急性脑梗死患者外周血单个核细胞Toll样受体4的表达与临床的相关性【摘要】目的:探讨急性脑梗死患者外周血单核细胞Toll样受体4(TLR4)的表达及其与患者的临床亚型及病情严重程度的相关性。方法:采用流式细胞仪分析技术和实时定量RTPCR技术分别测定66例急性脑梗死患者外周血单核细胞Toll样受体4的表达水平,于入院3d内病情稳定后对患者进行临床神经功能缺损程度评分,并按照OxfordmunityStrokeProject完成脑梗死患者的临床分型。结果:与健康对照组相比,急性脑梗死患者外周血单个核细胞(PBMC)中TLR4蛋白

2、表达的阳性率(66.87±16.27)%及表达量(即荧光强度,11.62±4.39)均显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。66例脑梗死按照OxfordmunityStrokeProject临床分型,分为TACI9例、PACI39例、POCI7例和LACI11例,PBMC中TLR4蛋白和mRNA的表达量在各组间的差异均无统计学意义;按神经功能缺损程度评分标准将66例患者分为轻型27例、中型30例和重型9例,各组PBMC中TLR4蛋白和mRNA的表达量差异有统计学意义(P<0.05)。PBMC中TLR4蛋白和mR

3、NA的表达量与病情的严重程度均呈正相关(P<0.05)。结论:外周血单核细胞Toll样受体4的表达增高与急脑梗死的发生和严重程度有密切关系,是脑梗死发病的一个危险因素。【关键词】Toll样受体4;急性脑梗死;脑梗死临床分型;神经功能缺损程度　　[Abstract]AIM:ToinvestigatetheexpressionofTolllikereceptor4(TLR4)inperipheralbloodmononuclearcells(PBMC)ofpatientsRNAandproteinofTLR4inPBMCof

4、66patientsinedbyrealtimequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction(RTPCR)andfloetry(FCM),respectively.ClinicalneurologicaldeficitscoreandOCSP(OxfordmunityStrokeProject)clinicalsubtypeedinthepatientsission.RESULTS:TheexpressionofTLR4inPBMCofpatientsalco

5、ntrols(P<0.01,respectively).66patientsRNAinthesegroupshavenostatisticsignificance.Meanildcases,30mediancases,and9severecasesaccordingtotheneurologicaldeficitscore.ThedifferencesintheexpressionlevelsofTLR4proteinandmRNAinthesegroupshavestatisticsignificance(P<0.

6、05).TheexpressionofTLR4proteinandmRNAaybeassociatedaybeariskfactorofacutecerebralinfarction.　　[Keyononuclearcells,PBMC)中的表达及其与患者临床亚型及病情严重程度的相关性进行研究,探索急性脑梗死患者体内炎症的调节机制。　　1对象和方法　　1.1对象2006-10/2009-02收集我院神经内科的急性脑梗死患者66例,其中男38例,女28例,年龄63.16±9.45岁。临床诊断标准参见1995年全国第4届脑血管病学术

7、会议制定的标准。排除既往有脑卒中、短暂性脑缺血发作、心肌梗死、糖尿病、甲状腺疾病、肝肾功能不全、自身免疫性疾病、使用激素或免疫抑制剂者、胃部疾病及巨幼细胞贫血病史者。入院3d内病情稳定后完成脑血栓形成患者临床神经功能缺损程度评分[6]和按OCSP(OxfordmunityStrokeProject)[7]完成脑梗死临床分型。对照组为同期体检证实的健康者,共60例,其中男36例,女24例,年龄(61.08±11.26)岁。　　1.2方法　　1.2.1标本采集及处理取禁食12h以上、清晨空腹肘静脉血5mL,以EDTA二钾盐抗凝。0.

8、4mL用于流式细胞仪检测,其余样品250g/min离心5min,吸出血浆,加入与血浆等体积的生理盐水,旋涡器上混匀,以Ficoll分层液(为中国医学科学研究院血液学研究所产品)分离收获单个核细胞,加入RNAlater200μL,打散细胞沉淀,4℃保存2～3h,转