肿节风浸膏对氧自由基作用的研究

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1、肿节风浸膏对氧自由基作用的研究作者：秦俭，王仁生，滕家安，陈健，黄仁彬【摘要】　　目的研究肿节风浸膏对羟自由基（HO·）和超氧阴离子自由基（O2·－）的作用。方法采用邻二氮菲-Fe2＋氧化法检测不同浓度肿节风浸膏水溶液对H202/Fe2＋体系产生的HO·的清除作用；邻苯三酚自氧化法测定肿节风浸膏溶液对O2·－的作用。结果肿节风浸膏溶液浓度分别为0.2，0.4，0.6，1.2mg·ml-1时的HO·清除率分别为0.89%，17.52%，49.35%，89.89%，组间有量效关系；肿节风浸膏溶液浓度为0.01m

2、g·ml-1时对O2·－抑制率为-76.84%。结论肿节风浸膏溶液在体外有显著清除HO·的作用，促进O2·－生成。【关键词】肿节风浸膏羟自由基超氧阴离子自由基　　Abstract:ObjectiveTostudytheeffectofSarcandraglabraextractsonsuperoxideanionfreeradical(O2·－)andhydroxyfreeradical(HO·)．MethodsSpectrophotometry(and510nm)g·ml-1invitro,thegene

3、rationofO2·－g·ml-1invitro,thelevelofHO·anDU640紫外分光光度计，722型分光光度计，pH数字显示酸度计.　　2方法　　2.1样品制备取肿节风干浸膏（0.091g浸膏/g生药）2g，用单蒸水40ml稀释成浓度为50mg/ml的肿节风浸膏溶液。　　2.2羟自由基（HO·）的生成及清除率的测定按参考　　结果　　3.1对HO·的作用在本实验条件下，由A510nm的测定值观察肿节风浸膏溶液对HO·的清除作用。结果显示肿节风浸膏溶液对其具有显著的清除作用（结果见表1及图1），

4、并随浓度的增加清除作用增强，相关系数r=0.9855。表1肿节风浸膏溶液对HO·的作用组别浓度C/mg·ml-1A510nmHO·清除率S（略）　　3.2对O2·－生成的作用用动态方法测得反应的初速率V0（A·min-1）。本实验直线回归方程分别拟合如下：对照组y=0.1317x-0.015，肿节风组y=0.233x+0.041。其回归相关系数对照组在0.9993～0.9999之间，肿节风组在0.9891～0.9997之间。加入肿节风浸膏溶液后，其斜率明显大于对照组，即O2·－生成速率V0显著上升（结果见表

5、2及图2），差别有统计学意义（P＜0.05）。表明肿节风浸膏溶液能促进O2·－的生成。表2肿节风浸膏溶液对O2·－生成的作用（略）　　4讨论　　OFR是生物体在物理和化学的作用下产生或衍生出来，包括HO·，O2·－，单线态氧(1O2)等。在正常情况下，由于体内存在自由基清除剂，体内OFR的产生与清除保持相对平衡，并参与许多正常的生理生化反应。若自由基清除剂的合成恶性化或自由基反应发生紊乱，则可引起机体一系列病理生理改变［5］，导致某些疾病的发生与发展。一方面OFR能够调节花生四烯酸的代谢，刺激吞噬细胞和中性

6、粒细胞的吞噬杀菌功能和免疫过程，有利于机体健康；另一方面，OFR可使许多生物大分子如核酸、蛋白、膜多不饱和脂肪酸发生超氧化反应，使生物大分子出现交联或断裂，引起细胞结构和功能的破坏［6，7］。目前已证实机体多个系统的多种疾病的发生、发展都与氧自由基有关［8］。放射治疗时，辐射的生物效应在很大程度上是间接通过辐射对水的作用形成HO·，O2·－等OFR，通过物理－化学－生物这样一个复杂的连锁反应而最终导致放射损伤［9］。　　肿节风是一种活血化淤、清热凉血、祛风通络的中药，也有一定的抗肿瘤作用。其成分复杂，含有挥

7、发油、黄酮、香豆精、有机酸等。临床上常被用于炎症性疾病的治疗。有学者［10～12］应用肿节风注射液治疗急性乳腺炎、小儿支气管肺炎、老年慢性支气管炎急性发作期，均有较好疗效，且未见明显毒副作用。表明肿节风注射液有明显的抗炎作用。Fenton反应是生物体内产生HO·的重要机制，本研究即模拟机体在体外采用H2O2/Fe2＋体系通过Fenton反应产生HO·来检测肿节风浸膏溶液清除HO·的能力。结果是肿节风浸膏溶液在体外有明显清除HO·的作用，并随剂量的增加清除作用增强。这样就提示肿节风浸膏溶液在体内对HO·可能也

8、会有显著的清除作用。剂量组分别为0.2，0.4，0.6，1.2mg·ml-1时的HO·清除率分别为0.89%，17.52%，49.35%，89.89%，并存在明显的量效关系。0.2mg·ml-1剂量组与对照（损）比较无显著性差异（P<0.05），可能是因为药物剂量低于0.2mg·ml-1不能有效清除HO·。肿节风浸膏溶液对HO·高效的清除作用是否为其抗炎的主要机制之一，目前还有待进一步证实。刘兆乾等［13］