紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化的实验研究

紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化的实验研究

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1、紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化的实验研究作者:陈眷华谭健民徐在品陈超霍欣邓小燕张迪简秀华【摘要】目的探讨紫苏叶提取物(FPE)对由高脂高胆固醇引起家兔动脉粥样化的影响。方法采用高脂高胆固醇饲喂法建立家兔动脉粥样硬化模型,分别测定正常对照组、高脂模型组、紫苏叶提取物低剂量组(0.17g·kg-1)、中剂量组(0.5g·kg-1)、高剂量组(1.5g·kg-1)血清中TC,TG,LDL-C,HDL-C,MDA含量及SOD的活性,大体染色计算脂肪斑块面积比(PA),组织切片观察主动脉内膜增生(IH)。结果FPE组均能明显降低血清中TC,TG,LD

2、L-C,MDA的含量(P<0.01),并能升高血清中HDL-C的含量(P<0.01)和SOD的活性(P<0.05),FPE干预组PA值下降明显,FPE中剂量组、高剂量组与高脂模型组比较具有统计意义[分别为(21.52±7.58)%,P<0.05;(15.82±3.64)%,P<0.01;(53.59±29.31)%]。病理切片显示,各用药组主动脉IH程度均小于高脂模型组,其中高剂量用药组AS程度最小。结论紫苏叶提取物具有抗高脂饮食诱导家兔动脉粥样硬化的作用,其作用机制可能与其调节血脂与抗脂质过氧化有关。【关键词

3、】动脉粥样硬化紫苏叶提取物血脂脂质过氧化家兔动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是以动脉内皮细胞功能障碍、脂质沉积、炎症反应、平滑肌细胞迁移与增殖为主的病理改变,是导致心脑血管疾病的直接原因[1]。现代药理研究表明,紫苏叶的主要成分迷迭香酸及黄酮类化合物具有抗氧化、清除自由基及改善血液流变学等作用[2,3]。已有的实验研究结果表明紫苏叶具有抗动脉粥样硬化的药理基础,但目前有关其抗AS的实验研究还未见报道。本实验从紫苏药理理论出发,研究紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化作用,为拓展紫苏的临床应用提供实验参考。1材料与仪器1.1药物

4、紫苏叶提取物(FPE):紫苏叶购于贵阳市中药公司,由贵州大学动物科学学院基础兽医学实验室制备,药物浓度为每毫升含原生药1g。1.2动物体重1.8~2.0kg新西兰大白兔30只,雄性,由贵阳医学院实验动物中心提供。1.3饲料为机制颗粒饲料。基础饲料配方:玉米35%,小麦25%,麦麸35%,鱼粉2%,骨粉2%,盐1%;高脂饲料配方∶1.5%胆固醇+10%炼制猪油+88.5%基础饲料。1.4仪器与试剂旋片式真空泵(浙江黄岩求精真空泵厂);RE-52旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂);TDl-5A离心机(上海菲恰尔分析仪器有限公司);旋转式切片机(德

5、国,LEiCARm2125);光学显微镜(日本,OLYMPUSCX31);722光栅分光光度计(上海精密科学仪器有限公司);胆固醇(上海山浦化工有限公司,化学纯);甘油三酯测定试剂盒、总胆固醇测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒均购自南京建成生物制品研究所。2方法2.1紫苏叶提取物的制备取干紫苏叶,适度粉碎后过20目筛备用,称取样品100g,按固液比为1∶15加入新鲜蒸馏水,煎煮至沸腾后,再继续煎煮15min,趁热4层纱布过滤,滤渣按固液比为1∶12加入新鲜蒸馏水重提1次,过滤,合并两次滤液,用文火将滤液浓

6、缩至300ml,待浓缩液冷却后,加入3倍量95%乙醇于4℃下放置12h,沉淀后以3000r·min-1离心3min,取上清液进行抽滤,滤液旋转蒸发浓缩至无乙醇味为止,最后定容至100ml,即每毫升提取液含原生药1g。2.2动物分组与给药实验分别设正常对照组、高脂模型组、FPE低剂组(紫苏Ⅰ组)、FPE中剂量组(紫苏Ⅱ组)、FPE高剂量组(紫苏Ⅲ组)(药物剂量分别为0.17,0.5,1.5g·kg-1)。实验动物用基础饲料适应性饲养7d,然后随机分为5组,每组6只。正常对照组饲喂基础饲料,高脂模型组饲喂高脂饲料,用药组饲喂高脂饲料并灌胃FPE

7、相应剂量的药物,同时模型组与正常对照组均灌胃等量蒸馏水。灌胃量为每只兔子3ml·d-1,共8周。2.3观察指标分别于实验前1天、第4周末和第8周末,清晨空腹行耳中动脉采血3.5~4.0ml,分离血清,按各检测试剂盒的操作方法,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、丙二醛(MDA)的浓度及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。2.4主动脉组织学观察动物于第8周末颈动脉放血处死,完整取出胸主动脉于10%福尔马林中固定12h。按刘氏等方法[4]计算脂质斑块面积百分比(percenta

8、geofplaquescoveringaorticintima,PA):PA=脂质斑块面积/胸主动脉总面积×100%,比较各组PA的差异。同时取近心端5mm处主动脉,常规制作石蜡

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