紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化的实验研究论文

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1、紫苏叶提取物抗家兔动脉粥样硬化的实验研究论文陈眷华谭健民徐在品陈超霍欣邓小燕张迪简秀华【摘要】目的探讨紫苏叶提取物(FPE)对由高脂高胆固醇引起家兔动脉粥样化的影响。方法采用高脂高胆固醇饲喂法建立家兔动脉粥样硬化模型，分别测定正常对照组、高脂模型组、紫苏叶提取物低剂量组（0.17g·kg-1）、中剂量组（0.5g·kg-1）、高剂量组（1.5g·kg-1）血清中TC，TG，LDL-C，HDL-C，MDA含量及SOD的活性，大体染色计算脂肪斑块面积比（PA），组织切片观察主动脉内膜增生(IH)。结

2、果FPE组均能明显降低血清中TC.freel2125）；光学显微镜（日本，OLYMPUSCX31）；722光栅分光光度计(上海精密科学仪器有限公司)；胆固醇（上海山浦化工有限公司，化学纯）；甘油三酯测定试剂盒、总胆固醇测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒、低密度脂蛋白胆固醇测定试剂盒均购自南京建成生物制品研究所。2方法2.1紫苏叶提取物的制备取干紫苏叶，适度粉碎后过20目筛备用，称取样品100g，按固液比为1∶15加入新鲜蒸馏水，煎煮至沸腾后，再继续煎煮15min，趁热4层纱布过滤，滤渣按固

3、液比为1∶12加入新鲜蒸馏水重提1次，过滤，合并两次滤液，用文火将滤液浓缩至300ml，待浓缩液冷却后，加入3倍量95%乙醇于4℃下放置12h，沉淀后以3000r·min-1离心3min，取上清液进行抽滤，滤液旋转蒸发浓缩至无乙醇味为止，最后定容至100ml，即每毫升提取液含原生药1g。2.2动物分组与给药实验分别设正常对照组、高脂模型组、FPE低剂组（紫苏Ⅰ组）、FPE中剂量组（紫苏Ⅱ组）、FPE高剂量组（紫苏Ⅲ组）（药物剂量分别为0.17，0.5，1.5g·kg-1）。实验动物用基础饲料适应

4、性饲养7d，然后随机分为5组，每组6只。正常对照组饲喂基础饲料，高脂模型组饲喂高脂饲料，用药组饲喂高脂饲料并灌胃FPE相应剂量的药物，同时模型组与正常对照组均灌胃等量蒸馏水。灌胃量为每只兔子3ml·d-1，共8周。2.3观察指标分别于实验前1天、第4周末和第8周末，清晨空腹行耳中动脉采血3.5～4.0ml，分离血清，按各检测试剂盒的操作方法，测定总胆固醇(TC)、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C)、丙二醛（MDA）的浓度及超氧化物歧化酶（SOD）

5、的活性。2.4主动脉组织学观察动物于第8周末颈动脉放血处死，完整取出胸主动脉于10%福尔马林中固定12h。按刘氏等方法［4］计算脂质斑块面积百分比（percentageofplaquescoveringaorticintima,PA）：PA=脂质斑块面积/胸主动脉总面积×100%，比较各组PA的差异。同时取近心端5mm处主动脉，常规制作石蜡切片，行苏木素-伊红（HE）染色，比较光镜下血管内膜增生程度。2.5统计学分析实验结果采用±s表示，SPSS10.0(ONE-DA的含量均低于高脂模型组，但无

6、显著性差异，第8周末中剂量组与高剂量组明显低于高脂模型组，并且表现出差异极显著（P0.01）；用药组在实验第4周末，其中高剂量组血清中SOD的活性明显高于模型组（P0.01），第8周末，中剂量组与高剂量组与高脂模型组比较有显著性差异（P0.05）。结果见表5～6。表5FPE对血清中丙二醛（MDA）含量的影响表6FPE对血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响与正常对照组比较，▲P0.05，▲▲P0.01；与高脂模型组比较，#P0.05，##P0.01；n=63.3胸主动脉AS病理观察结果胸主动脉

7、脂质斑块经苏丹Ⅳ染色显示，空白对照组家兔胸主动脉内表面光滑，未见脂质斑块。高脂模型组、FPE3个剂量组胸主动脉内膜均见不同程度的红色斑块，呈点、斑、条状，有些融合成片,表面粗糙不平，突出于内膜表面，病变以主动脉弓处最为严重。其中高脂模型组病变最为严重，胸主动脉内膜面几乎全为融合的脂质斑块所覆盖。FPEⅠ组病变程度与高脂模型组相仿，FPEⅢ组病变最轻仅在主动脉根部有散在的点状病灶及融合为一小面积斑块，FPEⅡ组病变程度介于FPEⅢ和FPEⅠ组之间，见图1。PA经统计分析显示，FPEⅢ组PA值（15

8、.82±3.64）%，FPEⅡPA（21.52±7.58）%，FPEⅠ组PA（39.57±13.06）%，高脂模型组PA（53.59±29.31）%，用药组PA明显低于模型组，并且FPEⅢ组和FPEⅡ具有统计学意义（P0.05或P0.01）。见表7。PA=脂质斑块面积/主动脉面积×100%HE染色显示，空白对照组血管内膜光滑，无粥样硬化斑块突出，内膜、中膜、外膜三层结构清楚。高脂模型组血管可见明显粥样硬化斑块突出于整个内膜，纤维帽下可见大量的泡沫细胞，斑块根部可见细胞碎片，大量的巨噬细胞和梭形细