不同频率电磁场对胆囊癌细胞增殖及dna损伤作用

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1、不同频率电磁场对胆囊癌细胞增殖及DNA损伤作用摘要：目的探讨不同频率的低功率电磁场对胆囊癌细胞恶性增殖及DNA损伤的作用及其意义。方法采用绘制细胞生长曲线及单细胞凝胶电泳技术分别检测竟不同频率电磁场作用后，胆囊癌细胞的增殖及DNA损伤情况。结果经不同频率（0.1～40MHZ）电磁场作用后，各实验组总体上均可见细胞增殖受到抑制，DNA链产生断裂损伤，统计学检验较正常对照有显著意义。结论0.1～40MHZ范围低功率电磁场对胆囊癌细胞增殖及DNA损伤产生明显影响，主要表现为使DNA链产生断裂损伤，进一步抑制细胞增殖，且这种作用和频率有关

2、，但并不是“线性”关系。关键词：频率；电磁场；单细胞凝胶电泳；细胞培养；胆囊肿瘤；DNA损伤Abstract:ObjectiveTostudytheeffectsofloagicfieldsofdifferentfrequenciesonproliferationandDNAdamageofgallbladdercancercells.MethodsCellgroedtoevaluatetheproliferationandDNAdamageofgallbladdercancercellsrespectivelyafterthec

3、ellsagicfieldsofdifferentfrequencies.ResultsAfterexposuretoloagicfieldsofdifferentfrequencies(0.1-40MHz),thecellsdisplayedsignificantchangesagicfieldsayimpairtheDNAstrandandcauseinhibitionofproliferationofthegallbladdercancercells,andtheseeffectsarerelatedtothefrequen

4、cyoftheelectromagicfieldsbutnotinalinearfashion.Keyagicfield;singlecellgelelectrophoresis;cellculture;gallbladdercancer;DNAdamage电磁场可分为长波、中波、短波、射频、微波、极低频率电磁场。在一定范围内，微波对较小极性分子作用明显，而波长较长的射频电磁场则对极性大分子有较强影响。电磁场的生物学作用，由于其生物物理机制尚未清楚，因此，它对生物体产生何种影响仍有争议。但就其作用的环节，主要是通过改变细胞内诸如分

5、子三维结构、蛋白质的表达、RNA分子或DNA分子等。其中，细胞DNA的损伤是影响细胞增殖等生物学行为的基础，具有重要的生物学意义[1]。本研究通过绘制细胞生长曲线、单细胞凝胶电泳检测低功率（2mI1640培养基中。取指数增生期细胞经0.25%胰酶消化后，制成细胞悬液，置于连续可调射频发射仪（上海凇航公司提供），按不同频率（0.1、1、20、40MHZ）分组，作用2h，电磁场功率均低于2mSO在用时加入），于40C裂解1.5h；将载玻片置于水平电泳槽中，电泳槽内装满新配制的电泳缓冲液（1mmol/LNa2EDTA、300mmol/L

6、NaOH,pH>13），在电泳缓冲液中保留30min，以促使DNA解旋和表达不耐碱位点；放在40C冰箱；于20V、200mA（通过调整液面高低面获得）下电泳50min；放在40C冰箱；用0.4mol/L的Tris-Hcl(PH7.5)洗3次，每次5min；每张片子用20ug/mlEB染液100ul染色2～5min；观察测量并计数；1.4统计学处理实验数据以±s表示，样本均数进行方差分析。2结果2.1细胞生长曲线胆囊癌细胞经不同磁场电磁场处理后的生长曲线（图1）提示：不同频率电磁场作用后第2、3天，处理组细胞的生长显著低于对照

7、组细胞（P<0.05），且5组之间只有0.1MHZ组和1MHZ组无统计学差异(P>0.05)，其余各组间均有统计学差异（P<0.05）；第4天0.1MHZ组细胞增殖较快，但与对照组之间无统计学差异(P>0.05)，其余各组之间均有统计学差异（P<0.05）；第5天对照组细胞增殖较快，5组之间均有统计学差异，其细胞数顺序依次为：对照组>0.1MHZ>20MHZ>40MHZ>1MHZ。可见经过电磁场处理后，细胞增殖明显降低。电磁场对细胞增殖有明显的抑制作用，但从生长曲线图中可见磁场

8、对细胞增殖的抑制作用并不和磁场成正比，5组中以1MHZ组作用最为明显。2.2不同频率电磁场对胆囊癌细胞DNA迁移效应的影响2.2.1SCGE图像胆襄癌细胞经不同频率电磁场作用后，经SCGE和DNA染色，在荧光显微镜下观察，对照组细胞核DNA呈光滑圆