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时间:2018-05-05
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1、玉竹对缺氧模型小鼠抗缺氧作用的实验研究作者:朱欣佚,王长松,谢建军【摘要】目的:研究玉竹对缺氧模型小鼠的抗缺氧作用,并探讨其作用机制。方法:通过常压耐缺氧实验、亚硝酸钠中毒存活实验、急性脑缺血性缺氧实验,观察小鼠给予玉竹浓缩液灌服4周后对缺氧的耐受能力,并对心、脑组织中MDA、GST、SOD进行测定。结果:与对照组比较,玉竹可延长小鼠在常压缺氧、亚硝酸钠中毒实验的存活时间,延长急性脑缺血性缺氧实验中断头小鼠的喘气时间,升高血清中SOD的水平,降低MDA的含量,作用效应与玉竹浓度存在计量依从关系。结论:玉竹对缺氧模型小鼠具有抗缺氧作用,与提高小鼠的抗氧能力有关。【关键词】玉竹;小鼠
2、;缺氧模型;抗缺氧作用;实验研究 玉竹Polygonatumodoratum(MilI.)Druce(PO)为百合科黄精属植物,又名葳蕤、女萎,味甘平,性微寒,具有滋阴润燥,养胃生津之功。现代药理学研究发现,玉竹中含有甾体皂甙、黄酮、多糖、生物碱、强心甙等多种成分[1]。玉竹有增强机体免疫力、降血糖、降血脂、抗动脉硬化、抗肿瘤等作用[2-3]。本文选择了几种缺氧模型,给予玉竹水煎浓缩液灌服4周后,观察小鼠对缺氧的耐受能力的变化并探讨其作用机制。 1材料与方法 1.1药品与试剂玉竹饮片购自江苏省药材公司,产地河南。经本院药剂科鉴定为百合科黄精属植物玉竹;取玉竹加适量水煮沸1h
3、,重复煎煮3次,滤液合并后浓缩成每1ml相当于0.5g生药的液体,将浓缩液置4℃冰箱备用;亚硝酸钠,上海裕阳化工有限公司生产;钠石灰,洛阳昊华化学试剂有限公司生产,均为AR级;MAD、SOD、GSH-Px检测试剂盒均购自南京建成生物研究所。 1.2实验动物与器材昆明种小鼠,体重18~22g,雌雄各半,由东南大学医学实验动物中心提供;RE52-98旋转蒸发器;JA2003电子天平;250ml磨口瓶;秒表;剪刀等。 1.3方法 1.3.1小鼠常压耐缺氧实验取昆明种小鼠50只,雌雄各半,随机分成正常对照组、玉竹高、中、低剂量组、维生素C组,每组10只。玉竹高、中、低剂量组分别按玉
4、竹浓缩液5、2.5、1g.kg(20ml.kg)灌胃给药,维生素C组按0.05g.kg灌胃,正常对照组则给予同等容积生理盐水,每日1次,连续30d。末次灌胃后1h,将各组小鼠分别放入盛有5g钠石灰的250ml磨口瓶内(用前均盛水校正容量,每瓶放1只小鼠),加盖密封,立即计时,以呼吸停止为指标,记录小鼠的存活时间及存活时间延长率。延长率=(实验组存活时间-对照组存活时间)÷对照组存活时间×100%。 1.3.2亚硝酸钠中毒存活实验取昆明种小鼠50只,按1.3.1所示方法进行分组及灌胃给药,连续30d。末次灌胃后1h,各组小鼠均按230mg.kg剂量一次性腹腔注射亚硝酸钠水溶液(注
5、射量为0.1ml.10g),立即计时,以呼吸停止为指标,记录小鼠存活时间及存活时间延长率。 1.3.3急性脑缺血性缺氧实验及心、脑组织中MDA、SOD、GSH-Px的检测取明种小鼠50只,按1.3.1方法进行分组及灌胃给药,连续30d。末次灌胃后1h,各组小鼠用锋利剪刀自双耳根后颈部逐只断头,立即按秒表记录每只小鼠断头后张口喘气的持续时间及延长率;同时助手迅速取肝和脑组织,制成10%的生理盐水匀浆液,用于检测组织中MDA、SOD、GSH-Px的含量,检测方法分别为TBA比色法、黄嘌呤氧化酶法和DTNB直接法。蛋白定量采用考马司亮兰法。 1.4统计学分析及结果判定计量指标以均数
6、±标准差表示(ˉx±s),组间比较用F检验,应用SPSS11.0统计软件做数据处理分析。P<0.05有显著性差异,P<0.01表示差异有极显著性。 2结果 2.1对小鼠常压耐缺氧实验中存活时间的影响见表1。 表1各组小鼠常压缺氧状态下存活时间比较(略) 注:与正常对照组相比*P<0.05**P<0.01 2.2对亚硝酸钠中毒小鼠存活时间的影响见表2。 表2各组小鼠在亚硝酸钠中毒时存活时间比较(略) 注:与正常对照组相比*P<0.05**P<0.01 2.3对急性脑缺血性缺氧实验断头小鼠张口喘气持续时间的影响见表3。 表3各组小
7、鼠在断头后张口喘气时间比较(略) 注:与正常对照组相比*P<0.05**P<0.01 2.4对小鼠心脏和脑组织中MDA、SDO、GSH-Px含量的影响见表4。 表4各组小鼠心脏和脑组织中MDA、SOD、GSH-Px含量的比较(略) 注:与正常对照组相比*P<0.05**P<0.01 3讨论 缺氧(hypoxia)是指组织得不到充足的氧,或不能充分利用氧时,组织的代谢、机能、甚至形态结构都可能发生异常变化的病理过程。轻度缺氧主要引起机体代偿性
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