液基薄片技术在胸腹水诊断中的应用

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1、液基薄片技术在胸腹水诊断中的应用作者:韩旭东柳杨王西霞陈晓艳【摘要】  目的:研究液基薄片技术应用于胸腹水细胞学诊断的价值。方法:同一标本应用传统制片(CP)和液基薄片技术制作涂片,常规染色,并在显微镜下做比较。结果:诊断结果薄片阳性率、阴性率均高于传统制片,可疑、不满意涂片均低于传统制片,但只有不满意标本薄片与CP存在显著性差异;CP和薄片形态特征对比,薄片各方面质量均好于CP,且阅片时间明显缩短。结论:薄片和CP在检出率没有明显的区别,应用薄片技术制片质量提高,利于提高诊断的准确性。应用薄片技术阅片时间减少,提高工作效率,减轻了劳动强度

2、,且可以重复制片,作特殊染色及免疫细胞化学等工作。其特点:成本较高,制片劳动强度稍大,时间较长。【关键词】液基薄片技术细胞学诊断恶性肿瘤  胸腹水是许多癌症患者的常见并发症,其细胞学检查对疾病的诊断有重要的意义。多年来,查找癌细胞主要应用传统制片方法,该方法存在着一些不利因素可能影响诊断,如背景不清晰、大量红细胞、炎性、渗出物及粘液,细胞涂片厚、面积过大、敏感性低等[1]。薄层细胞检测(Thin-layercytologytest)即液基薄片技术,是20世纪90年代发展起来的一项制片新技术,最初用于妇科宫颈细胞学,与传统涂片(CP)诊断相比

3、,制出的玻片细胞结核清晰,背景明朗,不仅具有高度一致性,而且提高了上皮内病变的检出率[2~5],其成果是显著的。但这项技术在非妇科方面(包括胸腹水细胞学诊断)的应用,在国内报道较少。我们在本院胸腹水细胞学诊断应用液基薄片技术,并与CP做一比较,探讨其应用价值。  1材料与方法  1.1材料  我院病理科2006年11月至2007年4月收集的胸腹水标本141份,每份均制备传统和薄片两种涂片,其中包括胸水78份,腹水63份。  1.2方法  每份标本取液体40ml,平均分成2份离15min,2400r/min,弃去上清液。其中1份用来做CP两张

4、,将另1份应用LPT方法制备薄片。LPT方法制片方法如下:分别加入3~4ml保存液,振荡器混匀倒入15ml离心管,振荡器充分混匀,离15min,2400r/min,弃去上清液,倒置试管吸干水分,加入细胞团2倍的细胞基液(如无细胞团加基液50μl),振荡器充分混匀,取50μl涂片、烘干,每例制薄片1张,必要时可重复。  两种涂片均在95%乙醇固定15min后HE染色,显微镜下观察,细胞分恶性组、可疑肿瘤组和良性组,恶性组包括腺癌细胞、鳞腺癌细胞、癌细胞及各种肿瘤细胞;可疑肿瘤组包括可疑癌细胞、又非典型的细胞。良性组包括不典型细胞、间皮细胞以及

5、鳞状细胞。另有1组不满意标本即仅见红细胞或未见细胞。  1.3统计学处理  采用SPSS10.0统计软件进行统计学分析,组间差异采用卡方检验,以P<0.05为有显著性差异,P<0.01为高度显著性差异。  2结果  2.1CP和薄片诊断结果比较  2.1.1在CP诊断结果中,恶性组31例(22.0%),可疑肿瘤组21例(14.9%),良性组80例(56.7%),不满意标本9例(6.4%)。  2.1.2在薄片诊断结果中,恶性组39例(27.7%),可疑肿瘤组15例(10.6%),良性组86例(61.0%),不满意标本1例(0.7%)。  2

6、.1.3恶性组中薄片比CP多8例,可疑肿瘤组中薄片比CP少6例,良性组中薄片比CP多6例,不满意标本薄片比CP少8例。经统计学处理,不满意标本薄片与CP存在显著性差异,其余结果无显著性差异。 2.2CP和薄片形态特征对比  2.2.1薄层涂片背景中红细胞、炎细胞和细胞碎片较少,细胞分布均匀,重叠现象较少,细胞形态保存完好,且片段也保存完好,不满意标本涂片数量少。在细胞形态上,与CP涂片相比:细胞小且无退变现象。良性细胞呈一致性,细胞核呈圆形、椭圆形,核膜清晰且光滑,染色质匀细,着色浅,可见细小的核仁。恶性细胞,细胞大小不一,核质比增大,细胞

7、核形态多样,其核膜凹凸不平,核膜厚,染色质粗,集结呈粗粒状团块状,并见明显的核仁。细胞质在两种涂片未见明显区别。  2.2.2两者均应用HE染色,液基薄片比CP涂片易着色。  2.2.3阅片时间上,因为CP每例均涂两张涂片,1例阴性涂片阅完约需4~5min,1例阳性涂片阅完约需5~7min。液基薄片因为细胞被集中在2cm大小的范围内,1例阴性涂片约需1~2min,1例阳性涂片约需3~5min。  3讨论  薄层细胞检测是90年代发展起来的一项制片新技术,已成功地应用于妇科细胞学,在非妇科方面的应用国内报道较少。我们在应用这一技术于本院胸腹水

8、细胞学诊断,并与CP做了比较。  在检出率方面恶性组中薄片比CP高5.7%,可疑肿瘤组中薄片比CP低4.3%,良性组中薄片比CP低4.7%,但无统计学意义。故可以认为薄片和CP在

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