通脉口服液抗肾小管间质纤维化作用研究

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1、通脉口服液抗肾小管间质纤维化作用研究作者:薛兴阳1,孟江2,卢国勇2,廖华卫2,黄曦【摘要】目的优选姜炭止血作用的有效部位。选取健康小鼠,给予姜炭不同极性部位的混悬液,用玻片法测凝血时间,筛选出有效部位,研究有效部位不同剂量对小鼠凝血时间的影响。结果与正常对照组比较,姜炭乙酸乙酯部位和水部位的高剂量组分别缩短小鼠凝血时间30.82%和28.46%,均与阳性对照药三七相当。石油醚和正丁醇部位对小鼠的凝血时间没有影响。结论姜炭乙酸乙酯部位、水部位的高剂量有较好的止血作用,为姜炭止血的有效部位。【关键

2、词】姜炭;止血;有效部位  China;2.GuangdongPharmaceuticalCollege,Guangzhou,Guangdong510006,China)Abstract:ObjectiveStudytheactivehemostaticponentsofbakedgingerinmice.MethodsThemiceinisteredethodostaticponentsofbakedgingerinmice.ResultSuspensionsofbakedgingerextr

3、actedeby30.82%and28.46%athighdosesrespectively.Theeffectsilartothoseofsuspensionofnotoginsengpoonstratedhemostaticeffects.  Keyostatic;theeffectiveponents  中药炭药在我国已有2000多年的历史,是一种用途较广、疗效确切的中药炮制品。中医有“血见黑止,红见黑止”的传统炭药止血理论。姜炭味苦、涩,性温。归脾、肝经,用于血痢、血崩、产后腹痛、吐血、

4、疟疾,长于止血温经[1]。姜炭在临床应用广泛,但关于姜炭的研究比较少,仅有研究报道姜炭能显著地缩短小鼠的凝血时间[2-3],姜炭醚提物、水煎液、混悬液有明显缩短小鼠凝血时间的倾向[4]。但关于姜炭止血的作用部位和化学成分没有进行系统的研究。本文拟通过药理实验对姜炭石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取部位进行初步筛选,寻找其止血作用的部位,为进一步研究其有效止血成分及止血机理奠定基础。  1实验仪器与材料  1.1实验动物  健康NIH小鼠130只,SPF级,雌雄各半,体质量(20±2)g。由广东省医

5、学实验动物中心提供(合格证号:2007A004),许可证号:SCXK(粤)2008-0002。  1.2药材与试剂  1.2.1药材  干姜购于广州致信中药饮片有限公司,批号090901,经鉴定为姜科植物ZingiberofficinaleRosc.的干燥根茎。姜炭:取干姜片,按《中国药典》2010年版一部附录Ⅱ(D)姜炭项下经炒炭法炒至表面焦黑色,内部棕褐色,通体鼓起为度,取出,灭尽火星,放凉即得[1]。  三七购于鹤山市广增中药饮片有限公司,批号080101,经鉴定为五加科植物三七Panax

6、notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根。  1.2.2试剂  石油醚、乙酸乙酯、正丁醇均为分析纯(天津市富宇精细化工有限公司);水为纯水。  1.3仪器  AY120托盘点子天平(日本岛津);实验室用超纯水机;机械秒表(上海星钻秒表有限公司);TC恒温电热套(海宁市华星仪器厂)。  2方法与结果  2.1供试药品的制备  三七粉混悬液的制备:三七适当粉碎过80目筛后称取10g,加50mL水配成0.2g/mL混悬液,冰箱贮存备用。  姜炭不同提取部位溶液的制备:姜炭适当研磨

7、粉碎后精密称取25g,依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水各200mL溶剂,按极性由小到大的次序回流提取60min,每次提取完后药渣晾干再用下一个溶剂提取,各部位提取物低温减压回收溶剂,浓缩至浸膏状,分别用0.8%吐温80溶液50mL配成0.5g/mL姜炭(石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水)的混悬储备液,冰箱贮存备用。  剂量转换:《中国药典》规定干姜用量3~10g,人按60kg计算,选择剂量为10g,换算为0.17g/kg,人∶小鼠=1∶12(小剂量),实验选择48倍剂量;由人的0.15g/kg换

8、成小鼠(48倍)得8g/kg。一般小鼠灌胃剂量:0.2mL/10g→20mL/kg,由8g/kg及20mL/kg换算得8g/20mL=0.4g/mL。分别取不同的混悬储备液4mL、2mL和1mL,用0.2%吐温80溶液定容于5mL容量瓶中,配成质量浓度为0.4、0.2、0.1g/mL的高、中、低剂量的混悬溶液。  2.2姜炭有效止血部位的筛选  取小鼠50只,雌雄兼用,随机分为正常对照组、石油醚组、乙酸乙酯组、正丁醇组和水组,每组10只。按8g/kg灌胃,对照组给予同体积的0.8%吐温80,

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