四色流式细胞术分析骨髓增生异常综合征原始细胞免疫表型

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1、四色流式细胞术分析骨髓增生异常综合征原始细胞免疫表型作者:吴雨洁,李建勇,仇海荣,肖冰,张建富,宋君红【摘要】为了研究骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓原始细胞免疫表型特征,应用四色流式细胞术对常规设门及二次设门策略选取的29例MDS患者的骨髓细胞悬液中,CD34+细胞进行免疫表型分析。结果表明:①随着MDS的进展(RA/RAS→RAEB→RAEB-T),根据CD45/SSC图中选取的原始细胞群中,CD34+细胞比例逐渐增高,分别为8.0%、46.4%、76.8%,各亚型之间差别有显著意义(P<0.05)。②在CD45vsSSC散点图上,设门所取的原始细胞抗原表

2、达随着RA/RAS→RAEB→RAEBT的进展,HLA-DR、CD13、CD33、CD117表达逐渐增高,CD15表达逐渐减低,差别均有显著意义(P<0.05)。③在CD45vsCD34散点图上二次设门取CD34+原始细胞行抗原表达的分析,同样异常表达HLA-DR及髓系抗原CD13、CD33和CD117,比例高于常规分析法(P<0.05),CD15比例减低,在RA/RAS中CD13、CD33、CD117和HLA-DR的表达较常规分析的原始细胞比例明显增高(P<0.05),相关抗原的表达率在各亚型间差别无显著意义(P>0.05)。结论:常规设门法能

3、反映MDS疾病的进展,而二次设门策略则更能反映MDS原始细胞的生物学特征,CD34的异常表达代表原始细胞的不成熟性和异质性,在临床高度怀疑但形态学和细胞遗传学不能诊断时,原始细胞免疫分型对MDS的诊断更具意义。【关键词】骨髓增生异常综合征  Four-colorFloetricImmunophenotypicFeaturesofBlastsinMyelodysplasticSyndromes  AbstractThisstudyedatexploringtheimmunophenotypicfeaturesofblastsinpatientsyelodysplastic

4、syndromes(MDS).Four-colorfloetryusingconventionalandsecondarygatingstrategiesmunophenotypeblastsandtheCD34positivecellsinbonemarroRA/RAS,RAEBtoRAEB-T,theproportionofCD34+cells8.0%,46.4%to76.8%(P<0.05);(2)usingCD45vsSSCgatingstrategy,ationofRA/RAS,RAEBtoRAEB-T,theexpressionofHLA-DR,CD1

5、3,CD33,CD117ethodthanthosebyconventionalgating(P<0.05).HoentionedantigensonCD34+cellsamongdifferentMDSsubtypes.ItisconcludedthatconventionalgatingmethodcanreflectMDSprogressionfromRA/RAS,RAEBtoRAEB-T,andsecondarygatingstrategymayaccuratelyreflectthebiologicalfeaturesofblastsinMDS.Abno

6、rmalexpressionofCD34isrelatedtotheimmaturitylevelandheterogenEityofblastcells,orphologyandcytogeics.  Keyyelodysplasticsyndrome;immunophenotype;four-colorfloetry;CD34+cell  骨髓增生异常综合征(MDS)是一组起源于造血干/祖细胞的恶性克隆性疾病,以外周血一系或多系细胞减少,骨髓一系或多系病态造血和高风险进展成急性髓细胞白血病为特征。我们应用一组单克隆抗体、四色六参数流式细胞术和常规和/或二次设门策略提

7、取原始细胞、CD34阳性(CD34+)细胞,对其进行了免疫表型分析,以期为临床提供合理的诊断和治疗依据。  材料和方法  病例选择  29例MDS患者,男17例,女12例,年龄20-71岁,其中RA/RAS17例、RAEB6例和RAEB-T6例。MDS的诊断参照《血液病诊断与疗效标准》(张之南,第2版)。  材料  单克隆抗体包括HLA-DR-FITC、CD15-FITC、CD2-FITC、CD10-FITC、CD20-FITC、CD33-PE、CD13-PE、CD7-PE、CD19-PE、CD117-PE、CD34-ECD和CD45-P

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