线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的改进与体会

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1、线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的改进与体会【摘要】　　目的建立一种操作简便、稳定可靠的局灶性脑缺血模型。方法分别按Zealonga线栓法和改进线栓法制作局灶性大脑中动脉阻塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型，并于术后24h从神经行为学，脑梗塞率、脑梗塞率的相对标准偏差(RSD)和模型成功率4个方面对两种模型进行评价。结果术后存活的动物均出现了神经功能缺陷症状，两组动物的脑梗塞率相比没有显著性差异（P>0.05），但改进组较Zea-longa组的变异度小，模型成功率高（χ2=4.37，P<0.05）。

2、结论改进法简便可靠，模型成功率高，是较理想的MCAO模型制作方法。【关键词】线栓法脑缺血模型　　Abstract：Toestablishasimple，stableandreliablemodeloffocalcerebralischemia.MethodsAlongethodandmodifiedmethod，themodelsofmiddlecerebralarteryocclusionodelentratioofmodel.ResultsAllthesurvivalratsdemonstratedneurologicaldeficitsympto

3、mafter24hofoperation.Thecerebralinfarctionratiobetodifiedgroupodifiedgroupodifiedmethodoffocalcerebralischemiamodeliseasiertocarryoutandmorereliable.AnditisanidealmethodformodelofMCAOethod；Cerebralischemia；Model　　脑卒中是当今严重危害人类健康的一种常见病，相当于中医上的中风病。本病可分为缺血性和出血性两大类，其中缺血性约占本病的70%［1］。与

4、出血性脑卒中相比，脑缺血具有“三高一低”的特点，即高发病率、高致残率、高复发率、低死亡率。其致残率和程度均超过脑出血。制备一种理想的动物模型是研究该类疾病的重要手段。目前脑缺血动物模型有许多种，其中线栓法制作的局灶性脑缺血模型具有不开颅、梗塞部位较确定、缺血时间可控、可用于研究脑缺血再灌注等优点，在国内外得到了广泛的采用。但是，该模型的制作难度大、死亡率高、变异度大，成为脑缺血实验研究中的拦路虎。本实验室参照ZeaLonga的制作方法并加以改进，通过使栓线前处理一致化，减少组织分离、加强术后护理等一系列措施，简化了实验的手术操作过程，提高了建模成功率和

5、稳定性。现报道如下。　　1器材　　1.1动物及分组-202型，日本AG有限公司），HHS精密电热恒温水浴锅(江苏金坛市医疗仪器厂)，市售鱼线，手术器械。红四氮唑（TTC，上海华东师范大学化工厂生产，批号2007507），氯化钠注射液（山东鲁抗晨欣药业，批号：070511708）。磷酸二氢钾（天津市天新精细化工开发中心，批号20079208），　　2实验方法　　2.1ZeaLonga制作模型的方法［2］　　栓线的制备：原ZeaLonga用的是40的单股尼龙手术线，因来源困难采用同直径的鱼线代替，将鱼线的顶端烫成光滑球面作为栓线。　　手术过程：大鼠麻醉后

6、，取颈部正中切口，分离颈总动脉(moncarotidartery，CCA)、颈外动脉(externalcarotidartery，ECA)和颈内动脉(internalcarotidartery，ICA)，分离结扎并切断ECA及其分支，结扎ICA颅外的唯一分支-翼腭动脉(pterygopalatineartery，PPA)。用动脉夹夹闭CCA和ICA，将栓线由ECA残端进线，经分叉处进入ICA，进约18mm稍有阻力感时即已达阻断大脑中动脉(middlecerebralartery，MCA)的入口，即可造成MCA的栓塞。　　2.2改进后的模型制作方法　　栓

7、线的制备：将直径0.235mm的鱼线剪成3cm长的小段，将头段靠近酒精灯的外焰，调节距离以不使鱼线过热打卷为度，加热约10min，在显微镜下筛选出头端圆滑的鱼线，酒精擦拭晾干备用。　　手术过程：用质量分数为2.5%戊巴比妥钠(0.05g·kg-1体重)腹腔注射麻醉，仰卧位固定。颈部左侧正中切口，从两侧颌下腺之间剪开浅筋膜，显露一侧胸锁乳突肌。钝性分离胸锁乳突肌与胸骨舌骨肌间的肌间隙，暴露颈总动脉和迷走神经。滴上少许利多卡因，以减少对迷走神经的刺激。手术显微镜下仔细分离CCA约5mm，并于近心端结扎，仅分离ICA及ECA近分叉处一小段，能穿线即可。在EC

8、A根部近分叉处结扎，ICA根部近分叉处打一活结。剪断CCA，将栓线由CCA残端插入ICA。调整