线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的改进与体会

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1、线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的改进与体会【摘要】  目的建立一种操作简便、稳定可靠的局灶性脑缺血模型。方法分别按Zealonga线栓法和改进线栓法制作局灶性大脑中动脉阻塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型,并于术后24h从神经行为学,脑梗塞率、脑梗塞率的相对标准偏差(RSD)和模型成功率4个方面对两种模型进行评价。结果术后存活的动物均出现了神经功能缺陷症状,两组动物的脑梗塞率相比没有显著性差异(P>0.05),但改进组较Zea-longa组的变异度小,模型成功率高(χ2=4.37,P<0.05)。

2、结论改进法简便可靠,模型成功率高,是较理想的MCAO模型制作方法。【关键词】线栓法脑缺血模型  Abstract:Toestablishasimple,stableandreliablemodeloffocalcerebralischemia.MethodsAlongethodandmodifiedmethod,themodelsofmiddlecerebralarteryocclusionodelentratioofmodel.ResultsAllthesurvivalratsdemonstratedneurologicaldeficitsympto

3、mafter24hofoperation.Thecerebralinfarctionratiobetodifiedgroupodifiedgroupodifiedmethodoffocalcerebralischemiamodeliseasiertocarryoutandmorereliable.AnditisanidealmethodformodelofMCAOethod;Cerebralischemia;Model  脑卒中是当今严重危害人类健康的一种常见病,相当于中医上的中风病。本病可分为缺血性和出血性两大类,其中缺血性约占本病的70%[1]。与

4、出血性脑卒中相比,脑缺血具有“三高一低”的特点,即高发病率、高致残率、高复发率、低死亡率。其致残率和程度均超过脑出血。制备一种理想的动物模型是研究该类疾病的重要手段。目前脑缺血动物模型有许多种,其中线栓法制作的局灶性脑缺血模型具有不开颅、梗塞部位较确定、缺血时间可控、可用于研究脑缺血再灌注等优点,在国内外得到了广泛的采用。但是,该模型的制作难度大、死亡率高、变异度大,成为脑缺血实验研究中的拦路虎。本实验室参照ZeaLonga的制作方法并加以改进,通过使栓线前处理一致化,减少组织分离、加强术后护理等一系列措施,简化了实验的手术操作过程,提高了建模成功率和

5、稳定性。现报道如下。  1器材  1.1动物及分组-202型,日本AG有限公司),HHS精密电热恒温水浴锅(江苏金坛市医疗仪器厂),市售鱼线,手术器械。红四氮唑(TTC,上海华东师范大学化工厂生产,批号2007507),氯化钠注射液(山东鲁抗晨欣药业,批号:070511708)。磷酸二氢钾(天津市天新精细化工开发中心,批号20079208),  2实验方法  2.1ZeaLonga制作模型的方法[2]  栓线的制备:原ZeaLonga用的是40的单股尼龙手术线,因来源困难采用同直径的鱼线代替,将鱼线的顶端烫成光滑球面作为栓线。  手术过程:大鼠麻醉后

6、,取颈部正中切口,分离颈总动脉(moncarotidartery,CCA)、颈外动脉(externalcarotidartery,ECA)和颈内动脉(internalcarotidartery,ICA),分离结扎并切断ECA及其分支,结扎ICA颅外的唯一分支-翼腭动脉(pterygopalatineartery,PPA)。用动脉夹夹闭CCA和ICA,将栓线由ECA残端进线,经分叉处进入ICA,进约18mm稍有阻力感时即已达阻断大脑中动脉(middlecerebralartery,MCA)的入口,即可造成MCA的栓塞。  2.2改进后的模型制作方法  栓

7、线的制备:将直径0.235mm的鱼线剪成3cm长的小段,将头段靠近酒精灯的外焰,调节距离以不使鱼线过热打卷为度,加热约10min,在显微镜下筛选出头端圆滑的鱼线,酒精擦拭晾干备用。  手术过程:用质量分数为2.5%戊巴比妥钠(0.05g·kg-1体重)腹腔注射麻醉,仰卧位固定。颈部左侧正中切口,从两侧颌下腺之间剪开浅筋膜,显露一侧胸锁乳突肌。钝性分离胸锁乳突肌与胸骨舌骨肌间的肌间隙,暴露颈总动脉和迷走神经。滴上少许利多卡因,以减少对迷走神经的刺激。手术显微镜下仔细分离CCA约5mm,并于近心端结扎,仅分离ICA及ECA近分叉处一小段,能穿线即可。在EC

8、A根部近分叉处结扎,ICA根部近分叉处打一活结。剪断CCA,将栓线由CCA残端插入ICA。调整

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1、线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的改进与体会【摘要】  目的建立一种操作简便、稳定可靠的局灶性脑缺血模型。方法分别按Zealonga线栓法和改进线栓法制作局灶性大脑中动脉阻塞(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)模型,并于术后24h从神经行为学,脑梗塞率、脑梗塞率的相对标准偏差(RSD)和模型成功率4个方面对两种模型进行评价。结果术后存活的动物均出现了神经功能缺陷症状,两组动物的脑梗塞率相比没有显著性差异(P>0.05),但改进组较Zea-longa组的变异度小,模型成功率高(χ2=4.37,P<0.05)。

2、结论改进法简便可靠,模型成功率高,是较理想的MCAO模型制作方法。【关键词】线栓法脑缺血模型  Abstract:Toestablishasimple,stableandreliablemodeloffocalcerebralischemia.MethodsAlongethodandmodifiedmethod,themodelsofmiddlecerebralarteryocclusionodelentratioofmodel.ResultsAllthesurvivalratsdemonstratedneurologicaldeficitsympto

3、mafter24hofoperation.Thecerebralinfarctionratiobetodifiedgroupodifiedgroupodifiedmethodoffocalcerebralischemiamodeliseasiertocarryoutandmorereliable.AnditisanidealmethodformodelofMCAOethod;Cerebralischemia;Model  脑卒中是当今严重危害人类健康的一种常见病,相当于中医上的中风病。本病可分为缺血性和出血性两大类,其中缺血性约占本病的70%[1]。与

4、出血性脑卒中相比,脑缺血具有“三高一低”的特点,即高发病率、高致残率、高复发率、低死亡率。其致残率和程度均超过脑出血。制备一种理想的动物模型是研究该类疾病的重要手段。目前脑缺血动物模型有许多种,其中线栓法制作的局灶性脑缺血模型具有不开颅、梗塞部位较确定、缺血时间可控、可用于研究脑缺血再灌注等优点,在国内外得到了广泛的采用。但是,该模型的制作难度大、死亡率高、变异度大,成为脑缺血实验研究中的拦路虎。本实验室参照ZeaLonga的制作方法并加以改进,通过使栓线前处理一致化,减少组织分离、加强术后护理等一系列措施,简化了实验的手术操作过程,提高了建模成功率和

5、稳定性。现报道如下。  1器材  1.1动物及分组-202型,日本AG有限公司),HHS精密电热恒温水浴锅(江苏金坛市医疗仪器厂),市售鱼线,手术器械。红四氮唑(TTC,上海华东师范大学化工厂生产,批号2007507),氯化钠注射液(山东鲁抗晨欣药业,批号:070511708)。磷酸二氢钾(天津市天新精细化工开发中心,批号20079208),  2实验方法  2.1ZeaLonga制作模型的方法[2]  栓线的制备:原ZeaLonga用的是40的单股尼龙手术线,因来源困难采用同直径的鱼线代替,将鱼线的顶端烫成光滑球面作为栓线。  手术过程:大鼠麻醉后

6、,取颈部正中切口,分离颈总动脉(moncarotidartery,CCA)、颈外动脉(externalcarotidartery,ECA)和颈内动脉(internalcarotidartery,ICA),分离结扎并切断ECA及其分支,结扎ICA颅外的唯一分支-翼腭动脉(pterygopalatineartery,PPA)。用动脉夹夹闭CCA和ICA,将栓线由ECA残端进线,经分叉处进入ICA,进约18mm稍有阻力感时即已达阻断大脑中动脉(middlecerebralartery,MCA)的入口,即可造成MCA的栓塞。  2.2改进后的模型制作方法  栓

7、线的制备:将直径0.235mm的鱼线剪成3cm长的小段,将头段靠近酒精灯的外焰,调节距离以不使鱼线过热打卷为度,加热约10min,在显微镜下筛选出头端圆滑的鱼线,酒精擦拭晾干备用。  手术过程:用质量分数为2.5%戊巴比妥钠(0.05g·kg-1体重)腹腔注射麻醉,仰卧位固定。颈部左侧正中切口,从两侧颌下腺之间剪开浅筋膜,显露一侧胸锁乳突肌。钝性分离胸锁乳突肌与胸骨舌骨肌间的肌间隙,暴露颈总动脉和迷走神经。滴上少许利多卡因,以减少对迷走神经的刺激。手术显微镜下仔细分离CCA约5mm,并于近心端结扎,仅分离ICA及ECA近分叉处一小段,能穿线即可。在EC

8、A根部近分叉处结扎,ICA根部近分叉处打一活结。剪断CCA,将栓线由CCA残端插入ICA。调整

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