线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的研究基.doc

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1、线栓法制备大鼠局灶性脑缺血模型的研究基【关键词】脑缺血大鼠线栓法MCAO随着当今社会的老龄化，人类脑血管病的发病率日益增加，我国每年新发脑卒中病例超过200万，每年死于脑卒中者约150万，生存的脑卒中患者目前多达700万。其中缺血性脑血管病占80%以上［1］，而大脑中脉闭塞(MCAO)占血管闭塞的43%［2］，因此制备一种较理想的脑缺血再灌注动物模型是研究脑血管病的重要手段及前提条件。局灶性脑缺血动物模型有许多种，建立一种具有良好重复性并能最大程度模拟人类缺血性卒中发生的动物模型一直是实验性脑血管病研究关注的重点。1986年，

2、日本学者Koizumi［3］发明了线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型，1995年，我国也出现了相关的报道［4］。此后国内外学者对它不断改进，对模型原理，栓线制备，动物选择和操作过程等各个环节和实验处理因素的认识都得到发展和改进。本研究就线栓法制备局灶性脑缺血大鼠模型中的一些关键问题和影响因素作一综述。1动物选择1.1鼠种和种系制作脑缺血模型选用的实验动物有：小鼠、大鼠、蒙古沙土鼠、猫、狗、猪、羊以及灵长类动物猕猴等，其中最为常用的是大鼠，使用率超过90%。选用大鼠作为脑缺血模型具有以下优点：种系内纯性好，同系大鼠间遗传差异小，保证

3、了试验对象的一致性；神经系统比较发达，与人类有类似的脑血管解剖特点；有极强的抗感染能力和生命力，常规操作一般不会引起伤口继发感染，能经受麻醉、外科手术及术后感染的考验，可对神经功能缺陷、药物疗效等长期观察提供可能；成本低，来源有保障；能够为动物保护者接受［2］。因此，大鼠已经成为目前最常用的局灶性脑缺血动物模型。在不同的大鼠品种之间，Fischer344大鼠的大脑中动脉(MCA)变异较小，MCAO后形成的脑梗死体积一致性好；而WistarKyoto大鼠的脑梗死体积最小，变异最大；SpragueDawley大鼠的模型效果居

4、于二者之间。Markgraf等［5］用光化学法脑缺血模型比较了SpragueDawley及Wistar-Kyoto两种大鼠的梗死情况。SD大鼠可见较恒定的顶颞皮质梗死灶，梗死体积大于Wistar大鼠，变异较小。周边可见不完全性坏死区，即半暗带，占总梗死面积的91%。Wistar大鼠梗死灶较小，但变异较大，不完全坏死区占总损伤区的30.1%。考虑到不同大鼠品种的MCAO模型效果有异，以Fischer344大鼠的模型效果最为理想，主张多选用Fischer344大鼠进行模型制备，但因鼠源问题，目前应用较少。SD大鼠MCAO后，

5、梗死体积较大，较恒定，且较温和，生长快，价格便宜，故用正常大鼠进行实验时一般常用SD大鼠［6］。此外，卒中病人常有高血压这个危险因素存在，因此在实验中高血压大鼠也常被选用。71.2鼠龄人类卒中多发生在已有卒中多重危险因素的中老年人群中，脑梗死多发于老年人群，研究者在模拟人类脑血管疾病的发病过程中，往往期望选用老龄大鼠作为实验对象，而卒中模型多选择年青、健康动物。原因在于老龄大鼠的MCA发生了不同程度的迂曲、粥样硬化、管腔狭窄等解剖及病理上的改变，因此Wang等［7］用22个月龄的老年大鼠用线栓法制备脑缺血模型时，发现由于动脉扭

6、曲或管腔狭窄使栓线难以推进即使栓线顶端正好位于MCA起始端，也引起MCA管腔增大而不能完全阻断血流，结果无一例脑梗死形成，故建议不宜盲目选用老龄大鼠制作线栓法MCAO模型，除非特别需求，鼠龄选择上仍以青年健壮为宜。另外也有研究发现，青年健壮大鼠的MCAO模型，在反映病症特点及用于检验临床药物疗效方面并不令人满意［8］，因此有些实验要在老龄大鼠进行。目前的实验中，仍以青壮年大鼠为优先选择。1.3体重随着大鼠体重的增加，血管的内径会相应增加。对不同年龄段的大鼠应该选择不同直径的栓线与之相适应，从而确保最大限度地阻断血流，因此体重因

7、素在模型的制备中也颇为关键。刘亢丁［9］认为:体重>350g，颅内血管增粗，难以充分阻断MCA血流，体重<240g，有时栓线难以插入，大鼠的体重以250～300g之间为宜；辛世萌等［10］比较后亦认为体重250～300g大鼠较体重200～240g大鼠更适合线栓法。李小凤等［11］通过研究总结出大鼠体重与栓线直径的关系：体重240～260g，插线直径0.20mm；体重261～280g，插线直径0.24mm；体重281～300g，插线直径0.26mm。不同体重段的栓线直径对确保造模成功具有至关重要性。2麻醉剂选择麻醉方

8、法的选择尤其麻醉剂的应用是模型制备中的一个重要因素。卜碧淘［12］用WistarKyoto大鼠对常用的几种麻醉剂进行实验，结果表明水合氯醛﹙400mg/kg，ip﹚、苯巴比妥钠﹙200mg/kg，ip﹚、乌拉坦﹙1000mg/kg，ip﹚都可使局灶性脑缺血造模中大鼠的体温、