琐阳花色甙复合瘤苗对实验性肺癌小鼠免疫功能影响的研究

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1、琐阳花色甙复合瘤苗对实验性肺癌小鼠免疫功能影响的研究【摘要】目的观察琐阳花色甙复合瘤苗治疗实验性肺癌小鼠体内免疫功能效应。方法用LCC细胞接种的方法制造肺癌模型，分别观察对照组(荷瘤小鼠注射生理盐水)、实验组(荷瘤小鼠免疫接种琐阳花色甙复合瘤苗)体内血清白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF)水平及脾细胞对肺癌(LCC)的细胞毒活性的变化。结果实验组IL-2、TNF血清含量与对照组相比，差异有显著性(P＜0.05)，实验组小鼠脾细胞对小鼠肺癌(LCC)的细胞毒活性显著增强，明显高于对照组(P＜0.05)。结论琐阳花色甙复合瘤苗能明显提高实验性肺癌小鼠的免疫功能。【关

2、键词】琐阳花色甙复合瘤苗;免疫肺癌小鼠；IL-2；TNF；细胞毒活性变化Reaserchofimmunityfunctiononkungtumorbycancercellvaccinemodifiedmunityfunctioninthemicethroughthecancercellvaccinemodifiedentivelungcancer.MethodsMakingalungcancermodelbyinoculatealsakinetomiceentalgroup(inoculatethecancercellvaccinemodifiediceinexperimen

3、talgroupparearkeddifference(P＜0.05)，toxicityandactivityofthecelltotheLCCobviouslyboostupinthespleencellofthericeintheexperimentalgroup(P＜0.05).ConclusionThecancercellvaccinemodifiedmunityfunctionofmiceodifiediceoriumsongaricumRupr.)的干燥肉质茎，生于荒漠草原、草原化荒漠与荒漠地带，多寄生于茨黎科白刺属(Nitraria)植物的根上。主要分布于我国西

4、北部地区，蒙古、原苏联中亚地区也有分布。锁阳味甘、性温，具补肾、助阳、益精、润肠养筋之功用。中医治阳痰、遗精、不孕、腰膝酸软、肠燥便秘、血枯、尿血等。锁阳还是较常用蒙药，名“乌兰一高要”，蒙医认为其味甘、涩，性温，具有平息“协日”，消食、健身之功效，用于泛酸、胃脱胀痛、“协日”性头痛、阳痰、腰腿痛、早泄、白带多等。琐阳是增强机体免疫功能的有效中药，在抗衰老、提高机体免疫功能方面有重要作用［1～3］。本实验用琐阳提取物花色甙(anthocyanins)生物修饰构建复合瘤苗，观察其对实验性肺癌小鼠体内血清中白细胞介素-2(IL-2)、肿瘤坏死因子(TNF)含量变化及实验组小鼠脾细

5、胞对小鼠肺癌(LCC)的细胞毒活性的影响，现将实验结果报道如下。1材料与方法1.1材料1.1.1药物琐阳花色甙，由扬州大学中西医结合研究所提供。1.1.2动物BALB/c纯系小鼠，雌雄各半，4～6周龄，体重18～25g，随机分组，购自江苏省实验动物中心。1.1.3主要试剂及器材IL-2、TNF放免试剂盒(由北京原子能研究所提供)，台式高速及低速离心机(上海医用分析仪器厂)，BECKMANDP-5500型r计数器(美国BECKMAN公司产品)。1.1.4LCC系肺癌细胞株上海生物细胞所购入，由本实验室传代。1.2方法1.2.1肺癌模型的复制肺癌细胞株LCC用RPMI-1640培

6、养液培养，常规消化后，RPMI-1640培养液洗涤。计数并调成2.5×105/ml浓度，取200：1，即5×1011个细胞种于BALB/c小鼠右前腋皮下［4］。1.2.2琐阳花色甙复合瘤苗系列生物修饰构建按本室创建的方法实施［5，6］。1.2.3细胞毒实验采用MTT法：取代传24h后的LCC作靶细胞;接种肿瘤后14天处死，荷瘤对照组小鼠及实验组小鼠和正常小鼠的脾细胞为效应细胞，效：靶比例为20：1。实验组、荷瘤对照组、空白对照组小鼠各12只（正式实验时，对照组小鼠死2只）［7］。1.2.4实验分组及免疫接种造模后小鼠随机均分为3组，每组12只，雌雄各半。(1)实验组：将琐阳花

7、色甙与培养的LCC进行系列生物构建，制成LCC-复合瘤苗组，分别对BALB/c纯系鼠进行免疫接种3次（每组10个样本，每周1次，分前左、右肢，后左、右肢，每肢按三点法接种，用量为0.4ml/肢），第28天眼眶取血，采用眶动静脉取血法，将动物倒持压迫眼球，使其突出充血后，以眼科镊子迅速取眼球，收集血液于5ml玻璃试管中，4℃静置4h，2000/min离心10min，吸取血清，进行IL-2、TNF水平检测。（2）空白对照组：未荷瘤正常小鼠接种生理盐水，方法步骤同实验组。（3）荷瘤对照组：接种生理盐水，方法步