免疫刺激复合物型白血病瘤苗对荷瘤小鼠免疫功能的影响.pdf

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1、广东医学2014年8月第35卷第15期GuangdongMedicalJournalAug．2014，Vo1．35，No．15·2321·免疫刺激复合物型白血病瘤苗对荷瘤小鼠免疫功能的影响吴隼，黄琰，马栋，杨满，字友梅，贺立山新乡医学院第一附属医院血液科(河南新乡453100)【摘要】目的观察免疫刺激复合物(ISCOM)型白血病瘤苗对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法将40只SPF级C，BL／6小鼠随机分为4组，A组不进行任何处理，B、c、D组均进行荷瘤小鼠动物模型的建立，B组采用等体积的生理盐水进行

2、治疗，C组采用灭活的FBL一3瘤苗治疗，D组采取灭活的FBL一3细胞+ISCOM瘤苗进行治疗，治疗4周后，观察小鼠一般状况、巨噬细胞(M‘p)杀伤活性和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。结果治疗后，c组Me杀伤活性、B组Me杀伤活性和CTL杀伤活性均显著低于A纽(P<0．01)，C组Me杀伤活性、D纽Me杀伤活性和CTL杀伤活性均显著高于A组(P<0．01)；C组和D组小鼠未见明显脱毛，进食较正常，瘤体小于B组；C组和D组M‘p杀伤活性和CTL杀伤活性均显著高于B组(P<0．01)，D组具有

3、最高的M‘P杀伤活性和CTL杀伤活性。结论ISCOM型白血病瘤苗可通过增强荷瘤小鼠的Me活性和CTL活性达到改善荷瘤小鼠的非特异性免疫和细胞免疫功能的作用。【关键词】白血病瘤苗；免疫刺激复合物；免疫功能急性白血病是危害人类健康的一大类疾病，治疗和胆固醇溶解于20％的Mega一10溶液中，调整浓度仍以化疗为主，但化疗的毒副作用、耐药现象等限制了为10mg／mL；皂苷溶液的配制：皂苷溶解于PBS溶液其疗效的进一步提高”。肿瘤疫苗是近年研究的热点中，调整浓度为1mg／mL。之一，其原理是通过激活患者自

4、身免疫系统，利用肿瘤1．4荷瘤小鼠动物模型的建立FBL一3培养于细胞或肿瘤抗原物质诱导机体的特异性细胞免疫和体含有10％胎牛血清的RPMI1640培养基，当细胞生长液免疫反应，增强机体的抗癌能力，阻止肿瘤的生长、至对数期后，采用0．25％胰蛋白酶消化细胞，采用细扩散和复发，以达到清除或控制肿瘤的目的j。本研胞计数板调整细胞浓度为1X10。·mL～，800r／rain离究自2011年4月至2012年5月通过建立白血病荷瘤心8min，小鼠左肋皮下注射0．2mL细胞液，于3～7d可触及肿瘤后，随机分组

5、。小鼠模型，观察免疫刺激复合物(immunostimulating1．5实验分组及治疗40只SPF级C，BL／6小鼠被complexes，ISCOM)型白血病瘤苗对巨噬细胞(M‘p)和随机分为4组。A组不进行任何处理，B、c、D组均进细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤活性的影响。现将行荷瘤小鼠动物模型的建立，B组采用等体积的生理结果报告如下。盐水进行治疗，c组采用0．2mL灭活的FBL一3瘤苗1材料与方法注射于右肋皮下，D组0．1mLFBL一3瘤苗+0．1mL1．1实验动物和细胞株40只SPF级

6、c，BL／6小鼠ISCOM疫苗注射于右肋皮下。上述各组均每周治疗1购买于新乡医学院实验动物中心，6～8周龄，体重次，治疗维持4周。灭活的FBL一3细胞制备：FBL一318．0～22．0g，雌雄各半。动物购买后，饲养于37℃恒细胞内加入丝裂霉素c(100g／mL)，于37~C水浴中放温环境，每天更换水、饲料，清理垫料。FBL一3细胞株置30min，PBS液洗3次，使用生理盐水重新调整细胞购买于中山大学实验动物中心。浓度为1X10。·mL。。。1．2试剂RPMI1640培养基(Gibco公司，美国)

7、；胎1．6疗效观察及检测指标治疗4周后，观测各组小牛血清(Gibco公司，美国)；MTT(Sigma公司，美国)；鼠外观、行为和瘤体。采用MTT考察测量各组治疗后脂肪酶蛋白(Sigma公司，美国)；卵磷脂(Sigma公司，的巨噬细胞(Me)和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀美国)；胆固醇(Sigma公司，美国)；皂苷(Sigma公司，伤活性。Me的杀伤活性=(1一与Me作用的L1210美国)；Mega一10(Amresco公司，美国)；丝裂霉素cOD值／对照L1210OD值)X100％，CTL的

8、杀伤活性=(Sigma公司，美国)。[1一(A效靶细胞一A效应细胞)／A靶细胞]×100％[1．3ISCOM疫苗的制备皂苷溶液中加入脂肪酶蛋白(1mr,／mL)使其浓度为0．02mg／mL，7℃反应121．7统计学方法用SPSS13．0统计软件，组间计数h，随后加入8O脂类混合物溶液和5mL皂苷溶液资料比较采用’C2检验。(1mg／mL)，室温下反应4h。冰浴超声处理，透析，浓2结果缩，4~C保存备用。脂类混合物溶液的配制：将卵磷脂2．1一般状况A组小鼠毛色亮泽，活动正常，进食活．2322．F-