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时间:2018-05-03
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1、卡式微柱凝胶法在血型鉴定中的应用小议【摘要】目的分析卡式微柱凝胶法在血型鉴定中的作用。方法将900位名病人同时采用卡式微柱凝胶法和传统的手工操作法作血型鉴定。结果卡式微柱凝胶法正确率为100%,手工正定型法为97.78%,正定型+反定型为100%,但在操作标准化、特异性、灵敏度、客观性方面,前者明显优于后两者。结论卡式微柱凝胶法可提高血型鉴定的检验质量。【关键词】微柱凝胶法血型鉴定近年来,卡式微柱凝胶检验法(以下简称“卡式法”)已在全国各级医院中,普遍运用,用来作血型鉴定的检验方法,相对于从前国内各级医院用手工操作作血型鉴定来说,卡式法结果准确,操作简单,时间短,试剂用量小;环境污染因此
2、下降。我院自2006年1月开始用卡式法来作血型鉴定的检测工作。并对900名住院病人作了卡式法与手工操作的平行实验,并对结果进行了比较,现将比较的结论与相关分析报道于下。1材料和方法1.1仪器孵育器:Diamed-ID(达亚美)ID-Incubator37SⅠ专用孵育器。离心机:Diamed-ID(达亚美)ID-Centrifuge12SⅡ专用离心机。1.2试剂1.2.2手工试剂抗A、抗B血清为长春生物制品研究所生产。生产批号20051104单克隆抗D为台湾贝索公司生产。1.3标本来源我院2006年10月至2007年7月外科住院病人900名,其中男623人,女277名。年龄11~86岁。抽
3、取左肘静脉2ml,肝素抗凝,同时分别用卡式法和手工操型作鉴定血型。1.4方法1.4.1卡式检测法按达亚美公司卡氏血型鉴定手册进行。取Diamed-IDABO/Rh血型鉴定卡一个,标记病人的姓名病历号等,撕去卡上的锡纸膜。配制5%的红细胞悬液(25ul病人RBC+0.5mlDiluent2低离子缓冲液)在A.B.D孔分别加入10ul抗A抗B抗D,标准血清。在A.B.D孔分别加入已配制的2%病人红细胞悬液10ul,37℃孵育15分钟,离心,按说明书提示标准判读结果。1.4.2手工操作按《全国临床检验操作规程》[1]规定,正向定型和反向定型加正向定型试管法进行。2结果将上述两种方法的鉴定结果进
4、行比较,凡正反定型和卡式检测法检验相关血型不符合者,将血液红细胞用生理盐水洗涤3次,再用两种方法重复测定,作正确率比较。3讨论卡式微柱凝胶法是抗原,抗体反应和凝胶分子筛技术相结合的检测法。它是通过葡聚糖凝胶的浓度来控制分子筛孔径大小,使分子筛只让游离分子通过,从而达到分离凝聚红细胞和游离红细胞的目的。达亚美公司生产的ABO/Rh卡既可以应用于ABO血型系统的检验,又可以进行Rh血型系统中抗D的鉴定。同时,还可以通过反定型方法,对个体的血型同时鉴定。这与《全国临床检验操作规程》对血型鉴定要求,同时通过正反向定型来准确鉴定ABO血型是相一致的。且操作简单,敏感性特异性都高于手工正定型法。而正
5、反定型相结合,虽弥补了正定型的不足。但在标准化等操作方面,同卡式检测法比较却有较大的差距。Lapiere[2]等报道,他们所发明的凝胶离心技术和良好的重复性。卡式法的优点是采用标准化定量工作,减少了操作人员的随意性,且重复性好。由于用了凝胶分子筛技术,将凝集的,游离的红细胞分开,使结果一目了然。避免了操作上的主观影响[3],所要标本量少,操作容易,省去了繁锁的洗涤过程,不再耽心抗人球蛋白抗体被中和,而产生假阳性。也便于保存,一般而言,在冰箱中可保存半年至一年。还可进行拍照供永久记录,以备发生血型鉴定错误时查对原始资料。塑料卡易销毁,不污染环境总之,卡式微柱凝胶法即使对无经验的操作者而言,
6、结果判读,要比试管法更可靠,加上操作简单,省时,用试剂少,成本低,污染环境少,是一个值得推广的血型鉴定好方法。参考文献[1]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程[M]南京:东南大学出版社,1997:89-91.[2]LapiereY.RigalDAdamJetal.Thegeltest:ane.
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