聚乙烯亚胺－肝素结合医用聚氯乙烯材料的肝素释放速率研究

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1、聚乙烯亚胺－肝素结合医用聚氯乙烯材料的肝素释放速率研究作者：杨剑，易定华，段维勋，刘剑，曹瑞军，徐学增，魏旭峰【摘要】　　目的评价聚乙烯亚胺－肝素结合处理的聚氯乙烯(PVC)材料的肝素释放速率。方法应用聚乙烯亚胺－肝素结合方法，对医用聚氯乙烯材料进行肝素结合处理，同时通过甲苯胺蓝分光光度法评测肝素的释放速率。结果应用聚乙烯亚胺－肝素结合方法所处理的聚氯乙烯材料表面肝素含量为400～700μg/cm2，于生理盐水中浸泡700h后，聚乙烯亚胺－肝素涂层的PVC表面的肝素脱落率为0.89%。结论聚乙烯亚胺－肝素结合方法涂层的稳定性良好，几乎没有肝素游离脱落，可满足心脏外科体外循环手术

2、的需求。【关键词】聚乙烯亚胺聚氯乙烯肝素涂层　　HeparinReleasingRateEvaluationofAbstract:OBJECTIVEToevaluatetheheparinreleasingrateofpolyethylenEimine-heparincoatedpolyvinylchloride(PVC)medicalmaterial.METHODSByusingpolyethylenEImine-heparincoatingtechnique,PVCmaterialofmedicalgradeetry.RESULTSTheheparinconcentrati

3、ononpolyethyleneimine-heparincoatedPVCsurface2.Aftersoakedinsalinefor700hours,theheparinreleasingrateofthepolyethyleneimine-heparincoatedPVCmaterialine-heparincoatedPVCmaterialhasgoodheparinreleasingstabilityandloeettherequirementofcardiopulmonarybypassuseinheartsurgery.Keyine;Polyvinylchlor

4、ide;Heparincoating医用聚氯乙烯材料因具有良好的物理性能而在临床上得以广泛应用，包括各种输液、输血设备，体外循环管道等。近年的研究表明，通过在人工材料表面涂覆肝素可有效改善人工材料的血液、生物相容性，减轻术后的全身炎性反应［1-2］。在国家“十五”科技攻关计划资助项目的资助下，我们与广东东莞科威有限公司协作，改良了医用聚氯乙烯的配方，制备了胸腔镜体外循环动、静脉插管，同时利用聚乙烯亚胺－肝素（PEI-H）涂层方法进行了材料的肝素结合处理。本研究通过甲苯胺蓝分光光度法测定了肝素结合医用聚氯乙烯材料的肝素分子释放速率，评价了该方法肝素分子结合的稳定性。1材料和方法1

5、.1聚氯乙烯材料医用聚氯乙烯材料选用自行研制的胸腔镜体外循环静脉插管，其组成配方包括：PVC树脂、Kxt、ESBO、CaST、液体钙锌、亚磷酸脂、细SiO2等。将静脉插管材料用模具刀切割成0.7cm×0.7cm大小备用。1.2聚乙烯亚胺－肝素结合取质量分数为30%的聚乙烯亚胺水溶液（平均相对分子量5万单位）16.7ml，加入1,1,2-三氟三氯乙烷2.5ml，25％戊二醛0.8ml，无水乙醇80ml，于37℃下配制5%聚乙烯亚胺乙醇溶液。将医用聚氯乙烯材料块浸泡于5%聚乙烯亚胺乙醇溶液中30min，再放入质量分数1%(pH=1)肝素水溶液中，37℃中水浴30min后倒出剩余溶液

6、，重复以上步骤3次，得到PEI-H结合的改良聚氯乙烯材料，干燥后备用［3］。1.3肝素标准曲线的绘制配置一系列标准浓度的肝素溶液，与精确等量的甲苯胺蓝反应，通过测定反应后剩余甲苯胺蓝溶液在631nm处的吸光度，绘制肝素标准浓度工作曲线，待测浓度肝素溶液与等量的甲苯胺蓝反应后，读取反应后甲苯胺蓝在631nm处的吸光度值，由标准工作曲线即可求出游离肝素的浓度。1.4肝素结合表面肝素含量的测定通过两步甲苯胺蓝分光光度法测定。首先测定肝素结合表面PEI-H复合物测定含量：由于PEI-H复合物的无水乙醇溶液在221nm处有最大吸收峰。将涂层表面的PEI-H复合物用无水乙醇完全洗脱，在22

7、1nm处测定其吸光度，通过与标准浓度PEI-H复合物的工作曲线比较，便可以得到涂层表面PEI-H复合物的含量。再进行PEI-H复合物中的肝素含量的测定：取一定量的聚乙烯亚胺与过量肝素反应，反应前后溶液中游离肝素含量的差值便是固定于PEI-H复合物中的肝素含量。游离肝素含量通过甲苯胺蓝法测得。测得涂层表面的PEI-H复合物含量后，由PEI-H复合物中肝素含量即可求得表面肝素含量。1.5肝素释放速率的测定将已经过PEI-H涂层处理的PVC材料室温下浸泡于生理盐水中制备浸提液。在不同的浸泡时间取样