加味失笑散对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

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1、加味失笑散对家兔心肌缺血再灌注损伤保护作用机制的研究作者：曹志然，王蓓，申文增，戎瑞雪，潘颖，张秋燕，唐志远,冯天铸【摘要】目的研究加味失笑散对心肌缺血再灌注损伤保护的作用机理。方法将日本大耳白家兔40只随机分为5组：假手术组、模型组、加味失笑散低剂量组、加味失笑散中剂量组和加味失笑散高剂量组。采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备缺血和再灌注模型，通过检测缺血前、缺血30min和再灌注60min时血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和血清肌酸激酶（CK）的变化，探讨加味失笑散对心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制。结果缺血30min和再灌注60min时模

2、型组实验动物的SOD活力较假手术组明显降低而MDA和CK明显增高（P<0.01），各用药组动物血清中的SOD活力明显高于模型组，MDA和CK活力明显低于模型组（P<0.01），且呈明显的剂量依赖性。结论加味失笑散对心肌缺血再灌注的损伤有保护作用，其作用机制是通过增强SOD的活力，清除自由基而减轻心肌的损伤。【关键词】加味失笑散；缺血再灌注；超氧化物歧化酶；丙二醛；血清肌酸激酶　　Abstract：ObjectiveTostudytheprotectivemechanismofJiamia-reperfusioninjuryofmyocardiain

3、rabbits.MethodsFortyrabbitslyinto5groups:shamoperationgroup,modelgroup,loiddledosegroupofJiamiaandisocheimmia-reperfusionmodelsadebyligatingtheleftanteriordescendingbranchofcoronaryartery.SOD,MDAandCkinserumoftheexperimentalrabbitsmia,afterisocheimmia30minandreperfusion60min.Results

4、In30minafterisoc]heimmiaand60minafterreperfusiontheactivitiesoftheserumSODinthemodelgroupoperation,andtheserumMDA,CKinthemodelgroupoperation.TheactivitiesoftheserumSODineveryexperimentalgroupgivenJiaodelgroup,andtheserumMDA,CKintheexperimentalgroupgivenJiaodelgroup.Thechangeofthecon

5、tentoftheserumSOD,MDA,CKia-reperfusioninjuryofmyocardiainrabbitsthroughreducingtheactivityofSODandremovingoxyradical.　　Keyia-reperfusion;SOD;MDA;CK失笑散来源于《和剂局方》，由五灵脂、蒲黄二味药组成，具有活血行痹、散结止痛的作用。近年来用此方加味治疗各种疾病均收到良好的效果［1］。各地报告应用多种加味失笑散治疗冠心病心绞痛均取得一定疗效，但有关加味失笑散对心肌缺血再灌注损伤作用机制的研究还未见报道。本文观察了加味失笑

6、散对家兔心肌缺血再灌注模型血清中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和血清肌酸激酶（CK）等指标的影响，初步探讨了其对心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制，为该方用于临床冠心病、心绞痛的治疗提供实验依据。　　1材料与仪器　　1.1动物日本大耳白家兔40只，体重（2.5±0.2）kg，购自于河北省实验动物中心。　　1.2药物加味失笑散由蒲黄6g，五灵脂6g，川芎6g，红花6g，桃仁9g，赤芍9g，郁金9g，冰片0.05g组成。药材购自保定市中药材公司，经专家鉴定均为真品。将上述药物按比例组成10剂，水煎煮提取3次，提取液合并，4层纱布过滤，滤液浓缩至适量。冰片

7、用适量乙醇溶解，与浓缩液混合，调整浓度为100%，即1ml相当于1g生药。　　1.3试剂与仪器SOD，CK，MDA试剂盒，购自南京建成生物工程研究所，Bradford蛋白质定量试剂盒购自TIANGENBIOTECH(BEIJING)，紫外分光光度计，TU1901(上海棱普仪器仪表有限公司)；电热恒温水浴箱，SSDA的检测在缺血前、缺血30min和再灌注60min分别从颈总动脉取血1.5ml，分离血清，按试剂盒说明检测血清中的SOD、CK活性和MDA含量。　　2.4统计学处理应用SPSS统计学软件进行统计学数据分析，结果以±s表示，主要统计学方法采用方差分析后进

8、行两两比较（LSD法）。　　3结果