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时间:2018-05-02
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1、甲醛吸入对小鼠免疫系统毒性作用作者:梁瑞峰,原福胜,白剑英,赵五红【摘要】目的 通过吸入甲醛(formaldehyde,FA)染毒小鼠观察其免疫损伤作用。方法选用健康清洁级昆明种小鼠30只,随机分成5组(即阴性对照组1,3,5?mg/m3染毒组和阳性对照组),每组6只,用静式吸入染毒方式染毒14?d处死后,计算脾脏系数、胸腺系数;测定脾脏和胸腺CD3含量、CD4含量、CD8含量;测定巨噬细胞吞噬功能、迟发超敏反应、抗体生成细胞数及脾脏淋巴细胞功能转化。结果甲醛吸入染毒可以引起小鼠脾脏系数、胸腺系数减小(
2、P<005或P<001);脾脏和胸腺CD3、CD4、CD8含量降低,CD4/CD8明显增大(P<0.05或P<0.01);脾淋巴细胞转化功能、迟发变态反应强度、抗体生成细胞数、巨噬细胞吞噬功能均随染毒剂量的升高而下降(P<0.05或P<0.01)。结论 吸入甲醛可导致小鼠免疫系统的全面损伤【关键词】甲醛;免疫损伤;免疫功能 近年来,随着社会发展和人民生活水平的不断提高,室内空气污染已成为一个公众所关注、迫切需要解决的卫生问题〔1〕。甲醛(Formaldehyde
3、,FA)是造成室内空气污染的主要物质〔2〕,其对人体的健康危害不容忽视。目前,对甲醛造成的免疫损伤国内外研究较少。因此,本文从免疫病理、细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫等4个方面对甲醛的免疫毒性作用进行了研究,为建立甲醛免疫毒性的卫生标准提供理论依据。 1材料与方法 11主要试剂 甲醛,分析纯(上海溶剂厂);注射用环磷酰胺(CP)(上海华联制药有限公司);淋巴细胞分离液,Q/GHSB85-2001(上海恒信化学试剂有限公司);3-氨丙基三乙氧硅烷(APES),32K1265(武汉博士德生物工程有
4、限公司);兔抗鼠CD3、CD4、CD8单克隆抗体,即用型RSC7219K(天津灏洋生物工程有限责任公司);浓缩型二氨基联苯胺显色(DAB)试剂盒(天津灏洋生物工程有限责任公司);刀豆蛋白A(ConA)、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)试剂盒(北京夏斯生物技术有限公司)。 12 仪器及设备 50?L静式染毒柜;GS-3交直流两用大气采样仪;VIS-7220分光光度计:PRECISA300MC电子天平;SHZ-22水浴恒温振荡器;光学显微镜,BH-2(日本OLYMPUS公司);QL-901旋涡混合器等。
5、13实验方法 采用健康昆明种纯系小鼠30只,鼠龄7周,体重18~22?g(山西医科大学动物中心)。将动物随机分为5组(即阴性对照组,1,3,5?mg/m3染毒组和阳性对照组),每组6只,雌雄各半。采用甲醛静式吸入染毒,每天染毒2?h,连续染毒14?d。阴性对照组吸入过滤的新鲜空气,处理时间与染毒组相同。阳性对照组从第8?d开始,每日按40?mg/(kg·bg)/体重(g);(2)脾脏和胸腺CD3含量、CD4含量、CD8含量测定:将取出的小鼠脾脏、胸腺按 从表2可知,各甲醛染毒剂量组小鼠脾脏CD
6、3、CD4、CD8阳性细胞数随甲醛染毒剂量的升高呈明显下降趋势,除1mg/m3染毒组CD3含量、CD4含量及3mg/m3染毒组CD4含量外,其他各测量值与对照组比较差异有统计学意义(P<001),并且两者间呈剂量反应关系(r=0771,P<001;r=0660,P<001;r=0914,P<001);且CD4/CD8明显增大,与对照组比较差异有统计学意义(P<005)。.L.编辑。 从表3可知,各染毒剂量组小鼠胸腺CD3、CD4、CD8阳性细胞数明显低于对
7、照组,除1?mg/m3染毒组外,其他组与对照组比较差异有统计学意义(P<005或P<0,01),小鼠胸腺CD3、CD4、CD8阳性细胞数与甲醛染毒剂量间有明显剂量-反应关系(r=0881,P 23脾淋巴细胞功能转化实验 1,3,5?mg/m3甲醛染毒组小鼠脾淋巴细胞转化功能吸光度(A)值分别是(0267±0124),(0235±0058),(0227±0158),与对照组小鼠脾淋巴细胞转化功能吸光度(A)值(0.467±0089)比较,差异有统计学意义(P<0
8、05或P<0.01)。 24迟发型超敏反应测定 随甲醛染毒剂量的升高,各染毒剂量组小鼠迟发超敏反应强度呈明显下降趋势,3个染毒组小鼠足垫厚度差分别为(0059±0025),(0048±0021),(0036±0018)mm,与对照组小鼠足垫厚度差(0075±0021)mm比较,差异有统计学意义(P<005)。 25抗体生成细胞测定 随染毒剂量的增加,小鼠抗体生成细胞数依次为(0855±0106)
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