十全大补汤对移植乳腺癌小鼠免疫抑瘤作用的实验研究

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1、十全大补汤对移植乳腺癌小鼠免疫抑瘤作用的实验研究作者：曹志然，韩艳梅，戎瑞雪，赵盛，王蓓【摘要】目的研究十全大补汤对荷瘤小鼠抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法以TA2移植性乳腺癌小鼠作为研究对象，给予50%SDT和灌胃，并给予化疗，以小鼠的体重、瘤重及脾内B淋巴细胞、T淋巴细胞增殖指数、IL6，TNFα，IL2作为观察指标。结果50%SDT可明显改善荷瘤鼠的一般状况，抑制肿瘤的生长；明显增强脾内T淋巴细胞的增殖，并调节B淋巴细胞的增殖，显著提高荷瘤小鼠脾细胞的IL-2，IL-6和TNF-α的分泌。结论SDT可在体内抑制肿瘤

2、的生长，并降低化疗药物对机体的免疫损伤作用。【关键词】十全大补汤；荷瘤小鼠；抑瘤率；淋巴细胞增殖指数白细胞介素2；白细胞介素6；肿瘤坏死因子α　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofShiquanDabuDecoctionontumor-inhibitionandimmunityinmiceammarycancer.MethodsTA2micelydividedintofourgroupsaftervaccinationofMA737tumortissue(namedcontrol,50%SD

3、T,CMF,CMF+50%SDT).Theoreasured.ResultsTheresultsshoor.50%SDTalsoenhancedthelevelofTlymphocyteproliferationandregulatedthelevelofBlymphocyteproliferationandpromotedthespontaneouslysecreteandstimulatedsecreteofIL6，IL2andTNFαinspleencells.ConclusionSDTcaninhibittumorgro

4、ageofimmunitycausedbychemotherapy.　　Keyor；Lymphocytecellsproliferation;IL2;IL6;TNFα　　十全大补汤(ShiquanDabuTang,SDT)由人参、当归等10种生药配伍组方，为气血双补剂。近年来国外已有报道十全大补汤可减轻肿瘤病人的化疗反应，并可抑制结肠癌小鼠的肝转移，延长荷瘤小鼠的生存期。本实验以TA2移植性乳腺癌小鼠作为研究对象，分别给予50%SDT和白开水灌胃，并给予化疗，以小鼠的体重、瘤重及脾内B淋巴细胞、T淋巴细胞增殖指数、IL6、TN

5、Fα、IL2作为观察指标，进一步研究十全大补汤对荷瘤小鼠抑瘤作用及对荷瘤小鼠免疫功能的影响，为该方的临床应用提供用药依据。　　1材料与方法　　1.1药品十全大补汤：党参，白术，茯苓，甘草，当归，川芎，白芍，熟地黄，黄芪，肉桂均购自保定市药材公司，经本院冯天铸教授鉴定均为正品。根据《中国药典》十全大补丸配方调配，按汤剂常规煎熬、过滤并浓缩成100%浓度（100ml药液相当100g生药）灭菌后备用。RPMI1640细胞培养液，LPS，ConA，MTT均为Sigma公司产品。　　1.2动物　　健康雌性TA2小鼠，5～6周龄，体重18～

6、22g，由天津医科大学实验动物科学部提供。　　1.3瘤株　　移植性小鼠乳腺癌MA737，购自天津医科大学实验肿瘤研究室。　　1.4细胞株及细胞因子标准品　　TNF敏感细胞株为A737移植　　处死荷瘤小鼠，无菌操作下取瘤块边缘无坏死组织部分切成2mm×2mm×2mm大小瘤块(约含2×106个瘤细胞)移植于右侧腹股沟皮下。　　1.5.2动物分组及处理　　将上述荷瘤小鼠随机分为4组，每组8只，1组为对照组，0.5ml/d，水灌胃，2组为单纯中药组，在接种肿瘤后的第3天用50%十全大补汤灌胃，0.5ml/次，1次/d，共14d；3组为化疗加中

7、药组，即在化疗同时用50%十全大补汤灌胃，给药剂量、时间同前；第4组为单纯化疗组。化疗采用CMF（CTX，MTX，5Fu）方案。在接种肿瘤后的第3天开始给药，1次/周，共两次。　　1.5.3检测指标①瘤重及体重的测定：电子天平及扭力天平称重。②B淋巴细胞和T淋巴细胞增殖反应的测定：采用MTT法［1］。③细胞因子的测定：制备脾细胞悬液，分别设空白孔和LPS及Con-A刺激孔，CO2孵箱培养48h后，取LPS刺激孔的培养上清测定IL6和TNFα，取ConA刺激孔的培养上清测定IL2。TNFα的测定：采用敏感细胞株法，IL6和

8、IL2的测定采用依赖细胞株MTT法，单位为pg/ml；TNFα测定采用敏感细胞杀伤法，单位为细胞杀伤活性［2］。　　1.6数据的统计学处理　　实验数据以均数±标准差(±s)表示，采用SPSS软件进行方差分析进行显著性