人鼻息肉组织及外周血ｔ淋巴细胞亚群分布的研究

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1、人鼻息肉组织及外周血Ｔ淋巴细胞亚群分布的研究【摘要】目的：研究鼻息肉组织及外周血Ｔ淋巴细胞亚群分布，探讨T细胞介导的免疫反应与鼻息肉形成的关系。方法：采用免疫组化及流式细胞术检测70例鼻息肉患者鼻息肉组织、外周血T淋巴细胞CD4+、CD8+的表达，并与30位志愿者下鼻甲粘膜、正常人外周血进行比较。结果：鼻息肉组织中可见各种炎细胞浸润，CD4+和CD8+细胞数增多（P<0.05）；其中CD4+细胞明显多于CD8+细胞。CD4/CD8与对照组有显著性差异（P<0.01）。鼻息肉患者外周血中CD4+和CD8

2、+细胞数及CD4+/CD8+比值与对照组有显著性差异。结论：鼻息肉组织和外周血中有大量T淋巴细胞浸润且高度表达CD4细胞，提示鼻息肉的形成与T淋巴细胞亚群免疫失衡有关。【关键词】鼻息肉T淋巴细胞亚群免疫组织化学流式细胞术　　TheExpressionofT-lymphocyteSubsetsintheNasalPolypsTissuesandPeripheralBloodofHumanAbstract：Objective：ToinvestigatetheinfiltrationofTlymphocytesinna

3、salpolyptissuesandtheperipheralblood,toanalyzetherolesoftheimmunityreactionofT-lymphocyteintheformationofNasalpolyp.Method：Nasalpolyptissuesamplesandperipheralblood70patients.Theinferiorturbinatemucosa30volunteersandthenormalperipheralbloodasparison.Thenasalp

4、olyptissuesamplesandparedgroupsubjectsmunohistochemicalmethod,theperipheralbloodberofCD4+andCD8+cellsinnasalpolyptissuesamples（P<0.05）.AsignificantpredominanceofCD4+cellsoverCD8+cellsples(subepithelia,aroundingglandsandbloodvessels)ofnasalpolyp.TheratioofC

5、D4+/CD8+intheunder-epidermiclayerandaroundthebloodvesselglandinthenasalpolypstissuessamples(1.96±0.18、1.99±0.19)phocyteinfiltratinginnasalpolyps.TheexpressionofCD4+inT-lymphocyteallyhigh,ationofnasalpolypisreleventtotheoff-balanceoftheimmunityofT-lymphocyte.　

6、　Keyphocyte;Immunohistochemistry；Folloetery　　1资料和方法　　1.1临床资料：70例鼻息肉标本源自我科2003年10月至2005年12月住院手术的慢性鼻窦炎鼻息肉患者，男38例，女32例；年龄25～90岁，平均57岁。其中Ⅱ型1期17例，Ⅱ型2期19例,Ⅱ型3期18例,Ⅲ型16例［1］。所有患者均经鼻内窥镜、鼻窦CT检查以及术后病理诊断证实。30例对照组鼻粘膜标本源自我科鼻中隔偏曲行鼻中隔成型术患者的下鼻甲。两组患者均无变应性鼻炎、哮喘、阿司匹林特异反应性、支气管扩张、

7、慢性阻塞性肺病、自身免疫性疾病等典型病史，近期(2周内)无急性呼吸道感染及类固醇药物应用史。两组患者均用皮内试验法进行了吸入性变应原检测及血液中特异性IgE过筛检测，均为阴性。所有标本均于手术中取材，其中对照组标本为正常下鼻甲粘膜，取下标本迅速放入10％中性缓冲福尔马林液中充分固定、石蜡包埋后备检。应用荧光免疫流式细胞术检测鼻息肉患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群CD4+、CD8+的表达,并与正常人外周血的相应指标进行比较。　　1.2试剂：鼠抗人CD4、CD8单抗购于北京迈新公司，单克隆抗体鼠抗人CD3FITC、CD4PE

8、、CD8PE购于美国BD公司，SP试剂盒购于北京迈新公司。染色方法采用S-P法染色步骤进行免疫组织化学染色。每例标本均同时做HE染色。　　1.3检测方法　　1.3.1免疫染色步骤：①脱蜡、水化组织切片，3％过氧化氢室温孵育10min，以阻断内源性过氧化物酶；蒸馏水冲洗，PBS浸泡5min；②切片浸入pH6.0枸橼酸缓冲液(800ml/架～1500ml/架)中，置微波加热中